Raoultella ornithinolytica 160-1产生物絮凝剂的特性及其发酵优化

发布时间：2021-08-02 19:38

　　通过16S r DNA测序、生理生化试验和MALDI-TOF MS分析,分离并鉴定了一株能产生高效的生物絮凝剂菌株Raoultella ornithinolytica160-1。Raoultella ornithinolytica160-1经过24 h培养后分泌胞外多糖聚合物（EPS-160）,用乙醇在4℃条件下沉淀提取得到多糖粗品,通过透析袋去除离子和残余的培养基成分,进行进一步纯化得到2.76g/L多糖纯品。测试纯化冻干后的多糖纯品絮凝活性并用不同方法检测多糖结构和组成。当Al3+和Fe3+存在时,EPS-160能絮凝高岭土。在Al3+的辅助下,EPS-160的絮凝效率更高。在Al3+浓度为0.08mg/m L、EPS-160浓度为43.2mg/L时,多糖絮凝剂获得最高的絮凝效率,最高效率为97.94%。EPS-160能在1至13的p H范围和40至100℃温度范围内保存,并且能在p H在3¹0和20¹00℃的环境中保证高絮凝效率。实验化学分析结果显示,EPS-160主要由蛋白质（5.7%）和多糖（80.3%）组成。高效液相色谱测得多糖各... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

葡萄糖浓度标准曲线

安徽医科大学硕士学位论文20图2.BSA浓度标准曲线Fig2.BSAconcentrationstandardcurve2.2.6.4高效液相色谱分析1、絮凝剂水解：取纯化后的EPS-160样品20mg溶于2M三氟乙酸溶液，在120℃水解4小时，通过旋转蒸发仪将三氟乙酸去除。2、HPLC检测：HPLC：Agilent1200；色谱柱：ROA-OrganicAcidH+(8%)柱（Phenomenex，USA）[15]；检测系统：示差折光检测器；流动相：0.005MH2SO4；柱温：75℃；流速：0.3mL/min；进样体积：20μL；用葡萄糖，甘露糖，鼠李糖等糖纯品做标准品，所有样品必需通过0.45μm滤膜。3、样品测定：通过标准品辨识各组分性质和含量。2.2.6.5薄层层析分析展层剂：乙酸乙酯：异丙醇：正丁醇：醋酸：水：吡啶=100:60:35:35:30:30显色剂：取1ml苯胺将1.0g二苯胺完全溶解后，加入50ml丙酮，最后加5ml85%

安徽医科大学硕士学位论文28图3.R.ornithinolytica160-1的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱与进化树分析:(a)基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱图，(b)进化树Fig3.TheresultsofMALDI-TOFMSandphylogenetictreeanalysisofR.ornithinolytica160-1:(a)MALDI-TOFMS,(b)evolutionarytree

【参考文献】：
期刊论文
[1]Screening and Characterization of a Bioflocculant Produced by Aeromonas sp[J]. XIAO-MING LI1,QI YANG,KAI HUANG,GUANG-MING ZENG,DE-XIANG LIAO,JIN-JING LIU,AND WEN-FANG LONG College of Environmental Science and Engineering,Hunan University,Changsha 410082,Hunan,China.  Biomedical and Environmental Sciences. 2007(04)



本文编号：3318153