血红密孔菌漆酶的分离纯化及其对工业染料的脱色

发布时间：2021-05-17 13:33

　　漆酶（laccase,EC 1.10.3.2）,又名对苯二酚:氧化还原酶（benzenediol:oxygen oxidoreductase）,是指一类含铜的多酚氧化酶,其在环境污染物生物修复、生物能源生产、化合物合成及生物检测等领域有广阔的应用潜力。本论文以白腐菌——血红密孔菌Pycnoporus sanguineus MX5为漆酶生产菌株,研究了其发酵产酶条件、粗酶液的分离纯化、纯酶液的酶学性质以及其对染料的脱色能力,目的是为了探索未知的真菌漆酶种类,并发现其潜在的工业应用潜力。全文的主要结论如下:分别通过添加诱导剂、表面活性剂及真菌共培养这3种方式,对P.sanguineus MX5液态发酵产漆酶的条件进行了部分优化,首先设置不同的浓度梯度,接着采用多重比较进行统计分析,最终发现邻甲苯胺、吐温80、Gongronella sp.w5的接种量（v/v）分别为0.006%、0.04%和2%时,其诱导效果最好,达到顶峰时的漆酶产量分别为20980.55、12724.07和9389.81 U/L,较对照提高36.25%、119.93%和42.13%。经过超滤浓缩、硫酸铵分级沉淀、透析、D... 

【文章来源】：浙江农林大学浙江省

【文章页数】：79 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
1 文献综述
    1.1 漆酶简介
        1.1.1 漆酶的来源
        1.1.2 漆酶的结构及活性中心
        1.1.3 漆酶的催化机理
        1.1.4 漆酶的底物特异性
        1.1.5 漆酶介体系统
    1.2 真菌漆酶
        1.2.1 白腐菌漆酶
        1.2.2 真菌漆酶的优化培养
        1.2.3 真菌漆酶的分离纯化
        1.2.4 真菌漆酶的理化特性
        1.2.5 真菌漆酶的序列同源性
    1.3 漆酶的应用
        1.3.1 工业染料的脱色降解
        1.3.2 环境污染物的生物修复
        1.3.3 生物检测
        1.3.4 化合物合成
        1.3.5 抗增殖和抗HIV活性
        1.3.6 纺织、造纸、生物能源及食品工业
    1.4 本论文的研究内容与意义
2 血红密孔菌漆酶的优化培养
    2.1 材料与方法
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 实验方法
    2.2 结果与分析
        2.2.1 邻甲苯胺对漆酶分泌的影响
        2.2.2 吐温80对漆酶分泌的影响
        2.2.3 共培养系统对漆酶分泌的影响
    2.3 讨论
3 血红密孔菌漆酶的分离纯化
    3.1 材料与方法
        3.1.1 实验材料
        3.1.2 实验方法
    3.2 结果与分析
        3.2.1 漆酶的分离纯化结果
        3.2.2 漆酶的酶谱分析结果
        3.2.3 漆酶同工酶的光谱特征
        3.2.4 漆酶的部分氨基酸序列
    3.3 讨论
4 血红密孔菌漆酶的酶学性质
    4.1 材料与方法
        4.1.1 实验材料
        4.1.2 实验方法
    4.2 结果与分析
        4.2.1 pH值对漆酶活力的影响及其pH稳定性
        4.2.2 温度对漆酶活力的影响及其热稳定性
        4.2.3 漆酶动力学参数的测定
        4.2.4 抑制剂及金属离子对漆酶活力的影响
    4.3 讨论
5 血红密孔菌漆酶对染料的脱色作用
    5.1 材料与方法
        5.1.1 实验材料
        5.1.2 实验方法
    5.2 结果与分析
        5.2.1 反应体系中的染料浓度
        5.2.2 漆酶及LMS对染料脱色的影响
    5.3 讨论
6 全文总结
    6.1 主要结论
    6.2 不足与展望
参考文献
附录 本文中专业术语缩写及中英文对照表
个人简介
致谢



本文编号：3191852