果胶降解菌的筛选及利用马铃薯薯渣产酶条件优化

发布时间：2021-08-08 20:39

　　马铃薯薯渣废弃物主要是马铃薯淀粉加工过程中产生的汁水和废渣,含有大量的水分、淀粉、纤维素、果胶以及游离的多肽和氨基酸。日益突出的马铃薯薯渣污染问题,是马铃薯淀粉工业目前面临的重大难题。目前,利用果胶酶生产菌种对马铃薯薯渣发酵是其资源化应用的一个重要方面,既能解决废弃物所带来的环境污染问题,同时又能通过菌种发酵对原料进行预处理,降解薯渣中的果胶,降低薯渣的烘干成本以及提高薯渣中的膳食纤维含量,为后期用作动物饲料做准备,是一项一举多得的生物技术。本研究通过从自然界中筛选到一株高产果胶酶菌株,应用于马铃薯薯渣发酵产果胶酶降解果胶。首先,通过在以果胶唯一碳源的平板上进行菌种的初筛,经过不断的划线纯化得到10株丝状产孢真菌。其次,通过两步复筛:先对已纯化的10株产孢真菌进行单菌落刚果红染色透明圈观察,以实验室现有高产果胶酶菌株黑曲霉（Aspergillus niger CGMCC 3.316）作对比,筛选出5株菌其透明圈直径与菌落直径比值（D/d）比黑曲霉（Aspergillus niger CGMCC 3.316）比值大的菌种;随后通过DNS法定量测定上述6株菌的果胶酶酶活,最终筛选出一株高产... 

【文章来源】：哈尔滨工业大学黑龙江省 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

各株菌的菌落图

哈尔滨工业大学工程硕士学位论文复筛察透明圈株的孢子悬液涂于初筛平板上活化有 1 mL 无菌水的 EP 管中，并尽量过滤，得到孢子悬浮液，颠倒混匀后数，根据计数结果稀释孢子悬浮液上，培养至单菌落大小适中，用 7 完全覆盖培养基表面但不没过菌落aCl 洗液浸泡 20 min，倾去洗液，再行测量和记录。并与实验室菌种的 值比实验室黑曲霉（Aspergillus nigG、H 号。

arker DL2000 空白：以水为模板做空白对照 H1、H2、H3 为平行培菌株的 PCR 结果图 3-5 H 号菌株 ITS 序列 PCR 扩增结果盒将切下的目标条带进行胶回收，用 NanoDrop 2000c 仪器检为 47.1 ng/μL，A260/A280 为 1.89，符合 DNA 浓度比值范围。果为 586 bp，其序列见图 3-6。以黑曲霉同属不同种的其他曲霉为对比，利用 Mega6.0 构建菌株 H 的系统进化树[112]。如图 3- H 与其他 10 个曲霉属在同一进化簇上，说明 H 菌株同属曲霉不在同一分支上，说明与他们进化关系较远，与黑曲霉 ABI-JJ2分支上，说明两者进化关系较近，经过 DNAMAN 的相似度精确，H 菌株与黑曲霉 ABI-JJ2 的同源性为 100%。以上实验结果说属真菌。750 bp500 bp

【参考文献】：
期刊论文
[1]酶法处理马铃薯渣对其功能性质的影响[J]. 程力,廖瑾,顾正彪,洪雁,李兆丰.  食品工业科技. 2015(05)
[2]马铃薯淀粉生产过程中薯渣的有效利用技术[J]. 顾正彪,程力,洪雁,李兆丰.  食品科学技术学报. 2013(01)
[3]纤维素酶、果胶酶及半纤维素酶对肉仔鸡DDGS型日粮养分消化率的影响[J]. 李改娟,刘洋,杨小军,冯忠义,姚军虎,史宝军,周振锋,冯新雨.  饲料工业. 2010(10)

博士论文
[1]地衣芽孢杆菌转化薯渣与汁水效能及其代谢机理研究[D]. 刘冰南.哈尔滨工业大学 2015

硕士论文
[1]拜氏梭菌F-6合成丁醇发酵工艺优化及其动力学研究[D]. 圣亚春.哈尔滨工业大学 2017
[2]马铃薯渣发酵生产蛋白饲料的研究[D]. 宋雅芸.陕西科技大学 2017
[3]复合微生物发酵薯渣条件优化[D]. 张立宏.哈尔滨工业大学 2015
[4]黑曲霉降解马铃薯纤维素作用强化的研究[D]. 董佳程.哈尔滨工业大学 2013
[5]马铃薯渣资源循环利用的工艺技术研究[D]. 吴海燕.华南理工大学 2012
[6]薯渣饲料中增加赖氨酸含量的工艺及相关生物信息学分析[D]. 李莹.哈尔滨工业大学 2011
[7]马铃薯薯渣与汁水资源化发酵方法研究[D]. 余佳.哈尔滨工业大学 2009
[8]番茄叶霉菌拮抗放线菌的筛选、鉴定及发酵条件研究[D]. 曹广丽.东北农业大学 2006



本文编号：3330644