竹叶兰内生菌的分离鉴定及生物活性研究
发布时间：2021-02-17 18:52
竹叶兰（Arundina graminifolia（D.Don）Hochr.）是兰科竹叶兰属植物,在傣族等少数民族中作为解毒中草药被广泛应用,为国家Ⅱ级保护植物。内生菌作为一类特殊的微生物资源,广泛分布于植物中,经过与宿主植物的长期协同进化,不仅能够产生与宿主植物相同或相似的药理活性物质,还能够产生新颖的代谢产物。鉴于此特点,本文以富含茋类化合物的竹叶兰为对象,首次对其内生菌进行分离纯化,并对部分内生真菌的生物活性进行了初步研究,获得以下研究结果:1.从来源于云南西双版纳（批号:20160331）的新鲜竹叶兰中分离得到5株内生真菌。从来源于广西南宁（批号:20170311）的新鲜竹叶兰中分离得到33株内生菌（真菌14株,细菌11株,放线菌8株）,构建了竹叶兰内生菌资源库。竹叶兰内生菌的形态学观察和分子生物学鉴定结果表明,19株内生真菌分属于11个种属,其中刺盘孢属和镰孢菌属为竹叶兰内生真菌优势菌群,链霉菌属为竹叶兰内生放线菌优势菌群。2.对内生真菌TJ-1、TJ-2、TJ-3发酵产物的抗氧化能力进行测试。发现TJ-1菌液和TJ-2菌液对铁离子有较强的还原能力,TJ-3菌液对羟基自由基有...
【文章来源】：华南理工大学广东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
竹叶兰内生真菌的菌落形态和个体形态（1000x）（批号：20160331）
15（c）内生放线菌（8 株）图 2.2 竹叶兰内生菌的菌落形态和个体形态（1000x）（批号：20170311）Fig 2.2 The colony morphology and micromorphology（1000x）of endophytes isolated from Arundinagraminifolia（No.20170311）为了保证分离得到的是内生菌，本试验采用的消毒条件及表面消毒效果的评价标准较严格，对照平板上无菌落生长，所以分离到的内生菌较少，且多是一些较易生长的内生菌。未从批号为 20160331 的新鲜竹叶兰根部分离纯化出内生真菌，可能是由于根部与土壤接触较多，内生菌种类丰富，同时实验操作不严谨，导致在本次分离纯化实验过程中，菌株相互交叉感染，从而未能获得。通过对两批号不同来源的竹叶兰进行内生菌分离，发现植物内生菌的种类繁多，资源较为丰富，未来可以从内生菌的次级代谢产物中，
华南理工大学硕士学位论文叶兰内生菌活性菌株 TJ-3 的系统发育分析过第 3、4、5 章节对部分内生菌的生物活性进行测定，筛选出优势菌株序，将其序列在 NCBI Blast 数据库中，进行同源性比对，结合 ITS 序列比树归属，对其进行分子生物学鉴定，结果表明其序列与层出镰刀菌（Fatum）同源性≥99%，因此，鉴定其为层出镰刀菌。其系统发育树见图育树可进一步确认 TJ-3 的鉴定结果的准确性。
【参考文献】：
期刊论文
[1]竹叶兰提取物抗氧化与抗菌活性研究[J]. 闫雪孟,汤冰雪,刘美凤. 时珍国医国药. 2017(12)
[2]野生稻内生固氮菌多样性研究进展[J]. 刘丽辉,蒋慧敏,王佩旋,唐小钰,彭桂香,谭志远. 生物技术进展. 2017(06)
[3]竹叶兰内生真菌的分离鉴定及其抗氧化活性研究[J]. 宋新月,汤冰雪,邱君志,刘美凤. 现代食品科技. 2018(02)
[4]地衣内生真菌Pestalotiopsis sp.次生代谢产物[J]. 元超,李刚,王海英,赵俊凌,郭玉华,丁刚. 菌物学报. 2018(02)
[5]傣药百样解的化学成分及药理作用研究进展[J]. 刘青青,戴荣继,吕芳,林凡凯. 中国现代应用药学. 2017(04)
[6]平贝母内生菌抑菌活性菌株筛选和鉴定[J]. 赵帅,王永宏,田义新,盛吉明,田新新. 时珍国医国药. 2016(07)
[7]苦参杀虫活性菌株的筛选[J]. 李晓璐. 广东化工. 2016(12)
[8]人参内生拮抗细菌分离、鉴定及其对人参菌核病抑菌作用研究[J]. 卢占慧,周如军,袁月,李自博,傅俊范. 中国植保导刊. 2016(03)
[9]一株高抗氧化活性内生真菌的分子鉴定及产酚酸类物质研究[J]. 高媛,雷旗,蒋维,孔玉珊,薛艳红,刘士平. 微生物学通报. 2016(06)
[10]傣药竹叶兰中1个新苯丙素及其抗烟草花叶病毒活性[J]. 董伟,周堃,王月德,吉炳琨,周敏,高雪梅,胡秋芬,叶艳青. 中草药. 2015(20)
硕士论文
[1]石杉属植物内生菌的多样性及其次生代谢产物的乙酰胆碱酯酶抑制活性研究[D]. 徐海杰.华中农业大学 2013
[2]醉马草内生菌杀虫活性及其多样性研究[D]. 张雪兵.新疆农业大学 2010
[3]抗菌活性植物内生菌的分离、筛选及发酵条件优化[D]. 邓雪萍.华南理工大学 2010
[4]泽漆内生菌的分离鉴定及抗病毒活性筛选[D]. 李文华.西北农林科技大学 2009
本文编号：3038380
【文章来源】：华南理工大学广东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
竹叶兰内生真菌的菌落形态和个体形态（1000x）（批号：20160331）
15（c）内生放线菌（8 株）图 2.2 竹叶兰内生菌的菌落形态和个体形态（1000x）（批号：20170311）Fig 2.2 The colony morphology and micromorphology（1000x）of endophytes isolated from Arundinagraminifolia（No.20170311）为了保证分离得到的是内生菌，本试验采用的消毒条件及表面消毒效果的评价标准较严格，对照平板上无菌落生长，所以分离到的内生菌较少，且多是一些较易生长的内生菌。未从批号为 20160331 的新鲜竹叶兰根部分离纯化出内生真菌，可能是由于根部与土壤接触较多，内生菌种类丰富，同时实验操作不严谨，导致在本次分离纯化实验过程中，菌株相互交叉感染，从而未能获得。通过对两批号不同来源的竹叶兰进行内生菌分离，发现植物内生菌的种类繁多，资源较为丰富，未来可以从内生菌的次级代谢产物中，
华南理工大学硕士学位论文叶兰内生菌活性菌株 TJ-3 的系统发育分析过第 3、4、5 章节对部分内生菌的生物活性进行测定，筛选出优势菌株序，将其序列在 NCBI Blast 数据库中，进行同源性比对，结合 ITS 序列比树归属，对其进行分子生物学鉴定，结果表明其序列与层出镰刀菌（Fatum）同源性≥99%，因此，鉴定其为层出镰刀菌。其系统发育树见图育树可进一步确认 TJ-3 的鉴定结果的准确性。
【参考文献】：
期刊论文
[1]竹叶兰提取物抗氧化与抗菌活性研究[J]. 闫雪孟,汤冰雪,刘美凤. 时珍国医国药. 2017(12)
[2]野生稻内生固氮菌多样性研究进展[J]. 刘丽辉,蒋慧敏,王佩旋,唐小钰,彭桂香,谭志远. 生物技术进展. 2017(06)
[3]竹叶兰内生真菌的分离鉴定及其抗氧化活性研究[J]. 宋新月,汤冰雪,邱君志,刘美凤. 现代食品科技. 2018(02)
[4]地衣内生真菌Pestalotiopsis sp.次生代谢产物[J]. 元超,李刚,王海英,赵俊凌,郭玉华,丁刚. 菌物学报. 2018(02)
[5]傣药百样解的化学成分及药理作用研究进展[J]. 刘青青,戴荣继,吕芳,林凡凯. 中国现代应用药学. 2017(04)
[6]平贝母内生菌抑菌活性菌株筛选和鉴定[J]. 赵帅,王永宏,田义新,盛吉明,田新新. 时珍国医国药. 2016(07)
[7]苦参杀虫活性菌株的筛选[J]. 李晓璐. 广东化工. 2016(12)
[8]人参内生拮抗细菌分离、鉴定及其对人参菌核病抑菌作用研究[J]. 卢占慧,周如军,袁月,李自博,傅俊范. 中国植保导刊. 2016(03)
[9]一株高抗氧化活性内生真菌的分子鉴定及产酚酸类物质研究[J]. 高媛,雷旗,蒋维,孔玉珊,薛艳红,刘士平. 微生物学通报. 2016(06)
[10]傣药竹叶兰中1个新苯丙素及其抗烟草花叶病毒活性[J]. 董伟,周堃,王月德,吉炳琨,周敏,高雪梅,胡秋芬,叶艳青. 中草药. 2015(20)
硕士论文
[1]石杉属植物内生菌的多样性及其次生代谢产物的乙酰胆碱酯酶抑制活性研究[D]. 徐海杰.华中农业大学 2013
[2]醉马草内生菌杀虫活性及其多样性研究[D]. 张雪兵.新疆农业大学 2010
[3]抗菌活性植物内生菌的分离、筛选及发酵条件优化[D]. 邓雪萍.华南理工大学 2010
[4]泽漆内生菌的分离鉴定及抗病毒活性筛选[D]. 李文华.西北农林科技大学 2009
本文编号：3038380
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