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聚乙二醇/环糊精自组装水凝胶载体构建及用于酶的负载

发布时间:2021-06-19 20:33
  环糊精/聚乙二醇自组装形成的水凝胶,具有较好的亲水性、生物相容性、渗透性和机械强度等特性,有望在生物大分子固定化方面得到应用。本论文中,将四臂聚乙二醇衍生物与α-环糊精自组装并交联,形成聚轮烷(PRX)水凝胶,对酶进行负载,并对其结构、性质和应用进行考察。首先,将穿环了α-环糊精的四臂聚乙二醇硫醇(4arm-PEG-SH)末端巯基用过氧化氢氧化,成功地制得了PRX水凝胶,并负载了脲酶及葡萄糖氧化酶。利用红外光谱,X射线粉末衍射和扫描电镜等分析方法对PRX水凝胶的结构进行表征,结果表明制备的水凝胶具有准聚轮烷的通道型特征结构及多孔的网格结构。当4arm-PEG-SH/α-CD质量比为1:2时,形成的PRX水凝胶结构致密,且机械强度好。其次,考察了PRX水凝胶负载脲酶和葡萄糖氧化酶的酶活及稳定性,并从分子结构方面比较了两种固定化酶的酶学性质差异。结果表明,PRX水凝胶负载脲酶后并没有表现出明显的活性,可能是脲酶活性中心附近的游离巯基被氧化所致;而PRX水凝胶负载葡萄糖氧化酶的酶活相对比较稳定,且对pH的耐受性较好,在酸性和中性条件下仍能保持一定的酶活。由于氧化法制备的PRX凝胶对还原剂比较... 

【文章来源】:华侨大学福建省

【文章页数】:81 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

聚乙二醇/环糊精自组装水凝胶载体构建及用于酶的负载


三种环糊精的空腔结构以及立体结构

水凝胶,交联,化学反应,巯基


4图1.3利用点击化学反应交联的稳定PEG/α-CD聚轮烷水凝胶Fig.1.3ThestablePEG/α-CDPRXhydrogelcross-linkedbyclick-chemicalreaction1.2巯基/二硫键反应1.2.1巯基/二硫键交换反应巯基/二硫键交换反应是酶偶联反应的一种,指带—SH的载体,通过巯基/二巯基的交换反应和生物分子上非必需巯基偶联。其总反应可以分为图1.4中的几个步骤,2mol的硫醇基团转化为1mol的二硫化合物需要半摩尔的氧分子,其中主要的限速步骤为P-S-与氧气的反应,所以在反应过程中需注意氧气的使用量[12,13]。因为巯基/二硫键交换反应可以通过还原剂如二硫苏糖醇(DTT)、还原型谷胱甘肽(GSH)等使二硫键断裂,故可以通过其氧化还原特性制备氧化还原型功能水凝胶。图1.4巯基氧化为二硫键的反应机理Fig.1.4Thereactionmechanismofsulphydrylgroupoxidationtodisulfidebond

硫键,巯基,反应机理


4图1.3利用点击化学反应交联的稳定PEG/α-CD聚轮烷水凝胶Fig.1.3ThestablePEG/α-CDPRXhydrogelcross-linkedbyclick-chemicalreaction1.2巯基/二硫键反应1.2.1巯基/二硫键交换反应巯基/二硫键交换反应是酶偶联反应的一种,指带—SH的载体,通过巯基/二巯基的交换反应和生物分子上非必需巯基偶联。其总反应可以分为图1.4中的几个步骤,2mol的硫醇基团转化为1mol的二硫化合物需要半摩尔的氧分子,其中主要的限速步骤为P-S-与氧气的反应,所以在反应过程中需注意氧气的使用量[12,13]。因为巯基/二硫键交换反应可以通过还原剂如二硫苏糖醇(DTT)、还原型谷胱甘肽(GSH)等使二硫键断裂,故可以通过其氧化还原特性制备氧化还原型功能水凝胶。图1.4巯基氧化为二硫键的反应机理Fig.1.4Thereactionmechanismofsulphydrylgroupoxidationtodisulfidebond

【参考文献】:
期刊论文
[1]PEG/α-环糊精准聚轮烷水凝胶与BSA相互作用的光谱学研究[J]. 林集端,赵珺.  化工进展. 2016(11)
[2]生物法处理印染废水的研究进展[J]. 梁波,徐金球,关杰,郭耀广,苏瑞景.  化工环保. 2015(03)
[3]巯基-烯/炔点击化学研究进展[J]. 刘清,张秋禹,陈少杰,周健,雷星锋.  有机化学. 2012(10)
[4]微酸多年卧孔菌产漆酶条件优化及其在染料脱色中的应用[J]. 司静,崔宝凯,贺帅,戴玉成.  应用与环境生物学报. 2011(05)
[5]真菌漆酶性质、分子生物学及其应用研究进展[J]. 司静,李伟,崔宝凯,戴玉成.  生物技术通报. 2011(02)
[6]“点击化学”在放射性药物合成中的应用[J]. 王成,王妮,周伟,沈玉梅,张岚.  化学进展. 2010(08)
[7]点击化学与功能有机/聚合物材料[J]. 陈琳,石乃恩,钱妍,解令海,范曲立,黄维.  化学进展. 2010(Z1)
[8]固定化微生物技术在废水处理中的应用研究进展[J]. 肖亦,钟飞,潘献晓.  环境科学与管理. 2009(06)
[9]铜(Ⅱ)对漆酶活性的影响[J]. 王习文,詹怀宇,何为.  纸和造纸. 2003(04)
[10]亲水凝胶控释给药系统[J]. KnuthK,王亚敏.  国外医学.药学分册. 1994(05)

博士论文
[1]可见光驱动的银系异质功能材料制备及在水中三苯甲烷类染料处理中的应用[D]. 王少莽.南京大学 2015

硕士论文
[1]葡萄糖氧化酶产生菌的诱变育种及条件优化[D]. 朱洪菊.山东师范大学 2012



本文编号:3238495

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