西兰花中萝卜硫苷的提取和纯化研究
发布时间：2021-01-23 17:46
硫代葡萄糖苷（Glucosinolates）,简称硫苷,其降解产物种类多样,具备各种生物活性,目前广受关注的是抗癌、提高免疫力的活性。萝卜硫苷（Glucoraphanin）属于硫代葡萄糖苷的其中一类,其主要降解产物萝卜硫素（Sulforaphane）是目前蔬菜中抗癌功效最强的物质。但萝卜硫素不稳定,易挥发,通常采用萝卜硫苷形式制备其产品。从西兰花中提取萝卜硫苷时,其内源黑芥子酶会降解硫苷,因此,需要研究西兰花中萝卜硫苷提取时的灭酶、提取、纯化工艺技术。本文主要以西兰花为原材料,探究其种子中萝卜硫苷的最佳提取工艺,新鲜西兰花的各种灭酶提取萝卜硫苷工艺,以及西兰花粗提液中萝卜硫苷的纯化方法。最终得到以下结论:1、乙醇提取西兰花种子中萝卜硫苷的最佳工艺条件为:乙醇浓度为70%、料液比为1:5、提取温度为70℃、提取时间为20min,提取次数为2次,最终得到每克西兰花种子中萝卜硫苷提取得率为5.41 mg。2、比较Sevag法、单宁酸法、饱和氯化钠法、硅胶法、壳聚糖法对去除新鲜西兰花的萝卜硫苷粗提液中蛋白质的影响,及对萝卜硫苷提取得率的影响,最后综合选择Sevag法。3、通过温度处理、蒸汽处理...
【文章来源】：浙江工商大学浙江省
【文章页数】：86 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２硫代葡萄糖苷基本种类分类图ｌｎ］??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｈｅ?ｂａｓｉｃ?ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｍａｐ?ｏｆ?ｇｌｕｃｏｓｉｎｏｌａｔｅｓ［１１］??
?（例如：异硫氰酸酯、腈、环腈、硫氰酸酯、恶唑烷硫酮等［ＩＧ，１７，１８］），而所形成??不同的化合物的种类则取决于ｐＨ、金属离子和其他蛋白成分（图１－３所示）。??最常见的，当ｐＨ为６？７时，酶水解形成的中间化合物通过Ｈｏｆｆｍａｎｎ重排??（或Ｌｏｓｓｅｎ重排），会形成稳定且具有抗癌活性的异硫氰酸醋［１９］（Ｉｓｏｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ，??ＩＴＣ）。硫氰酸醋（Ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）形成有各种理论，如Ｇｍｅｌｉｎ［２ａ＾认为可能有一??种酶重排了硫苷的结构式，这种异构酶是作用于硫苷生成硫氰酸酯的一个因素。??如果异硫氰酸酯含有双键，在表皮特异硫蛋白（ＥＳＰ蛋白）的存在条件下，异硫??氰酸酯可以重新产生环腈类（Ｅｐｉｔｈｉｏｎｉｔｒｉｌｅ）。在较低的ｐＨ值下，不稳定的中间??体可以直接转化为腈（Ｎｉｔｒｉｌｅ），损失硫。其中转化为腈的含量在亚铁离子也存??在的条件下得到了提高。此外
等人也通过使用ＳＰＥ前处理分离萝卜硫苷降解产物萝卜硫素，取得较好的成效。??１．３．２硫苷分析检测方法的研究现状??如图１－４所示，即为硫苷的分析检测方法。早期对于硫苷的检测分析方法主??要是通过较为简便的方法释放硫苷中的葡萄糖残基使用试纸分析，纸层析色??谱法和薄层色谱法进行检测分析。此外，还有通过硫酸根法、硫氰酸酯法等测定??硫苷降解产物的方法间接得到硫苷含量。但此类方法通常无法得到准确的含量值，??且很多时候需特别注意操作过程。因此随着科学技术的进步，这些方法已被高效??液相色谱法（ＨＰＬＣ）?［１Ｑ，４９，５Ｑ］、气相色谱法（ＧＣ）、质谱法（ＭＳ）等方法取代，??这些方法可得到更为准确、可靠和可重复的结果。??单独的高效液相色谱法不能使硫苷达到完全的色谱分离，而质谱却可根据各??类硫苷的不同特征性质谱信息完成定性定量分析，因此液相色谱一质谱联用技术??（ＬＣ－ＭＳ）?［５１］已成为深入细致研宄复杂植物样品中硫苷的有力手段
【参考文献】：
期刊论文
[1]羽衣甘蓝和白菜型油菜硫代葡萄糖苷超高效液相色谱—飞行时间质谱分析方法[J]. 郑姝宁,张延国,郭宁,刘志远,徐东辉. 园艺学报. 2016(12)
[2]硫代葡萄糖苷提取、纯化、分离方法概述[J]. 林丽君,聂黎行,李耀磊,戴忠,马双成. 中国药事. 2015(10)
[3]石榴皮多糖的三氯乙酸法脱蛋白工艺研究[J]. 赵师师,高旭红,常君,刘松林,张萍. 广州化工. 2015(17)
[4]金花散茶饮料加工工艺研究[J]. 胡治远,赵运林,刘石泉,彭雨轩,张梅清. 湖南城市学院学报(自然科学版). 2014(04)
[5]青花菜中硫代葡萄糖苷的提取工艺[J]. 邓艳美,王红妹,万从庆. 江苏农业科学. 2013(06)
[6]西兰花籽中萝卜硫苷的提取、分离及结构鉴定[J]. 江敏,石林娟,杨毅. 食品科学. 2013(05)
[7]浒苔多糖脱蛋白脱盐方法的优选[J]. 陈达妙,林文庭. 中国食物与营养. 2012(04)
[8]Content determination of benzyl glucosinolate and anti—cancer activity of its hydrolysis product in Carica papaya L.[J]. Ze-You Li,Yong Wang,Wen-Tao Shen,Peng Zhou. Asian Pacific Journal of Tropical Medicine. 2012(03)
[9]硫代葡萄糖苷的降解途径及其产物的研究进展[J]. 杨瑛洁,李淑燕,胡国伟,廖小军,胡小松,张燕. 西北植物学报. 2011(07)
[10]油菜籽粕中硫甙的提取工艺研究[J]. 卜路霞,朱华玲,李建颖,石军,尉震. 粮食与饲料工业. 2011(03)
硕士论文
[1]西兰花干硫苷的提取工艺优化及富集纯化研究[D]. 李宁.浙江工商大学 2015
[2]西兰花中萝卜硫苷的提取及降解产物抑菌活性研究[D]. 叶珊珊.浙江工商大学 2013
[3]芝麻菜种子中硫代葡萄糖苷（Glucoerucin）的分离纯化工艺研究[D]. 吴建朋.北京化工大学 2013
[4]海南芥子中硫苷及其酶解产物的提取分离与鉴定[D]. 赵振东.海南大学 2013
[5]萝卜籽中硫代葡萄糖苷的提取纯化及其降解产物的抑菌特性研究[D]. 周政子.浙江工商大学 2013
[6]萝卜硫苷的分离纯化工艺研究[D]. 江敏.合肥工业大学 2012
[7]十字花科植物种子黑芥子酶酶学性质研究[D]. 朱磊.北京化工大学 2011
[8]西兰花提取物防癌抗癌及增强免疫力研究[D]. 管佳.浙江工商大学 2009
[9]菜籽粕脱毒液中硫代葡萄糖苷提取工艺研究[D]. 周铭.重庆大学 2008
[10]芥菜中硫代葡萄糖苷提取纯化及稳定性的研究[D]. 郭逍遥.南昌大学 2007
本文编号：2995642
【文章来源】：浙江工商大学浙江省
【文章页数】：86 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２硫代葡萄糖苷基本种类分类图ｌｎ］??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｈｅ?ｂａｓｉｃ?ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｍａｐ?ｏｆ?ｇｌｕｃｏｓｉｎｏｌａｔｅｓ［１１］??
?（例如：异硫氰酸酯、腈、环腈、硫氰酸酯、恶唑烷硫酮等［ＩＧ，１７，１８］），而所形成??不同的化合物的种类则取决于ｐＨ、金属离子和其他蛋白成分（图１－３所示）。??最常见的，当ｐＨ为６？７时，酶水解形成的中间化合物通过Ｈｏｆｆｍａｎｎ重排??（或Ｌｏｓｓｅｎ重排），会形成稳定且具有抗癌活性的异硫氰酸醋［１９］（Ｉｓｏｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ，??ＩＴＣ）。硫氰酸醋（Ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ）形成有各种理论，如Ｇｍｅｌｉｎ［２ａ＾认为可能有一??种酶重排了硫苷的结构式，这种异构酶是作用于硫苷生成硫氰酸酯的一个因素。??如果异硫氰酸酯含有双键，在表皮特异硫蛋白（ＥＳＰ蛋白）的存在条件下，异硫??氰酸酯可以重新产生环腈类（Ｅｐｉｔｈｉｏｎｉｔｒｉｌｅ）。在较低的ｐＨ值下，不稳定的中间??体可以直接转化为腈（Ｎｉｔｒｉｌｅ），损失硫。其中转化为腈的含量在亚铁离子也存??在的条件下得到了提高。此外
等人也通过使用ＳＰＥ前处理分离萝卜硫苷降解产物萝卜硫素，取得较好的成效。??１．３．２硫苷分析检测方法的研究现状??如图１－４所示，即为硫苷的分析检测方法。早期对于硫苷的检测分析方法主??要是通过较为简便的方法释放硫苷中的葡萄糖残基使用试纸分析，纸层析色??谱法和薄层色谱法进行检测分析。此外，还有通过硫酸根法、硫氰酸酯法等测定??硫苷降解产物的方法间接得到硫苷含量。但此类方法通常无法得到准确的含量值，??且很多时候需特别注意操作过程。因此随着科学技术的进步，这些方法已被高效??液相色谱法（ＨＰＬＣ）?［１Ｑ，４９，５Ｑ］、气相色谱法（ＧＣ）、质谱法（ＭＳ）等方法取代，??这些方法可得到更为准确、可靠和可重复的结果。??单独的高效液相色谱法不能使硫苷达到完全的色谱分离，而质谱却可根据各??类硫苷的不同特征性质谱信息完成定性定量分析，因此液相色谱一质谱联用技术??（ＬＣ－ＭＳ）?［５１］已成为深入细致研宄复杂植物样品中硫苷的有力手段
【参考文献】：
期刊论文
[1]羽衣甘蓝和白菜型油菜硫代葡萄糖苷超高效液相色谱—飞行时间质谱分析方法[J]. 郑姝宁,张延国,郭宁,刘志远,徐东辉. 园艺学报. 2016(12)
[2]硫代葡萄糖苷提取、纯化、分离方法概述[J]. 林丽君,聂黎行,李耀磊,戴忠,马双成. 中国药事. 2015(10)
[3]石榴皮多糖的三氯乙酸法脱蛋白工艺研究[J]. 赵师师,高旭红,常君,刘松林,张萍. 广州化工. 2015(17)
[4]金花散茶饮料加工工艺研究[J]. 胡治远,赵运林,刘石泉,彭雨轩,张梅清. 湖南城市学院学报(自然科学版). 2014(04)
[5]青花菜中硫代葡萄糖苷的提取工艺[J]. 邓艳美,王红妹,万从庆. 江苏农业科学. 2013(06)
[6]西兰花籽中萝卜硫苷的提取、分离及结构鉴定[J]. 江敏,石林娟,杨毅. 食品科学. 2013(05)
[7]浒苔多糖脱蛋白脱盐方法的优选[J]. 陈达妙,林文庭. 中国食物与营养. 2012(04)
[8]Content determination of benzyl glucosinolate and anti—cancer activity of its hydrolysis product in Carica papaya L.[J]. Ze-You Li,Yong Wang,Wen-Tao Shen,Peng Zhou. Asian Pacific Journal of Tropical Medicine. 2012(03)
[9]硫代葡萄糖苷的降解途径及其产物的研究进展[J]. 杨瑛洁,李淑燕,胡国伟,廖小军,胡小松,张燕. 西北植物学报. 2011(07)
[10]油菜籽粕中硫甙的提取工艺研究[J]. 卜路霞,朱华玲,李建颖,石军,尉震. 粮食与饲料工业. 2011(03)
硕士论文
[1]西兰花干硫苷的提取工艺优化及富集纯化研究[D]. 李宁.浙江工商大学 2015
[2]西兰花中萝卜硫苷的提取及降解产物抑菌活性研究[D]. 叶珊珊.浙江工商大学 2013
[3]芝麻菜种子中硫代葡萄糖苷（Glucoerucin）的分离纯化工艺研究[D]. 吴建朋.北京化工大学 2013
[4]海南芥子中硫苷及其酶解产物的提取分离与鉴定[D]. 赵振东.海南大学 2013
[5]萝卜籽中硫代葡萄糖苷的提取纯化及其降解产物的抑菌特性研究[D]. 周政子.浙江工商大学 2013
[6]萝卜硫苷的分离纯化工艺研究[D]. 江敏.合肥工业大学 2012
[7]十字花科植物种子黑芥子酶酶学性质研究[D]. 朱磊.北京化工大学 2011
[8]西兰花提取物防癌抗癌及增强免疫力研究[D]. 管佳.浙江工商大学 2009
[9]菜籽粕脱毒液中硫代葡萄糖苷提取工艺研究[D]. 周铭.重庆大学 2008
[10]芥菜中硫代葡萄糖苷提取纯化及稳定性的研究[D]. 郭逍遥.南昌大学 2007
本文编号：2995642
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