大连厚叶海带褐藻聚糖硫酸酯的分离纯化及其抗炎作用研究

发布时间：2020-11-02 12:00

　　 褐藻聚糖硫酸酯(Fucoidan)是一种从褐藻中提取的具有多种生物活性的水溶性硫酸杂多糖。本文以大连厚叶海带Fucoidan为原料,经DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱分离纯化得到F1,F2两个组分。其回收率分别是23.25%,25.19%,硫酸基团含量分别是2.94%,41.34%,总糖含量分别是75.00%,44.91%。采用高效液相色谱分析其单糖组成,F1主要含有甘露糖,F2主要含有岩藻糖。采用傅里叶红外光谱分析,F1硫酸基团分布在C2、C3位置上,F2硫酸基团分布在岩藻糖C4位置上。动物实验研究结果表明:DF、F1、F2的低和高剂量组均不同程度降低了IL-1β、IL-6、TNF-α水平,升高了IL-10水平。与模型组相比,DF高低剂量组、F1高低剂量组、F2高剂量组极显著降低了IL-6、TNF-α水平,显著提高了IL-10水平;F1高低剂量组、F2高剂量组极显著降低了IL-1β水平,在各实验组中,F2高剂量组对IL-1β、IL-6指标降低最多效果最好。同时与模型组相比,DF高剂量组,F1、F2的低和高剂量组均极显著降低了MDA活力,DF低剂量组显著降低了MDA活力,其中F2高剂量组降低最多效果最好;相较于模型组,DF、F1、F2低和高剂量组均极显著提高了SOD、GSH-Px水平,F1高剂量组提高效果最好。利用RT-PCR技术检测各组分对炎症相关基因COX-2、iNOS、IκB-α、NF-κB的mRNA表达,结果表明与模型组比较,DF高低剂量组、F1高剂量组、F2低剂量组极显著降低COX-2 mRNA的表达水平。F1高剂量组、F2低、高剂量组极显著降低了iNOS mRNA的表达,DF低剂量组、F1低剂量组显著降低了iNOS mRNA的表达,其中F1高剂量组的降低效果最好。同时与模型组相比,DF、F1、F2低和高剂量均极显著升高IκB-αmRNA的表达。DF高剂量组、F1高剂量组及F2高低剂量组极显著降低NF-κB mRNA的表达,DF低剂量组及F1低剂量组显著降低NF-κB mRNA的表达,且F1高剂量组的降低水平最多,抑制NF-κB mRNA的表达效果最好,表明大连厚叶海带褐藻聚糖硫酸酯能够在炎症基因水平上调整抑制胃炎炎症,改善炎症反应。
【学位单位】：大连海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：TQ281
【部分图文】：

F12.2.5 傅里叶红外光谱法分析准确称取 DF 纯化后各组分 2 mg，加入适量溴化钾反复研磨，压制成透明均匀的薄片。用 Nicolet-470 型红外光谱仪扫描 4000～400cm-1波长范围内的吸收值51,52]。2.2.613C 核磁共振波谱分析利用 Bruker AVANCE III 核磁共振波谱仪在频率为 500MHz、温度为 25 ℃的条件下，对纯化后各组分进行13C NMR 核磁共振分析[51,52]。2.3 结果分析2.3.1 大连厚叶海带 Fucoidan 分离纯化结果

图 2-2 标准品高效液相色谱图Fig.2-2 HPLC of standardManRhaGlu-UAGal-UAGluGalXylFuc时间 time/min

标准品高效液相色谱图
【参考文献】

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本文编号：2867020