达托霉素产品杂质组分的鉴定与分离控制

发布时间：2020-08-09 04:39

【摘要】：达托霉素(Daptomycin)是玫瑰孢链霉菌发酵液中提取得到的一类新的脂肽类抗菌药物,拥有强大的抗革兰氏阳性菌的作用,是继“抗生素最后一道防线”万古霉素后的新型抗生素。为了进一步提高达托霉素产品的质量,使其能顺利进入国外市场,将达托霉素生产过程中产生的杂质组分进行深入考察具有重要的意义。在达托霉素的合成过程中,主要伴随6种主要杂质产生,分别为内酯水解物、β-异构体、脱水达托霉素以及杂质C、D和E。本文首先确定了达托霉素及其它杂质组分的检测方法,并对检测方法的溶液稳定性、检测限、专属性、精密度、定量限、线性、耐用性、准确度进行了验证,证明该分析方法可以准确定量地测定达托霉素合成过程中有机杂质组分的含量。对上述6种杂质进行了分离纯化、定性分析。经过结构鉴定,最终确定内酯水解物的分子式是C_(72)H_(103)N_(17)O_(27);β-异构体的分子式为C_(72)H_(101)N_(17)O_(26);脱水达托霉素的分子式为C_(72)H_(99)N_(17)O_(25);杂质C的分子式为C_(74)H_(104)N_(17)O_(27);杂质D的分子式为C_(73)H_(104)N_(17)O_(26);杂质E的分子式为C_(74)H_(102)N_(17)O_(26)。根据杂质产生的影响因素实验,发现β-异构体、脱水达托霉素在高温和酸性环境下更易生成,内酯水解物在高温和碱性环境下更易生成,杂质C和E在高温环境下更易生成,杂质D为工艺过程中产生。在工艺优化过程中一方面在保证各个步骤的料液温度≤25℃的情况下对生产设备管道增加保温材质,另一方面安装调pH流量计,固定调酸碱流速为0.6毫升/分钟,通过以上手段实现了脱水达托霉素、内酯水解物、β-异构体、杂质C和杂质E含量分别下降了0.24%、0.19%、0.12%、0.14%、0.04%,达到了脱水达托霉素≤1.5%、内酯水解物≤1.0%、β-异构体≤1.0%、杂质C≤1.0%、杂质D≤1.0%、杂质E≤1.0%的要求,最终实现了提高达托霉素产品质量的目的。
【学位授予单位】：浙江工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：TQ927
【图文】：

霉素简介素[1,2]（Daptomycin）是抗生素家族中第一个新型环酯肽类产H101N17O26，分子量为 1620.7，化学名为：N-癸酰基-L-色氨酰L-天冬氨酰基-L-苏氨酰基氨基乙酰基-L-鸟氨酰基-L-天冬氨酰天冬氨酰基氨基乙酰基-D-丝氨酰基-苏式-3-甲基-L-谷氨酰基 基 -L- 丙 氨 酸 1- 内 酯 。 英 文 化 学 名l-L-tryptopHyl-D-asparaginyl-N-[(3S,6S,9R,15S,18R,21S,24S,30SpHenyl)-2-oxoethyl]-24-(3-aminopropyl)-15,21-bis(carboxymethypropan-2-yl]-9-(hydroxymethyl)-18,31-dimethyl-2,5,8,11,14,17,20oxa-4,7,10,13,16,19,22,25,28-nonaazacyclohentriacontan-30-yl]-L霉素结构由癸酰基侧链和 13 个氨基酸组成。其中 3 个氨基酸 10 个氨基酸形成一个氨基酸环。达托霉素的四个侧链羧酸（个甲基谷氨酸）结构组件已被证明是抗菌活性必不可少的组见下图 1-1。

空白溶液Fig2-2Blanksolution

标准品溶液Fig2-3Standardsolution

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本文编号：2786620