萱草花中类黄酮提

发布时间：2020-10-31 13:52

　　 萱草为多年生宿根百合科萱草属植物,广泛分布在我国南北各省,资源丰富。萱草花,又称中国“母亲花”,是“观为花”、“用为药”、“食为菜”的花卉。本研究以萱草花为原料,以类黄酮提取率为指标,优化了超声辅助提取工艺,并优化了大孔树脂纯化萱草花类黄酮提取液的工艺;利用最优的提取和纯化工艺处理了20种萱草花,利用高效液相色谱仪-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)对20种萱草花中类黄酮成分进行了定性和定量分析,并测定了总黄酮含量和体外抗氧化性,为萱草花中类黄酮资源利用提供理论支持,主要研究结果如下:(1)对萱草花中类黄酮类物质进行超声提取,在单因素实验的基础上,选择对类黄酮提取率影响较大的三个因素进行响应面优化设计。结果表明,响应面回归模型显著,失拟相不显著,则建立的响应面回归模型适合对萱草花中提取类黄酮进行预测。萱草花中类黄酮最佳提取条件为:乙醇体积分数75%,超声功率198W,超声时间23min。在此条件下,萱草花中类黄酮提取率为91.15%,与预测值91.73%接近。(2)考察了六种树脂对类黄酮的静态吸附解析性能,通过对比可知,AB-8大孔树脂的吸附量、解析率和纯化率最高,适合纯化萱草花类黄酮粗提液。以泄漏点为指标优化动态吸附工艺,泄露点出现最晚的工艺条件为:流速5BV/h、pH 4、上样浓度1.0mg/mL,在此条件下树脂动态吸附量最高;对于动态解析工艺,以不同体积分数的乙醇为洗脱液进行解析,80%乙醇解析效果最好。通过大孔树脂吸附解析,萱草花类黄酮粗提液的纯度从12.35%提升到43.28%,其纯度提高了3.5倍。(3)建立了检测萱草花中类黄酮成分的高效液相色谱法,分析条件为:柱温35℃、进样体积10μL,流速0.8mL/min,扫描波长254nm和280nm,流动相A为0.1%甲酸水溶液,B为乙腈,梯度洗脱程序:0~2min,A为95%~95%;2~10min,A为95%~80%;10~20min,A为80%~75%;20~25min,A为75%~75%;30~45min,A为75%~40%。对20种萱草花的类黄酮成分进行分析检测,均检测出儿茶素、表儿茶素、芦丁、异槲皮素和白杨素。通过测定DPPH自由基清除率和·OH自由基清除率,以维生素C(Vc)当量表示体外抗氧化性,萱草花“红贝贝”体外抗氧化性最高,萱草花“牧羊人”体外抗氧化性最低。利用偏最小二乘法(PLS,partial least squares)建立了类黄酮组成成分与抗氧化性之间的关系,其中表儿茶素、芦丁和异槲皮素与抗氧化性的相关关系较好。
【学位单位】：上海应用技术大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：TQ28
【部分图文】：

图 1.1 2-苯基色原酮结构g1.1 2-phenylchromone struc图 1.2 天然类黄酮物质结构1.2 Structure of natural flavo

图 1.2 天然类黄酮物质结构Fig 1.2 Structure of natural flavonoids1.2.2 类黄酮化合物性质1.2.2.1 物理性质类黄酮化合物俗称黄碱素，多为黄色固体晶体，少数无定形粉末，熔点温度范围较宽，在 200~500℃之间。色原酮本身是无颜色的，由于 2-位引入苯环基团，在苯环基团上存在共轭效应会对颜色有影响，同时，助色基团（羟基或甲氧基）的数目和位置也会影响颜色，花色素一类的黄酮容易受酸碱影响，其中类黄酮化合物易于多糖结合生成糖苷键，糖苷键越多，溶解度越大，同时类黄酮的结构上甲氧基团越多，则水中溶解度就越低[26]。1.2.2.2 化学性质大多数类黄酮化合物会发生显色反应，但显色原理不同。还原反应主要为类黄酮与盐酸-镁粉或锌粉反应，多呈现橙红色或紫红色，但异黄酮类不发生显色反应[27]；金属盐类试剂络合反应主要为带有羟基和酮基的类黄酮上，在碱性条件下与铝离子络合，生成橙红色或红色络合物，在 510nm 处有最大吸收峰，是实验室中最方便的测量类黄酮含量的方法[28]。

萱草花中类黄酮成分，为萱草花中类黄酮资源的利用提供理论支持。1.4.2 研究内容（1）萱草花类黄酮提取工艺优化萱草花为原料，采用超声辅助提取法，提取溶剂乙醇，以类黄酮提取率为指标，采用响应面实验优化提取工艺，得到超声提取萱草花中类黄酮的最佳提取条件。（2）萱草花类黄酮纯化工艺优化以静态吸附解析性能为指标筛选树脂，然后绘制树脂静态吸附解析曲线，并研究不同上样浓度和 pH 对静态吸附的影响，以动态吸附泄漏点为指标，优化动态吸附工艺，同时又研究了不同体积分数的乙醇对 AB-8 大孔树脂的解析率的影响。（3）分析萱草花中类黄酮成分提取 20 种萱草花中类黄酮并用大孔树脂进行纯化，测定各个品种类黄酮的体外抗氧化性，然后建立高效液相分析方法萱草花中类黄酮成分，测定萱草花中类黄酮各个组分的含量，最后通过偏最小二乘法（PLS，partial least squares）分析类黄酮成分与体外抗氧化性之间的关系。1.4.3 技术路线
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本文编号：2864030