蒜头果内生真菌发酵产神经酸油脂的研究
发布时间：2021-01-12 17:09
国家二级保护植物蒜头果是广西及云南特色林产资源,其蒜头果油中富含的神经酸为超长链单不饱和脂肪酸,具有多种生理药理活性,经济价值高,被广泛应用于食品、医药等领域。本文在建立5种混合脂肪酸的定性及定量分析基础之上,利用从蒜头果枝、叶及果实中分离的内生真菌对神经酸结晶母液进行了发酵产富含神经酸微生物油脂的研究。结果如下:1.神经酸结晶母液含有的脂肪酸主要有硬脂酸、油酸、花生酸、芥酸和神经酸。为了跟踪监测蒜头果内生真菌发酵神经酸结晶母液产微生物油脂中这5种脂肪酸的变化,建立了用气相色谱法同时定量测定这5种脂肪酸组分的分析方法。采用Rtx-Wax@柱（30 m×0.25 mm,0.25 μm）,升温程序为初始温度180℃,保留1 min,以5 ℃/min升至240℃,保留9 min。结果显示该法准确、可靠,可用于神经酸结晶母液发酵过程监控及后续工艺优化的测定。2.采用组织贴片和研磨涂布平板培养法对蒜头果健康的枝、叶、果肉、果壳及果仁内生真菌进行分离纯化。结果分离得到内生真菌58株。58株菌株的菌丝体经苏丹黑-B染色后镜检观察油脂粒着色情况初筛得到产油脂含量较高的菌株19株。初筛菌株经摇瓶液体培养...
【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１蒜头果果实结构??－
析时长、分离度方面考虑，得到以下结果，以初始温度１８０°Ｃ，保留１?ｍｉｎ，之后以５?°Ｃ／ｍｉｎ??升温至２４０?°Ｃ，保持９ｍｉｎ，此升温程序，混合物分离效果较好，分析时长２２ｍｉｎ，如??图２－１所示。??ｂ??８００００?－??６００００?－??ｃ??〇＞?４００００?－?ｅ??？？?ｃ?｜??２００００?－?ａ?丨?１?Ｉ??〇」ＵＵＬＪＬ??４?６?８?１０?１２?１４?１６?１８?２０?２２?２４??ｔ?／?（ｍｉｎ）??ａ．硬脂酸甲酯；ｂ．油酸甲酯；ｃ．花生酸甲酯；ｄ．芥酸甲酯；ｅ．神经酸甲酯??图２－１五组分标准样品混合气相色谱图??ａ．?ｍｅｔｈｙｌ?ｏｌｅａｔｅ；?ｂ．?ｍｅｔｈｙｌ?ｓｔｅａｒａｔｅ；?ｃ．?ｍｅｔｈｙｌ?ａｒａｃｈｉｄａｔｅ；?ｄ．?ｍｅｔｈｙｌ?ｅｒｕｃａｔｅ；?ｄ．?ｍｅｔｈｙｌ?ｎｅｒｖｏｎａｔｅ??Ｆｉｇｕｒｅ?２－１?ＧＣ?ｓｐｅｃｔｒａ?ｏｆ?ｆｉｖｅ?ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ??２．４．２气相色谱外标法测定??２．４．２．１线性关系??准确移取标准储备液０．１、０．５、１．０、２．０、３．０、５．０、７．０和９．０?ｍＬ于１０?ｍＬ容量瓶??中，以正己烷为溶剂，配制成系列不同浓度的标准溶液。标准溶液经０．４５?—微孔过滤??膜过滤后于ＧＣ进样分析，进样量１．０?ｐＬ。以色谱峰峰面积为纵坐标，其质量浓度（ｍｇ／ｍＬ）??为横坐标
ａ．神经酸结晶母液ｂ．发酵后微生物油脂??１．硬脂酸甲酯；２．油酸甲酯；３．花生酸甲酯；４．芥酸曱酯；５．神经酸甲酯??图２－２神经酸结晶母液发酵前后气相色谱图??ａ．?ｎｅｒｖｏｎｉｃ?ａｃｉｄ?ｃｒｙｓｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎ?ｍｏｔｈｅｒ?ｌｉｑｕｉｄ；?ｂ．?ａｆｔｅｒ?ｔｈｅ?ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｍｉｃｒｏｂｉａｌ?ｏｉｌｓ??１．?ｍｅｔｈｙｌ?ｏｌｅａｔｅ；?２．?ｍｅｔｈｙｌ?ｓｔｅａｒａｔｅ；?３．?ｍｅｔｈｙｌ?ａｒａｃｈｉｄａｔｅ；?４．?ｍｅｔｈｙｌ?ｅｒｕｃａｔｅ；?５．?ｍｅｔｈｙｌ?ｎｅｒｖｏｎａｔｅ??Ｆｉｇｕｒｅ?２－２?Ｎｅｒｖｏｎｉｃ?ａｃｉｄ?ｃｒｙｓｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎ?ｍｏｔｈｅｒ?ｌｉｑｕｉｄ?ｂｅｆｏｒｅ?ａｎｄ?ａｆｔｅｒ?ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＧＣ??如图２－２所示，神经酸结晶母液经菌株ＳＴＧＲ－６发酵后，计算其菌体中各脂肪酸含??量可得油酸明显减少，其原因在于油酸作为营养物质在菌体生长过程中被消耗。神经酸??含量在油脂中的比例有所增加，而硬脂酸和花生酸在经过发酵后含量过低，故后期不在??考察干菌体中硬脂酸和花生酸的含量。??２．５本章小结??本章根据神经酸结晶母液微生物发酵体系的分析检测要求，建立了气相色谱的脂肪??酸分析方法，得出结果如下：??研究了气相色谱法对神经酸结晶母液生物发酵体系中的硬脂酸甲酯、油酸甲酯、花??生酸甲酯、芥酸甲酯和神经酸甲酯的同时测定。确定的色谱条件为：色谱柱：Ｒｔｘ－Ｗａｘ＠??柱（３０ｍｘ〇．２５ｍｍ
【参考文献】：
期刊论文
[1]中国富含神经酸的元宝枫籽油应用研究现状及前景[J]. 王性炎,谢胜菊,王高红. 中国油脂. 2018(12)
[2]蒜头果中植物内生真菌烟曲霉的抗菌活性研究[J]. 李娟,陈中华,华梅,原晓龙,虞泓,王毅. 西部林业科学. 2018(04)
[3]植物内生菌研究进展[J]. 方珍娟,张晓霞,马立安. 长江大学学报(自科版). 2018(10)
[4]蒜头果内生真菌次生代谢产物抑制人类致病菌活性的研究[J]. 肖支叶,华梅,原晓龙,邱坚,郑科,王毅. 广西植物. 2018(07)
[5]神经酸对帕金森病模型小鼠运动障碍的缓解作用及机制研究[J]. 郑辉,孙作乾,王志亮,魏正风,冯炎,张兴柱,王付苍,史永强,高肇林. 中国药房. 2017(19)
[6]神经酸研究现状及前景[J]. 赵立言,于炎冰,张黎. 中华神经外科疾病研究杂志. 2017(03)
[7]蒜头果的内生真菌多样性分析[J]. 王毅,王娟,王四海,李云琴,原晓龙,陈中华. 基因组学与应用生物学. 2018(09)
[8]响应面实验优化蒜头果油中神经酸甘油酯皂化工艺[J]. 周琴芬,李杰,谈满良,栾连军. 中国油脂. 2016(08)
[9]党参内生菌转化人参根总皂苷为稀有人参皂苷F2和C-K的研究[J]. 崔磊,金英今,尹成日. 延边大学学报(自然科学版). 2015(01)
[10]马尾松（Pinus massoniana）内生真菌的产油脂效果[J]. 邓慧华,洪滔,吴承祯,谢安强,林晗,洪伟. 应用与环境生物学报. 2014(03)
博士论文
[1]蒜头果有效成分及其生物活性研究[D]. 唐婷范.广西大学 2013
[2]珍稀植物蒜头果保护生物学研究[D]. 赖家业.四川大学 2006
硕士论文
[1]产油脂丝状真菌的筛选及其产油脂条件的优化[D]. 李元森.山东轻工业学院 2009
本文编号：2973190
【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１蒜头果果实结构??－
析时长、分离度方面考虑，得到以下结果，以初始温度１８０°Ｃ，保留１?ｍｉｎ，之后以５?°Ｃ／ｍｉｎ??升温至２４０?°Ｃ，保持９ｍｉｎ，此升温程序，混合物分离效果较好，分析时长２２ｍｉｎ，如??图２－１所示。??ｂ??８００００?－??６００００?－??ｃ??〇＞?４００００?－?ｅ??？？?ｃ?｜??２００００?－?ａ?丨?１?Ｉ??〇」ＵＵＬＪＬ??４?６?８?１０?１２?１４?１６?１８?２０?２２?２４??ｔ?／?（ｍｉｎ）??ａ．硬脂酸甲酯；ｂ．油酸甲酯；ｃ．花生酸甲酯；ｄ．芥酸甲酯；ｅ．神经酸甲酯??图２－１五组分标准样品混合气相色谱图??ａ．?ｍｅｔｈｙｌ?ｏｌｅａｔｅ；?ｂ．?ｍｅｔｈｙｌ?ｓｔｅａｒａｔｅ；?ｃ．?ｍｅｔｈｙｌ?ａｒａｃｈｉｄａｔｅ；?ｄ．?ｍｅｔｈｙｌ?ｅｒｕｃａｔｅ；?ｄ．?ｍｅｔｈｙｌ?ｎｅｒｖｏｎａｔｅ??Ｆｉｇｕｒｅ?２－１?ＧＣ?ｓｐｅｃｔｒａ?ｏｆ?ｆｉｖｅ?ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ??２．４．２气相色谱外标法测定??２．４．２．１线性关系??准确移取标准储备液０．１、０．５、１．０、２．０、３．０、５．０、７．０和９．０?ｍＬ于１０?ｍＬ容量瓶??中，以正己烷为溶剂，配制成系列不同浓度的标准溶液。标准溶液经０．４５?—微孔过滤??膜过滤后于ＧＣ进样分析，进样量１．０?ｐＬ。以色谱峰峰面积为纵坐标，其质量浓度（ｍｇ／ｍＬ）??为横坐标
ａ．神经酸结晶母液ｂ．发酵后微生物油脂??１．硬脂酸甲酯；２．油酸甲酯；３．花生酸甲酯；４．芥酸曱酯；５．神经酸甲酯??图２－２神经酸结晶母液发酵前后气相色谱图??ａ．?ｎｅｒｖｏｎｉｃ?ａｃｉｄ?ｃｒｙｓｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎ?ｍｏｔｈｅｒ?ｌｉｑｕｉｄ；?ｂ．?ａｆｔｅｒ?ｔｈｅ?ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｍｉｃｒｏｂｉａｌ?ｏｉｌｓ??１．?ｍｅｔｈｙｌ?ｏｌｅａｔｅ；?２．?ｍｅｔｈｙｌ?ｓｔｅａｒａｔｅ；?３．?ｍｅｔｈｙｌ?ａｒａｃｈｉｄａｔｅ；?４．?ｍｅｔｈｙｌ?ｅｒｕｃａｔｅ；?５．?ｍｅｔｈｙｌ?ｎｅｒｖｏｎａｔｅ??Ｆｉｇｕｒｅ?２－２?Ｎｅｒｖｏｎｉｃ?ａｃｉｄ?ｃｒｙｓｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎ?ｍｏｔｈｅｒ?ｌｉｑｕｉｄ?ｂｅｆｏｒｅ?ａｎｄ?ａｆｔｅｒ?ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＧＣ??如图２－２所示，神经酸结晶母液经菌株ＳＴＧＲ－６发酵后，计算其菌体中各脂肪酸含??量可得油酸明显减少，其原因在于油酸作为营养物质在菌体生长过程中被消耗。神经酸??含量在油脂中的比例有所增加，而硬脂酸和花生酸在经过发酵后含量过低，故后期不在??考察干菌体中硬脂酸和花生酸的含量。??２．５本章小结??本章根据神经酸结晶母液微生物发酵体系的分析检测要求，建立了气相色谱的脂肪??酸分析方法，得出结果如下：??研究了气相色谱法对神经酸结晶母液生物发酵体系中的硬脂酸甲酯、油酸甲酯、花??生酸甲酯、芥酸甲酯和神经酸甲酯的同时测定。确定的色谱条件为：色谱柱：Ｒｔｘ－Ｗａｘ＠??柱（３０ｍｘ〇．２５ｍｍ
【参考文献】：
期刊论文
[1]中国富含神经酸的元宝枫籽油应用研究现状及前景[J]. 王性炎,谢胜菊,王高红. 中国油脂. 2018(12)
[2]蒜头果中植物内生真菌烟曲霉的抗菌活性研究[J]. 李娟,陈中华,华梅,原晓龙,虞泓,王毅. 西部林业科学. 2018(04)
[3]植物内生菌研究进展[J]. 方珍娟,张晓霞,马立安. 长江大学学报(自科版). 2018(10)
[4]蒜头果内生真菌次生代谢产物抑制人类致病菌活性的研究[J]. 肖支叶,华梅,原晓龙,邱坚,郑科,王毅. 广西植物. 2018(07)
[5]神经酸对帕金森病模型小鼠运动障碍的缓解作用及机制研究[J]. 郑辉,孙作乾,王志亮,魏正风,冯炎,张兴柱,王付苍,史永强,高肇林. 中国药房. 2017(19)
[6]神经酸研究现状及前景[J]. 赵立言,于炎冰,张黎. 中华神经外科疾病研究杂志. 2017(03)
[7]蒜头果的内生真菌多样性分析[J]. 王毅,王娟,王四海,李云琴,原晓龙,陈中华. 基因组学与应用生物学. 2018(09)
[8]响应面实验优化蒜头果油中神经酸甘油酯皂化工艺[J]. 周琴芬,李杰,谈满良,栾连军. 中国油脂. 2016(08)
[9]党参内生菌转化人参根总皂苷为稀有人参皂苷F2和C-K的研究[J]. 崔磊,金英今,尹成日. 延边大学学报(自然科学版). 2015(01)
[10]马尾松（Pinus massoniana）内生真菌的产油脂效果[J]. 邓慧华,洪滔,吴承祯,谢安强,林晗,洪伟. 应用与环境生物学报. 2014(03)
博士论文
[1]蒜头果有效成分及其生物活性研究[D]. 唐婷范.广西大学 2013
[2]珍稀植物蒜头果保护生物学研究[D]. 赖家业.四川大学 2006
硕士论文
[1]产油脂丝状真菌的筛选及其产油脂条件的优化[D]. 李元森.山东轻工业学院 2009
本文编号：2973190
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