基于多酶协同的菊芋主要成分的能源化利用

发布时间：2020-12-19 20:43

　　本文目的是构建菊粉酶基因、果胶酶基因及木聚糖酶基因,充分利用菊芋的主要成分。首先,将菊粉酶基因整合到实验室前期构建好的半乳糖(GAL)诱导型和磷酸甘油酸激酶(PGK)组成型这两种强启动子的表达载体中来促进酿酒酵母对菊粉的利用,通过培养基优化提高酵母的乙醇产率,筛选出优势启动子PGK。为解决菊芋中果胶、木聚糖不能被酿酒酵母直接利用等难题,将果胶酶基因和木聚糖酶基因整合到含有PGK启动子的表达载体中,促进酵母对底物的利用。其次,分别将菊粉酶基因、木聚糖酶基因和果胶酶基因通过电转化的方法导入到毕赤酵母中,发酵完成后测定乙醇浓度。在这三种不同基因的作用下,将菊芋中各类多糖水解转化为发酵性单糖制备燃料乙醇,这些酵母在燃料乙醇的制备应用上具有重要价值。本研究的主要结果:(1)酿酒酵母宿主,以菊粉为底物的培养基中,野生型酿酒酵母产乙醇浓度为2.7 g/L,含PGK启动子转基因酵母产乙醇浓度为71.74 g/L;含GAL启动子转基因酵母产乙醇浓度为60.35 g/L,以木聚糖为底物的培养基中,野生型酿酒酵母产乙醇浓度为0.909 g/L,含PGK启动子转基因酵母产乙醇浓度为11.17g/L;以果胶为底... 

【文章来源】：武汉轻工大学湖北省

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

菊粉的分子结构

INU基因扩增及表达载体构建Fig.2.5AmplificationofINUgeneandconstructionofexpressionvector

质粒图谱

【参考文献】：
期刊论文
[1]不同提取方法对菊芋块茎总糖及还原糖含量的影响[J]. 田萌,蒋晓婷,田洁,王丽慧,钟启文.  青海大学学报. 2017(05)
[2]海藻糖与热激蛋白在酿酒酵母耐受乙醇胁迫中的作用[J]. 方华,李灏.  中国生物工程杂志. 2014(06)
[3]果胶酶活力的测定方法研究[J]. 张飞,岳田利,费坚,袁亚宏,高振鹏.  西北农业学报. 2004(04)
[4]分光光度法测定果胶酶活性方法的研究[J]. 李忠福,徐建国.  黑龙江医药. 2002(06)
[5]酒精发酵中应用酸性蛋白酶的研究[J]. 赵华,赵树欣,张维,邹海晏.  食品与发酵工业. 1997(02)

博士论文
[1]食品级酿酒酵母高效分泌/展示表达系统构建[D]. 郭钦.浙江大学 2009

硕士论文
[1]酿酒酵母不同生长周期细胞对乙醇胁迫的响应[D]. 易晨峰.北京化工大学 2015
[2]以菊芋为原料同步糖化发酵生产燃料乙醇研究[D]. 杨利博.河北科技大学 2010



本文编号：2926542