尼罗蓝类癌症标志酶荧光诊疗剂的开发和应用

发布时间：2021-08-08 13:06

　　癌症是一种极具侵略性的疾病,表现为不受控制的细胞生长和细胞分裂,因此其发病率和死亡率一直居高不下。癌症的早期诊断和治疗可以延长90%以上癌症患者的生存期,是癌症治疗的关键。传统化学疗法目前是临床上治疗癌症的主要手段,但其对正常组织的毒副作用以及不可避免的耐药性,严重地制约了它的发展。荧光诊疗试剂通过结合靶向癌细胞的抗癌药物和荧光分子,可同时实现对癌症的荧光诊断与靶向治疗。癌症标志物,尤其是癌症标志酶,具有高度的特异性,是癌症治疗的高效靶点。因此本论文针对癌症标志酶,设计合成荧光诊疗试剂用于癌症的荧光诊断与精准治疗。本论文合成了一例氨肽酶N（APN）激活的荧光诊疗试剂NBFMel。该试剂通过柔性链己二胺连接了近红外（NIR）荧光团尼罗蓝与APN响应的美法仑前药对-氟苯丙氨酰-L-美法仑（J1）。NBFMel由于分子内的PET效应,本身没有荧光,并表现出低毒性;一旦被APN激活,可产生NIR荧光用于癌症的荧光诊断,同时释放出的抗癌药美法仑可杀死癌细胞。由于NBFMel选择性靶向于癌细胞,因此对APN阳性癌细胞表现出显著的细胞毒性。更重要的是,NBFMel能有效地治愈B16/BL6肿瘤模型,... 

【文章来源】：大连理工大学辽宁省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：100 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
1 绪论
    1.1 荧光成像在癌症治疗中的应用
    1.3 传统非靶向治疗的弊端
    1.4 尼罗蓝类似物在癌症诊疗试剂中的应用
    1.5 靶向荧光诊疗试剂的优势与构成
    1.6 靶向荧光诊疗试剂的设计
        1.6.1 细胞巯基可活化的荧光诊疗试剂
        1.6.2 过氧化氢激活的荧光诊疗试剂
        1.6.3 酸性pH激活的荧光诊疗试剂
        1.6.4 缺氧激活的荧光诊疗试剂
        1.6.5 基于酶促切割的荧光诊疗试剂
        1.6.6 光活化的荧光诊疗试剂
    1.7 癌症标志酶
    1.8 论文选题背景、意义和主要内容
2 基于氨肽酶N激活的荧光诊断治疗试剂
    2.1 背景介绍
    2.2 设计思路与目的
        2.2.1 分子设计与合成路线
        2.2.2 目的与意义
    2.3 实验部分
        2.3.1 仪器与试剂
        2.3.2 染料分子及中间体的合成
        2.3.3 细胞孵育和成像
        2.3.4 流式细胞术实验
        2.3.5 细胞毒性实验
        2.3.6 细胞凋亡实验
        2.3.7 活体荧光成像
        2.3.8 小鼠肿瘤模型治疗实验
    2.4 结果和讨论
        2.4.1 NBFMel对 APN的响应光谱
        2.4.2 荧光与水解发生的机制模拟
        2.4.3 细胞摄取与成像
        2.4.4 体外细胞毒性评估
        2.4.5 肿瘤诊断和体内化疗评估
    2.5 本章小结
3 基于表皮生长因子受体(EGFR)靶向光动力荧光诊疗试剂
    3.1 背景介绍
    3.2 设计思路与目的
        3.2.1 分子设计与合成路线
        3.2.2 目的与意义
    3.3 实验部分
        3.3.1 仪器与试剂
        3.3.2 NBSNe及中间体的合成
        3.3.3 细胞孵育和成像
        3.3.4 细胞摄取实验
        3.3.5 细胞内活性氧检测
        3.3.6 细胞毒性实验
        3.3.7 细胞内超氧阴离子自由基检测
        3.3.8 细胞内羟自由基检测
        3.3.9 活死细胞染色
        3.3.10 细胞凋亡实验
        3.3.11 细胞迁移实验
        3.3.12 细胞侵袭实验
        3.3.13 活体荧光成像
        3.3.14 小鼠肿瘤模型治疗实验
        3.3.15 免疫荧光成像
        3.3.16 体内生物安全性评价
    3.4 结果和讨论
        3.4.1 NBSNe光物理性质
        3.4.2 细胞摄取与毒性测试
        3.4.3 胞内活性氧检测与毒性评估
        3.4.4 NBSNe与不同表型EGFR模型对接
        3.4.5 NBSNe逆转EGFR-TKI治疗抗性
        3.4.6 NBSNe活体肿瘤成像以及疗效和安全性评估
    3.5 本章小结
结论
参考文献
附录
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢



本文编号：3330010