油酸水合酶的分子改造及羰基硬脂酸合成反应优化
发布时间:2021-08-16 22:26
油酸是一种可再生的生物质资源,通过油酸水合酶(PaOH)的催化可以转化为10-羟基硬脂酸;后者在醇脱氢酶(ADH)作用下可转化为10-羰基硬脂酸,再通过进一步酶法转化,可以生产中等链长(C8-C10)的脂肪醇、脂肪酸、羟基脂肪酸、氨基脂肪酸及二元酸。因此,10-羟基硬脂酸和10-羰基硬脂酸成为油酸生物炼制过程的关键中间体,同时也是高价值的精细化学品。ADH催化的氧化反应需要辅酶NAD+的参与,在反应过程中需要对NAD+进行循环再生以降低反应成本。本论文对油酸水合酶PaOH进行分子改造,提高了其催化活性及热稳定性;选择NADH氧化酶催化NAD+再生,并通过耦联过氧化氢酶,原位分解双氧水提供氧气作为NAD+再生的辅底物,降低了 10-羰基硬脂酸的生产成本。(1)建立油酸水合酶高通量筛选方法。利用M luteus WIUJH20来源的MlADH,催化10-羟基硬脂酸脱氢反应将NAD+还原为NADH,加入过量的吩嗪乙基硫酸盐(PES)和噻唑蓝(MTT)与NADH反应,可定量地生成一种蓝紫色产物,该物质在580 nm处具有可见光吸收峰,可使用分光光度计进行定量检测。此方法对10-羟基硬脂酸的检测...
【文章来源】:华东理工大学上海市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:74 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图2.2?A44〇随底物浓度变化散点图??Figure?2.2?Scatterplot?of?A440?varies?with?substrate?concentration??
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【参考文献】:
期刊论文
[1]天然胶乳中蛋白质和磷脂对橡胶分子结构的影响[J]. 吴龙梅,王勃翔,曲鹏,周荣杰,廖双泉. 高分子通报. 2015(06)
[2]油酸及其衍生物的应用[J]. 刘刚,努尔买买提·阿不都克里木,吾满江·艾力,刘远凤,陶敏芳. 新疆师范大学学报(自然科学版). 2004(01)
硕士论文
[1]油酸水合酶与脱氢酶级联催化制备10-羰基硬脂酸[D]. 吴艳霞.华东理工大学 2019
本文编号:3346490
【文章来源】:华东理工大学上海市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:74 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图2.2?A44〇随底物浓度变化散点图??Figure?2.2?Scatterplot?of?A440?varies?with?substrate?concentration??
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【参考文献】:
期刊论文
[1]天然胶乳中蛋白质和磷脂对橡胶分子结构的影响[J]. 吴龙梅,王勃翔,曲鹏,周荣杰,廖双泉. 高分子通报. 2015(06)
[2]油酸及其衍生物的应用[J]. 刘刚,努尔买买提·阿不都克里木,吾满江·艾力,刘远凤,陶敏芳. 新疆师范大学学报(自然科学版). 2004(01)
硕士论文
[1]油酸水合酶与脱氢酶级联催化制备10-羰基硬脂酸[D]. 吴艳霞.华东理工大学 2019
本文编号:3346490
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