双氧木脂素A诱导白纹伊蚊的转录组差异分析

发布时间：2020-12-11 23:36

　　双氧木脂素A（haedoxan A,HA）是从多年生草本植物透骨草（Phryma leptostachya L.）中分离鉴定的一种二氧双环辛烷木脂素类化合物,HA对多种害虫有效,尤其对家蝇和蚊子幼虫具有较高的杀虫活性。前期的症状学观察表明,供试昆虫经HA处理后肌肉松弛、虫体不自主震颤、出现麻醉现象并最终死亡,根据处理昆虫的中毒症状推测HA可能作用于昆虫的神经元或肌肉受体,但其具体的药物作用机制和靶标尚不清楚。基于高通量转录组测序技术,使得从生物体的转录层面筛选药物及其相关作用机制成为可能。因此,本研究利用Illumina高通量测序技术对HA亚致死剂量处理24 h后白纹伊蚊三龄幼虫和未处理的照组进行了转录组测序,从生物信息学角度分析了HA诱导下白纹伊蚊的差异表达基因,并就HA显著作用的神经节鞘糖脂生物合成途径进行了分析和验证,为进一步探索HA的作用机理提供了一定的参考依据。主要结果如下:1、双氧木脂素A（HA）对白纹伊蚊3龄幼虫的毒力测定表明,HA对白纹伊蚊杀虫活性高,LC₅₀为0.31μg/mL,从而选择亚致死剂量诱导浓度LC₃₀为0.2μg... 

【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1.1 植物源农药及透骨草概述
        1.1.1 植物源农药的概述
        1.1.2 透骨草概述
        1.1.3 透骨草化学成分
        1.1.4 透骨草中化合物的杀蚊活性
        1.1.5 双氧木脂素A作用机理研究进展
    1.2 转录组概况
        1.2.1 转录组
        1.2.2 转录组测序在毒理学中的应用
    1.3 白纹伊蚊及其组学研究
        1.3.1 白纹伊蚊
        1.3.2 白纹伊蚊的组学研究
    1.4 论文的设计思路
第二章 材料和方法
    2.1 供试材料
        2.1.1 供试药剂
        2.1.2 供试昆虫
        2.1.3 主要试剂
        2.1.4 主要仪器
    2.2 方法
        2.2.1 HA对三龄白纹伊蚊幼虫的毒力测定
        2.2.2 转录组样品制备
        2.2.3 试虫RNA提取及质量检测
        2.2.4 转录组测序及文库构建
        2.2.5 转录组测序数据分析
        2.2.6 β-半乳糖苷酶（GLB1）酶活性测定
第三章 结果与分析
    3.1 亚致死剂量诱导浓度的确定
    3.2 白纹伊蚊总RNA质量检测
    3.3 测序数据的产出与组装
    3.4 差异表达基因的筛选与功能注释
        3.4.1 差异表达基因的筛选
        3.4.2 差异表达基因的GO注释
        3.4.3 差异表达基因的KEGG注释
    3.5 关键基因的差异表达分析
    3.6 β-半乳糖苷酶活性测定
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
致谢
个人简历



本文编号：2911429