纳豆芽孢杆菌发酵产纳豆激酶条件优化及酶品质分析

发布时间：2021-03-16 00:09

　　纳豆激酶（nattokinase,NK）是纳豆芽孢杆菌发酵产生的一种具有溶解血栓功能的丝氨酸蛋白酶,具有活性高、安全性高、口服方便等优点,存在巨大的应用潜力。然而,目前纳豆激酶的发酵单位普遍不高且特性的纤溶酶纯度亦不清晰;此外纳豆芽孢杆菌的发酵副产物——具有凝血作用的维生素K2（MK-7）,对细胞生长的作用也没有得到明确的解析,这些成为了限制高效制备高品质纳豆激酶的关键问题。以研究并解决上述关键问题为目的,本文从发酵食品中筛选得到一株具有纤溶酶活力的菌株,鉴定并命名为为纳豆芽孢杆菌TN-02。通过对该菌株进行发酵工艺优化,最终在10 L发酵罐中,采用分批补料工艺获得纳豆激酶的最高表达量为13978.3 U/mL;利用基因敲除技术分别对纳豆芽孢杆菌TN-02中的纳豆激酶基因aprN和维生素K2（MK-7）合成途径中men A基因进行了插入失活,证明了纳豆激酶是纳豆芽孢杆菌TN-02发酵产物中唯一纤溶酶,MK-7是纳豆芽孢杆菌TN-02生长代谢必需生长因子。主要研究结果如下:（1）从发酵食品中筛选到一株纤溶酶生产菌,通过对其形态特征观察、生理生化实验和16S rDNA鉴定,确定其为枯草芽孢... 

【文章来源】：安徽工程大学安徽省

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１纳豆激酶的３Ｄ结构模型??Ｆｉ．?１－１?Ｔｈｒｅｅ－ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ?ｍｏｄｅｌ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ｎａｔｔｏｋｉｉｉａｓｅ??

图１－３维生素Ｋ２代谢途径??Ｆｉｇ．?１－３?Ｔｈｅ?ｍｅｔａｂｏｌｉｃ?ｐａｔｈｗａｙ?ｏｆ?ｖｉｔａｍｉｎ?Ｋ２??

图２－２不同菌种对酪蛋白的水解能力??Ｆｉ．２－２?Ｈｄｒｏｌｓｉｓ?ａｂｉｌｉｔｏｆ?ｃａｓｅｉｎ?ｂｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｓｔｒａｉｎｓ??


本文编号：3085059