阿维链霉菌固态发酵工艺及抗线虫活性研究
发布时间：2020-12-27 04:05
近年来,随着人们对环境保护、食品安全的重视,农药向着无毒易降解制剂的方向发展。阿维菌素作为高效低毒易降解的生物农药,已得到深入的研究与广泛的应用。阿维菌素是由阿维链霉菌（Streptomyces avermitilis）产生的一类具有广谱杀虫作用的抗生素,它包括8个组分,其中B1组分对线虫的防治最为有效。目前,阿维菌素产品主要是利用液态发酵进行生产获得的,但是液态发酵对环境带来较大的危害,例如生产过程产生的废渣废水较多,同时在阿维菌素生产、制剂化过程中需添加大量的难以降解的有机溶剂,这些有机溶剂给应用的植物和土壤带来较大的危害。因此开发生产过程废渣废液产生少、有机溶剂环境污染风险小、具有较好抗虫效力的优良产品的新型发酵工艺成为当前阿维菌素生产工艺研究的热点。固态发酵方式常用于放线菌产抗生素的生产,具有废渣、废液少、外源有机溶剂添加剂少、环境兼容性好等优点,因此本工作拟采用固态发酵方式,期望找到一种环境兼容性较好的阿维菌素生产方式。本文主要对阿维链霉菌AVM5的固态发酵生产工艺条件进行了研究,以菌数为指标优化了固态发酵培养基成分和发酵条件,利用HPLC分析检测了阿维菌素的产量,并将固态发...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：94 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
阿维菌素结构式Fig.1Thestructureofavermectins
图 2 阿维菌素的化学稳定性Fig.2 The chemical stability of avermectins根据国家农药毒性分级标准，阿维菌素类药物属高毒杀虫剂。原药大鼠急性经D50 为 10-27 mg/kg，呈中毒或低毒，对皮肤无刺激作用，对眼晴有轻微刺激作obert Land Krieger 2001)。在试验剂量内对动物无致畸、致癌、致突变作用。使法得当，在常用剂量范围内，对人、畜、天敌安全(李力等 2010)。3 阿维菌素用途阿维菌素是从土壤微生物阿维链霉菌代谢产物中分离得到的天然产物，是可持无公害生物防治产品，与 Bt 号称世界两大生物农药(喻子牛 1993)，对多种蔬棉花等作物的相关虫害防治有非常好的效果，是当今世界上最有前途的生物杀。1985 年阿维菌素作为农药投入市场，打开了在农药商品中的市场(陈金松等
c d图 30 阿维菌素标准品在不同流动相条件下高效液相分析图谱a)流动相 1，b)流动相 2，c)流动相 3，d)流动相 4Fig.30 The HPLC map of standard avermectins by different mobile phasea) mobile phase 1，b) mobile phase 2，c) mobile phase 3，d) mobile phase 4图 30-a 结果表明，以甲醇：乙腈：水=38:38:24 作为流动相，各组分分离效果最好，但是出峰时间较慢，且基线不稳定，操作效率不高；图 30-b、30-c、30-d 结果表明，以甲醇和水或甲醇和甲酸水作为流动相，各组分出峰时间均大幅度提前，峰型未受明显干扰，但如图 30-d 所示，有甲酸水的实验组基线不稳，需要不断调整，；再比较两种不同比例关系的甲醇与水流动相组合，如图 30-b 和图 30-c，出峰时间与峰型图均较好。综合考虑，为使试验方法简单、重复性强且成本较低，故确定甲醇：水=95:5 作为流动相组合，即图 30-c 所示。
【参考文献】：
期刊论文
[1]阿维菌素有机肥中阿维菌素含量的分析测试研究[J]. 曲鹏晶,史香. 化肥工业. 2017(04)
[2]阿维链霉菌BAC文库的构建及分析[J]. 刘家栋,王革娇,罗美中. 华中农业大学学报. 2016(05)
[3]从阿维菌素获得诺贝尔奖到中国创造[J]. 陈金松,刘梅,张立新. 微生物学报. 2016(03)
[4]阿维菌素混剂防治蔬菜害虫的效果[J]. 沈兴明. 农技服务. 2014(03)
[5]多杀菌素、阿维菌素乳油和高效氯氰菊酯3种农药对环境生物的安全性评价[J]. 许迪,潘竟林,刘万强,姜福平,董俊霞,王会利. 生态毒理学报. 2013(06)
[6]不同加工剂型阿维菌素对南方根结线虫的防治效果[J]. 李素霞,张杰,张文娟,慕卫,刘峰. 植物保护学报. 2013(06)
[7]分阶段调控关键因素提高白僵菌固态发酵产孢量[J]. 李华祥,杨海泉,李江华,刘龙,华兆哲,堵国成,陈坚. 工业微生物. 2013 (01)
[8]阿维菌素微囊悬浮剂的制备及释放行为研究[J]. 李静,范腾飞,冯建国,吴学民. 现代农药. 2013(01)
[9]阿维菌素的研究进展[J]. 李卫平. 中国药业. 2012(19)
[10]几种药剂对土壤根结线虫的防效及对番茄根系生理性状的影响[J]. 卢树昌,刘慧芹,王小波,桂枝. 湖北农业科学. 2012(01)
硕士论文
[1]南方根结线虫对噻唑膦的抗药性分析及其抗性治理策略初探[D]. 吴青松.中国农业科学院 2016
[2]阿维菌素与两种熏蒸剂混用防治南方根结线虫应用技术研究[D]. 刘丹.湖南农业大学 2014
[3]阿维菌素生产环境运行技术研究[D]. 王强.齐鲁工业大学 2012
[4]生物农药阿维菌素的制剂研究[D]. 侯宏伟.上海师范大学 2012
[5]生防菌FO47菌剂的研制[D]. 田晓丽.西北农林科技大学 2010
[6]阿维链霉菌与刺糖多孢菌基因组重排筛选高效低毒杀虫剂产生菌的初探[D]. 鲍玉杰.浙江工业大学 2010
[7]阿维菌素发酵工艺的研究[D]. 陈万河.浙江工业大学 2008
[8]壳聚糖/木质素磺酸钠制备阿维菌素微胶囊及其性能研究[D]. 马丽杰.北京化工大学 2006
[9]阿维菌素高产菌株的选育和透明颤菌血红蛋白基因的克隆表达研究[D]. 李佳玮.沈阳药科大学 2006
[10]阿维菌素生产工艺的研究[D]. 彭柏林.沈阳药科大学 2001
本文编号：2941067
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：94 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
阿维菌素结构式Fig.1Thestructureofavermectins
图 2 阿维菌素的化学稳定性Fig.2 The chemical stability of avermectins根据国家农药毒性分级标准，阿维菌素类药物属高毒杀虫剂。原药大鼠急性经D50 为 10-27 mg/kg，呈中毒或低毒，对皮肤无刺激作用，对眼晴有轻微刺激作obert Land Krieger 2001)。在试验剂量内对动物无致畸、致癌、致突变作用。使法得当，在常用剂量范围内，对人、畜、天敌安全(李力等 2010)。3 阿维菌素用途阿维菌素是从土壤微生物阿维链霉菌代谢产物中分离得到的天然产物，是可持无公害生物防治产品，与 Bt 号称世界两大生物农药(喻子牛 1993)，对多种蔬棉花等作物的相关虫害防治有非常好的效果，是当今世界上最有前途的生物杀。1985 年阿维菌素作为农药投入市场，打开了在农药商品中的市场(陈金松等
c d图 30 阿维菌素标准品在不同流动相条件下高效液相分析图谱a)流动相 1，b)流动相 2，c)流动相 3，d)流动相 4Fig.30 The HPLC map of standard avermectins by different mobile phasea) mobile phase 1，b) mobile phase 2，c) mobile phase 3，d) mobile phase 4图 30-a 结果表明，以甲醇：乙腈：水=38:38:24 作为流动相，各组分分离效果最好，但是出峰时间较慢，且基线不稳定，操作效率不高；图 30-b、30-c、30-d 结果表明，以甲醇和水或甲醇和甲酸水作为流动相，各组分出峰时间均大幅度提前，峰型未受明显干扰，但如图 30-d 所示，有甲酸水的实验组基线不稳，需要不断调整，；再比较两种不同比例关系的甲醇与水流动相组合，如图 30-b 和图 30-c，出峰时间与峰型图均较好。综合考虑，为使试验方法简单、重复性强且成本较低，故确定甲醇：水=95:5 作为流动相组合，即图 30-c 所示。
【参考文献】：
期刊论文
[1]阿维菌素有机肥中阿维菌素含量的分析测试研究[J]. 曲鹏晶,史香. 化肥工业. 2017(04)
[2]阿维链霉菌BAC文库的构建及分析[J]. 刘家栋,王革娇,罗美中. 华中农业大学学报. 2016(05)
[3]从阿维菌素获得诺贝尔奖到中国创造[J]. 陈金松,刘梅,张立新. 微生物学报. 2016(03)
[4]阿维菌素混剂防治蔬菜害虫的效果[J]. 沈兴明. 农技服务. 2014(03)
[5]多杀菌素、阿维菌素乳油和高效氯氰菊酯3种农药对环境生物的安全性评价[J]. 许迪,潘竟林,刘万强,姜福平,董俊霞,王会利. 生态毒理学报. 2013(06)
[6]不同加工剂型阿维菌素对南方根结线虫的防治效果[J]. 李素霞,张杰,张文娟,慕卫,刘峰. 植物保护学报. 2013(06)
[7]分阶段调控关键因素提高白僵菌固态发酵产孢量[J]. 李华祥,杨海泉,李江华,刘龙,华兆哲,堵国成,陈坚. 工业微生物. 2013 (01)
[8]阿维菌素微囊悬浮剂的制备及释放行为研究[J]. 李静,范腾飞,冯建国,吴学民. 现代农药. 2013(01)
[9]阿维菌素的研究进展[J]. 李卫平. 中国药业. 2012(19)
[10]几种药剂对土壤根结线虫的防效及对番茄根系生理性状的影响[J]. 卢树昌,刘慧芹,王小波,桂枝. 湖北农业科学. 2012(01)
硕士论文
[1]南方根结线虫对噻唑膦的抗药性分析及其抗性治理策略初探[D]. 吴青松.中国农业科学院 2016
[2]阿维菌素与两种熏蒸剂混用防治南方根结线虫应用技术研究[D]. 刘丹.湖南农业大学 2014
[3]阿维菌素生产环境运行技术研究[D]. 王强.齐鲁工业大学 2012
[4]生物农药阿维菌素的制剂研究[D]. 侯宏伟.上海师范大学 2012
[5]生防菌FO47菌剂的研制[D]. 田晓丽.西北农林科技大学 2010
[6]阿维链霉菌与刺糖多孢菌基因组重排筛选高效低毒杀虫剂产生菌的初探[D]. 鲍玉杰.浙江工业大学 2010
[7]阿维菌素发酵工艺的研究[D]. 陈万河.浙江工业大学 2008
[8]壳聚糖/木质素磺酸钠制备阿维菌素微胶囊及其性能研究[D]. 马丽杰.北京化工大学 2006
[9]阿维菌素高产菌株的选育和透明颤菌血红蛋白基因的克隆表达研究[D]. 李佳玮.沈阳药科大学 2006
[10]阿维菌素生产工艺的研究[D]. 彭柏林.沈阳药科大学 2001
本文编号：2941067
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