尿素调节蝉拟青霉合成胞外皂苷机制及其抗氧化活性研究

发布时间：2021-04-07 02:43

　　蝉花是一种传统的药食两用真菌,而蝉拟青霉（Paecilomyces cicadae）是蝉花的无性阶段,含有多种氨基酸、无机盐、多糖、皂苷、虫草素等多种营养成分和生药学成分。针对天然蝉花资源匮乏,人工栽培蝉花困难等蝉花资源利用的瓶颈以及对蝉花活性成分研究甚少问题,本论文利用液态深层发酵技术开发利用蝉拟青霉菌丝体资源以期满足市场的蝉花需求同时对蝉花皂苷活性成分进行研究。主要研究内容包括:尿素协同培养基成分以及培养条件共同促进蝉拟青霉胞外皂苷的合成;利用转录组学研究尿素调节蝉拟青霉胞外皂苷合成的机制以及尿素对蝉拟青霉胞外皂苷抗氧化活性的影响,得到以下研究成果:（1）通过碳氮源、无机盐、营养因子的单因素分析及它们协同尿素增强皂苷合成的响应面设计试验,得到高产蝉拟青霉胞外皂苷的最佳培养基组分,即麸皮3.7%、木糖4.43%、果糖4.73%、甘油1.14%、尿素0.13%、鱼粉蛋白胨0.85%、KH₂PO₄ 0.16%、ZnSO₄ 0.16%、VB₂ 0.0136%、VC 0.0145%。（2）尿素协同培养条件... 

【文章来源】：江苏大学江苏省

【文章页数】：100 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

皂苷合成途径Fig.1.1Thesaponinsbiosynthesispathway

江苏大学硕士学位论文13谢过程尚不完全清楚，所以对其深入研究显得尤为重要，为进一步在基因水平上对其改良奠定理论基矗本文优化了蝉拟青霉皂苷的培养条件，采用薄层色谱层析法对蝉拟青霉皂苷进行定性分析，并对蝉拟青霉皂苷的抗氧化性进行系统测定，利用高通量转录组测序技术从转录水平探究氮源对蝉拟青霉胞外产皂苷的代谢关键酶基因，并对差异基因的表达模式进行研究，为进一步研究蝉拟青霉皂苷合成代谢途径提供理论依据。1.3.2技术路线技术路线如图2.2所示。图1.2试验技术路线图Fig.1.2Experimentalroadmap1.3.3主要研究内容针对天然蝉花市场供不应求，人工栽培蝉花困难以及皂苷的多种生物学活性等，本研究的主要内容是探索优化利用蝉拟青霉菌种通过液体发酵合成蝉花的生物活性成分之一的皂苷的工艺条件，以氮源尿素作为调控因子，研究了添加尿素后转录组学的差异，探究蝉拟青霉合成胞外皂苷的代谢控制的关键位点，并对皂苷合成通路进行研究，为进一步研究蝉花皂苷合成代谢途径提供理论依据。采用薄层层析色谱法对蝉花皂苷进行定性分析，以还原力、DPPH自由基清除力及羟基自由基抑制力为指标，分析了蝉花粗皂苷的抗氧化性能，为进一步研究体内生

尿素调节蝉拟青霉合成胞外皂苷机制及其抗氧化活性研究28=0.580+0.1491+1.0120.9693+4.11240.1415+0.221120.04813+0.32914+0.559150.124231.425240.18625+1.18534+0.509352.065450.03012+0.01822+0.07632+0.846420.49552（2.2）交互作用F2F4的p值<0.05，F2F4的等高线如图2.6所示，从图中可以看出果糖与尿素具有交互效应，且较为显著，说明果糖与尿素交互作用对蝉拟青霉培养产皂苷的影响比较大。图2.6果糖与尿素交互作用等高线Fig.2.6Contourofinteractionbetweenfructoseandurea2.3.4无机盐与营养因子交互作用结果根据上面碳氮源响应面优化结果即以木糖4.43%、果糖4.73%、甘油1.14%、尿素0.13%、蛋白胨0.85%作为基础培养基对蝉拟青霉高产皂苷进行无机盐与营养因子响应面设计。设计实验与结果如表2.6所示。


本文编号：3122637