天麻醇提物对灰树花菌丝体β-葡聚糖及发酵液成分的影响研究

发布时间：2020-05-27 10:28

【摘要】：本论文重点进行天麻醇提物参与灰树花发酵,影响菌丝体β-葡聚糖及发酵液成分的研究。通过正交试验优化了灰树花菌丝体β-葡聚糖提取工艺;在灰树花发酵体系中添加不同浓度的天麻醇提物,研究天麻醇提物对灰树花菌丝体生长、菌丝体多糖及β-葡聚糖含量的影响,采用高效液相色谱法测定了天麻醇提物中天麻素、对羟基苯甲醛及对羟基苯甲醇的含量,探明这三种成分中对灰树花菌丝体生长、菌丝体多糖及β-葡聚糖增效贡献力最大的成分及最适添加量;研究了对羟基苯甲醛对灰树花发酵液成分变化规律的影响;研究了灰树花发酵液对免疫低下小鼠免疫功能的影响。主要研究结果如下:考察了两株灰树花菌株(菌1和菌2)在相同培养与提取条件下菌丝体β-葡聚糖的产量,结果表明,菌2菌丝体β-葡聚糖的产量较高,确定以菌2进行菌丝体β-葡聚糖的提取工艺优化。以灰树花菌2菌丝体为原料,通过比较热水浸提法、热水-复合酶法、超声波法、超声波-复合酶法四种提取方法,试验其菌丝体β-葡聚糖的提取技术,结果表明,超声波-复合酶法提取β-葡聚糖的得率高于其他三种方法的得率。在单因素试验基础上,采用正交试验设计,以β-葡聚糖得率为评价指标,对超声波-复合酶法的提取工艺条件进行优化。结果表明,最佳提取工艺条件为超声功率300 W,超声时间15 min,复合酶添加量1.5%,酶解温度40℃,在该条件下,β-葡聚糖得率可达2.80 mg/g。在灰树花发酵体系中添加不同浓度天麻醇提物,研究天麻醇提物浓度对灰树花菌丝体生长、菌丝体多糖及β-葡聚糖含量的影响,采用高效液相色谱法对天麻醇提物中天麻素、对羟基苯甲醛及对羟基苯甲醇的含量进行测定,结果表明,在天麻醇提物添加量为7 g/L时对灰树花菌丝体生长、菌丝体多糖及β-葡聚糖的促进作用均是最好的,天麻醇提物中特征成分天麻素、对羟基苯甲醛、对羟基苯甲醇的含量分别为5.838 mg/g,1.107 mg/g,0.660 mg/g。在灰树花发酵体系中添加不同浓度的三种单一天麻醇提物特征成分,探明这三种成分中对灰树花菌丝体生长、菌丝体多糖及β-葡聚糖增效贡献力最大的成分及最适添加量。结果表明,对羟基苯甲醛均是对灰树花菌丝体生长、菌丝体多糖及β-葡聚糖增效贡献力最大的成分,其最适添加量分别为100mg/L、250 mg/L和150 mg/L。研究了对羟基苯甲醛对灰树花发酵液成分变化规律的影响,考察了对羟基苯甲醛对灰树花发酵过程中菌丝量、还原糖、p H值、胞外多糖、胞外蛋白、发酵液提取物多酚黄酮类物质含量的变化规律。结果表明对羟基苯甲醛均能一定程度促进灰树花发酵液中多糖、蛋白质、多酚黄酮类活性物质的生物合成。以灰树花发酵液为受试物,免疫力低下小鼠为受试对象,开展了灰树花发酵液对小鼠免疫力的试验。试验结果,高剂量正常发酵液及三种剂量的天麻发酵液均能显著提高免疫低下小鼠的脾腺指数;各试验组灰树花发酵液均能显著提高免疫低下小鼠耳肿胀度,刺激迟发型变态反应;高剂量正常发酵液和高剂量天麻发酵液能显著提高小鼠血清Ig G含量;高、中剂量的正常发酵液和高、中天麻发酵液都能显著提高小鼠血清Ig M含量。
【图文】：

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结果见图2.1。由图可知，标准曲线回归方程式为 y=7.3958x+0.0017，R2=0.9994，，葡萄糖含量和吸光度值呈良好的线性关系，表明该标准曲线有较好的精确度，可用于多糖的测定。图 2.1 葡萄糖标准曲线Fig. 2.1 Standard curve of glucose2.4.2 β-葡聚糖标准曲线的制作按照 2.3.4.3 节中β-葡聚糖标准曲线的测定方法绘制相应的标准曲线，结果见图 2.2。由图可知，标准曲线回归方程式为 y=7.1107x-0.0058，R2=0.9995，β-葡聚糖含量和吸光度值呈良好的线性关系

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图 2.2 β-葡聚糖标准曲线Fig. 2.2 Standard curve of β-glucan.4.3 两株灰树花菌体多糖和β-葡聚糖产量的比较灰树花菌丝体多糖和β-葡聚糖的产量不仅与培养基、培养条件和刺激物，而且还与灰树花菌种紧密相关。通过实验对比灰树花菌 1、2 的菌丝体多β-葡聚糖的含量，选出产β-葡聚糖的较优菌株，以便后期作进一步研究。结图 2.3 所示。1.21.41.61.8得率/(mg·g-1)β-葡聚糖得率总多糖得率糖得率/％4.44.64.85.0
【学位授予单位】：贵州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：TQ929

【参考文献】