牛樟芝活性成分发酵耦合提取新工艺的初步探究
发布时间：2021-05-13 10:41
牛樟芝是中国台湾特有的一种稀有药用真菌,只寄生在倒伏枯死牛樟树的心材内壁,难以获得。牛樟芝具有很强的药用作用,其菌丝体中特有的泛醌类化合物4-acetylantroquinonol B（以下简称4AAQB）对肝癌细胞Heph2具有明显的抑制作用,可作为一种潜在的抗癌药物。但由于其生长条件的限制,无法大规模生产。本实验以液态发酵培养的方式获得菌丝体,以改进子实体培养所带来的生产周期长和质量不稳定等缺点。在液态发酵中使用发酵耦合提取新工艺,使原本胞内产物流向胞外,被发酵液中提取剂富集,实现初步分离。主要工作内容如下:一、通过对各类含苯环类物质等外源添加物的种类,添加时间,添加量进行探究,成功筛选出第发酵过程第6 d添加0.008%（m/v）的对甲基苯甲酸,其做为小分子物质添加低浓度即可大幅提升牛樟芝菌丝体中的4AAQB和三萜类化合物,产量分别为0.57 mg/g和130.26 mg/g,较空白对照组提升了 3.35倍和1.61倍。在目前的研究中尚数首次,可以避免以往的外源添加物量大,成分复杂造成后续分离困难等因素,对牛樟芝合成4AAQB和三萜类化合物的代谢途径研究具有指导意义。二、实验中对...
【文章来源】：北京化工大学北京市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：88 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
学位论文数据集
摘要
abstract
第一章 绪论
1.1 牛樟芝简介
1.1.1 牛樟芝的发现与命名
1.1.2 牛樟芝的生物学特性
1.2 牛樟芝的人工培养方式
1.2.1 椴木培养
1.2.2 固体发酵培养
1.2.3 液态发酵培养
1.2.4 发酵耦合提取技术
1.3 牛樟芝活性成分与药理活性
1.3.1 牛樟芝多糖类与糖蛋白类
1.3.2 三萜类化合物
1.3.3 腺苷
1.3.4 超氧化物歧化酶
1.3.5 泛醌类化合物
1.4 课题研究目的及意义
1.5 本论文研究内容
第二章 外源添加物对牛樟芝活性成分的影响
2.1 实验材料与设备
2.1.1 实验菌种
2.1.2 培养基
2.1.3 实验试剂
2.1.4 实验设备
2.2 实验方法
2.2.1 固体平板培养方法
2.2.2 固体斜面培养方法
2.2.3 孢子悬液制备方法
2.2.4 液体种子培养方法
2.2.5 生物量测定方法
2.2.6 胞外多糖测定方法
2.2.7 菌丝体中三萜类化合物测定方法
2.2.8 菌丝体中4-acetylantroquinonol B的测定
2.3 实验设计
2.3.1 牛樟芝发酵生长曲线的绘制
2.3.2 外源添加物的选择
2.3.3 含苯环氨基酸对牛樟芝活性成分的影响
2.3.4 抗生素对牛樟芝活性成分的影响
2.3.5 对甲基苯甲酸乙酯对牛樟芝活性产物的影响
2.3.6 添加三种甲基苯甲酸对牛樟芝活性成分的影响
2.3.7 甲苯对牛樟芝活性成分的影响
2.3.8 对甲基苯甲酸浓度对牛樟芝活性成分的影响
2.3.9 对甲基苯甲酸添加时间对牛樟芝活性成分的影响
2.4 结果与讨论
2.4.1 牛樟芝发酵生长曲线的绘制
2.4.2 外源添加物的选择
2.4.3 含苯环氨基酸对牛樟芝活性成分的影响
2.4.4 抗生素对牛樟芝活性成分的影响
2.4.5 对甲基苯甲酸乙酯对牛樟芝活性产物的影响
2.4.6 添加三种甲基苯甲酸对牛樟芝活性成分的影响
2.4.7 甲苯对牛樟芝活性成分的影响
2.4.8 对甲基苯甲酸浓度对牛樟芝活性成分的影响
2.4.9 对甲基苯甲酸添加时间对牛樟芝活性成分的影响
2.5 本章小结
第三章 牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB工艺的初步探究
3.1 实验材料与设备
3.1.1 实验菌种及培养基
3.1.2 实验试剂
3.1.3 实验设备
3.2 实验方法
3.2.1 发酵液中4-acetylantroquinonol B的测定
3.3 实验设计
3.3.1 表面活性剂种类的选取对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.3.2 提取剂种类的选取对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.3.3 表面活性剂添加量对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.3.4 提取剂添加量对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.3.5 Tween-80添加天数对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.3.6 油酸添加天数对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.4 结果与讨论
3.4.1 表面活性剂种类的选取对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.4.2 提取剂种类的选取对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.4.3 表面活性剂添加量对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.4.4 提取剂添加量对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.4.5 Tween-80添加天数对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.4.6 油酸添加天数对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.5 本章小结
第四章 牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物工艺的初步探究
4.1 实验材料与设备
4.1.1 实验菌种及培养基
4.1.2 实验试剂
4.1.3 实验设备
4.2 实验方法
4.2.1 发酵液中三萜类化合物的测定
4.3 实验设计
4.3.1 提取剂种类的选取对牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物的影响
4.3.2 表面活性剂添加量对牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物的影响
4.3.3 提取剂添加量对牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物的影响
4.3.4 Tween-80添加天数对牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物的影响
4.3.5 油酸添加天数对牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物的影响
4.4 结果与讨论
4.4.1 提取剂种类的选取对牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物的影响
4.4.2 表面活性剂添加量对牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物的影响
4.4.3 提取剂添加量对牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物的影响
4.4.4 Tween-80添加天数对牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物的影响
4.4.5 油酸添加天数对牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物的影响
4.5 本章小结
第五章 结合验证实验
5.1 实验材料与设备
5.1.1 实验菌种及培养基
5.1.2 实验试剂
5.1.3 实验设备
5.2 实验方法
5.3 实验设计
5.3.1 单独添加油酸对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB和三萜类化合物的影响
5.3.2 添加外源添加物对发酵耦合提取工艺产活性成分的影响
5.4 结果与讨论
5.4.1 单独添加油酸对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB和三萜类化合物的影响
5.4.2 添加外源添加物对发酵耦合提取工艺产活性成分的影响
5.5 本章小结
第六章 结论与展望
6.1 结论
6.2 展望
参考文献
致谢
研究成果和发表的学术论文
作者及导师简介
附件
本文编号：3183869
【文章来源】：北京化工大学北京市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：88 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
学位论文数据集
摘要
abstract
第一章 绪论
1.1 牛樟芝简介
1.1.1 牛樟芝的发现与命名
1.1.2 牛樟芝的生物学特性
1.2 牛樟芝的人工培养方式
1.2.1 椴木培养
1.2.2 固体发酵培养
1.2.3 液态发酵培养
1.2.4 发酵耦合提取技术
1.3 牛樟芝活性成分与药理活性
1.3.1 牛樟芝多糖类与糖蛋白类
1.3.2 三萜类化合物
1.3.3 腺苷
1.3.4 超氧化物歧化酶
1.3.5 泛醌类化合物
1.4 课题研究目的及意义
1.5 本论文研究内容
第二章 外源添加物对牛樟芝活性成分的影响
2.1 实验材料与设备
2.1.1 实验菌种
2.1.2 培养基
2.1.3 实验试剂
2.1.4 实验设备
2.2 实验方法
2.2.1 固体平板培养方法
2.2.2 固体斜面培养方法
2.2.3 孢子悬液制备方法
2.2.4 液体种子培养方法
2.2.5 生物量测定方法
2.2.6 胞外多糖测定方法
2.2.7 菌丝体中三萜类化合物测定方法
2.2.8 菌丝体中4-acetylantroquinonol B的测定
2.3 实验设计
2.3.1 牛樟芝发酵生长曲线的绘制
2.3.2 外源添加物的选择
2.3.3 含苯环氨基酸对牛樟芝活性成分的影响
2.3.4 抗生素对牛樟芝活性成分的影响
2.3.5 对甲基苯甲酸乙酯对牛樟芝活性产物的影响
2.3.6 添加三种甲基苯甲酸对牛樟芝活性成分的影响
2.3.7 甲苯对牛樟芝活性成分的影响
2.3.8 对甲基苯甲酸浓度对牛樟芝活性成分的影响
2.3.9 对甲基苯甲酸添加时间对牛樟芝活性成分的影响
2.4 结果与讨论
2.4.1 牛樟芝发酵生长曲线的绘制
2.4.2 外源添加物的选择
2.4.3 含苯环氨基酸对牛樟芝活性成分的影响
2.4.4 抗生素对牛樟芝活性成分的影响
2.4.5 对甲基苯甲酸乙酯对牛樟芝活性产物的影响
2.4.6 添加三种甲基苯甲酸对牛樟芝活性成分的影响
2.4.7 甲苯对牛樟芝活性成分的影响
2.4.8 对甲基苯甲酸浓度对牛樟芝活性成分的影响
2.4.9 对甲基苯甲酸添加时间对牛樟芝活性成分的影响
2.5 本章小结
第三章 牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB工艺的初步探究
3.1 实验材料与设备
3.1.1 实验菌种及培养基
3.1.2 实验试剂
3.1.3 实验设备
3.2 实验方法
3.2.1 发酵液中4-acetylantroquinonol B的测定
3.3 实验设计
3.3.1 表面活性剂种类的选取对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.3.2 提取剂种类的选取对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.3.3 表面活性剂添加量对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.3.4 提取剂添加量对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.3.5 Tween-80添加天数对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.3.6 油酸添加天数对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.4 结果与讨论
3.4.1 表面活性剂种类的选取对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.4.2 提取剂种类的选取对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.4.3 表面活性剂添加量对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.4.4 提取剂添加量对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.4.5 Tween-80添加天数对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.4.6 油酸添加天数对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB的影响
3.5 本章小结
第四章 牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物工艺的初步探究
4.1 实验材料与设备
4.1.1 实验菌种及培养基
4.1.2 实验试剂
4.1.3 实验设备
4.2 实验方法
4.2.1 发酵液中三萜类化合物的测定
4.3 实验设计
4.3.1 提取剂种类的选取对牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物的影响
4.3.2 表面活性剂添加量对牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物的影响
4.3.3 提取剂添加量对牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物的影响
4.3.4 Tween-80添加天数对牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物的影响
4.3.5 油酸添加天数对牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物的影响
4.4 结果与讨论
4.4.1 提取剂种类的选取对牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物的影响
4.4.2 表面活性剂添加量对牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物的影响
4.4.3 提取剂添加量对牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物的影响
4.4.4 Tween-80添加天数对牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物的影响
4.4.5 油酸添加天数对牛樟芝发酵耦合提取产三萜类化合物的影响
4.5 本章小结
第五章 结合验证实验
5.1 实验材料与设备
5.1.1 实验菌种及培养基
5.1.2 实验试剂
5.1.3 实验设备
5.2 实验方法
5.3 实验设计
5.3.1 单独添加油酸对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB和三萜类化合物的影响
5.3.2 添加外源添加物对发酵耦合提取工艺产活性成分的影响
5.4 结果与讨论
5.4.1 单独添加油酸对牛樟芝发酵耦合提取产4AAQB和三萜类化合物的影响
5.4.2 添加外源添加物对发酵耦合提取工艺产活性成分的影响
5.5 本章小结
第六章 结论与展望
6.1 结论
6.2 展望
参考文献
致谢
研究成果和发表的学术论文
作者及导师简介
附件
本文编号：3183869
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