润滑油降解菌的筛选和降解性能研究

发布时间：2020-07-20 14:22

【摘要】：润滑油在工业汽车等方面有着广泛的应用,但是废旧润滑油中含有烷烃、环烷烃、芳香烃及重金属等难降解成分,不加处理,会造成环境污染。物化方法操作成本高,降解不彻底,且二次污染严重,而生物法可以将有毒害污染物作为底物进行有效降解。筛选出高效的降解菌成为生物修复技术的核心。本研究旨在筛选高效降解废润滑油的菌株,并对其降解润滑油性能研究,得到如下结论:(1)从长期被原油污染的土壤中筛选出2株降解润滑油菌株,命名菌株X1和X2,镜检为细菌,采用16Sr DNA技术鉴定菌株X1和X2,得到其基因片段序列,在GenBank上获得登录号分别为KX620435和KX620436,经Blast和进化树分析确定菌株X1和X2分别为伤口埃希菌和黄假单胞菌。(2)对菌株X1和X2测定,得出菌株X1的降解效果较好,其降解效果达40.83%。对菌株X1生长培养基正交优化,得出培养基中成分影响程度由高到低是蛋白胨,牛肉膏,氯化钠;优化后的培养基组分是水1000 mL,牛肉膏5 g,氯化钠4.50 g,蛋白胨10 g,pH为7.0。优化后菌株X1的干重从1.49 g/L提高至1.91 g/L,增长了1.28倍。对菌株X1生长影响因素单一试验探究得出:在最优条件下,即转速160 r/min,温度35℃,pH 7.0,培养24 h时,菌株X1干重达2.34 g/L。(3)对菌株X1降解润滑油性能探究:(1)菌株X1接种到含润滑油无机盐培养基的最佳接种量是4%;最佳pH是7.5;初始润滑油浓度越低菌株X1降解效果越好;菌株X1的降解效果随氯化钠浓度的升高而降低,当不加氯化钠时降解效果最好。(2)不同的氮源对菌株X1降解效果由高到低为:NaNO3NH4ClNH4NO3(NH4)2SO4CO(NH2)2;外加碳源对菌株X1降解效果影响为:麦芽糖葡萄糖淀粉柠檬酸蔗糖。(3)对菌株X1降解的影响因素接种量、温度、麦芽糖浓度、初始润滑油浓度正交优化试验,得出在温度35℃,接种量6%,润滑油浓度1000 mg/L,不加麦芽糖,以润滑油为唯一底物时,降解效果达63.44%。(4)采用X1、X2混合菌株复配对降解润滑油效果进行研究:当菌株X1:X2=1:3,总混合菌接种量为8%时对润滑油的降解效果最好,降解效果达80.92%。(5)通过对菌株X1的生长和降解动力学研究发现:其生长动力学规律符合Logistic模型;其降解动力学规律符合一级速率模型。
【学位授予单位】：武汉工程大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：TQ920.6;TE626.3
【图文】：

形态特征,菌株,镜检,普通显微镜

17图 2.1 菌株 X1 和 X2 形态特征Fig.2.1 The morphological characteristic of X1 and X2从外观形态和普通显微镜下观察：X1 和 X2 初步判断为细菌黄色，镜检下聚集成团，呈短杆状；X2 菌落呈乳白色，镜检，呈长杆状。将菌株 X1 和 X2 接种到斜面固体培养基，4 ℃。

标准曲线,吸收值,润滑油,透光率

3.2 润滑油标准曲线的绘制1）最大吸收波长的确定取 32 mg/L 的标准油，以正己烷为参比，在紫外分光光度计上定，发现有两个最大吸收峰，对应的波长为 228 纳米和 256 纳米 228 nm 处吸光度是 1.12，256 nm 处吸光度是 0.45，从本实验所配准油来看，浓度相同时吸光度的相差两倍多。另外一般要求正己测波长处的透光率≥85%，市售的正己烷透光率达不到要求，脱芳处理后，在 228 nm 处透光率达 80%，在 256 nm 处可以达到 99%稀释倍数和透光率两个因素考虑，选择 256 nm 作为测定波长。

标准曲线,标准曲线,润滑油,趋势函数

图 2.3 正己烷在 200-300 nm 波段下的透光率Fig.2.3 Transmittance of n-Hexane at 200-300 nm（2）标准曲线的绘制根据前面一系列数据的绘制得到趋势函数：y=0.0141x+0.001R2=0.9999。如图 2.4：

【相似文献】