牡丹籽蛋白水解物的制备及其抗氧化特性的研究

发布时间：2021-08-30 19:36

　　牡丹籽蛋白（Paeonia suffruticosa Andr.）因其合理的氨基酸组成和潜在的功能特性而被认为在食品工业中具有巨大的开发潜力。因此,本文以牡丹籽蛋白为原料,研究了不同蛋白酶酶解对牡丹籽蛋白理化特性的影响,探讨了不同蛋白酶水解物的功能特性和抗氧化活性;后将抗氧化活性较好的碱性蛋白酶水解物超滤分离得到不同分子量范围的多肽组分,研究了碱性蛋白酶水解物不同超滤组分的结构特征、化学抗氧化活性和对H₂O₂诱导的Hep G2细胞氧化损伤的保护作用。试验所得结果如下。（1）牡丹籽蛋白更易于碱性蛋白酶水解,并且碱性蛋白酶水解物具有较低的平均粒径（231.33±36 nm）和分子量分布（<13 kDa）。本征荧光谱图表明由不同蛋白酶水解得到的牡丹籽蛋白水解物λ_max发生明显的红移,说明牡丹籽蛋白水解物的空间结构打开并有少量的芳香族氨基酸暴露。二级结构含量表明五种蛋白酶水解使牡丹籽蛋白的二级结构发生明显的变化,尤其是α-螺旋结构,从15.01±0.36%减少到了5.72±0.69%-7.94±0.34%,使得牡丹籽蛋白的... 

【文章来源】：齐鲁工业大学山东省

【文章页数】：91 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

酪氨酸标准曲线

齐鲁工业大学硕士学位论文11表2.1蛋白酶酶活Table2.1Proteaseactivity酶的种类酶活碱性蛋白酶1.8×105U/g中性蛋白酶1.1×105U/g风味蛋白酶1.8×105U/g木瓜蛋白酶0.5×105U/g复合蛋白酶0.1×105U/g2.4.2水解度（DH）碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶和风味蛋白酶水解TPSP的水解曲线如图2.2所示。在水解前0.5h，所有蛋白酶水解TPSP的水解曲线随时间的增加呈快速上升趋势。在水解0.5h以后，中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶和风味蛋白酶的水解进程开始变慢，直至4h时达到稳态。而碱性蛋白酶的DH在0.5到4小时之间一直保持增大趋势。水解物的DH依赖于所使用的蛋白酶。在水解4h后，TPSP经碱性蛋白酶水解的DH最大，值为27.97%±0.47%，其次是木瓜蛋白酶（12.16%±0.05%），而中性蛋白酶（6.19%±0.23%）最低。因此，这些结果表明碱性蛋白酶对TPSP的水解能力强于其他四种蛋白酶。类似的当碱性蛋白酶水解鹰嘴豆分离蛋白、小麦蛋白和绿豆蛋白时较其他蛋白酶同样具有较高的水解能力，且DH最大值分别为14.67%、16.77%和23.51%[5,36,37]。这可能由于碱性蛋白酶属于非特异性蛋白质肽键内切酶，在酶解肽键时特异性非常广泛[5]。所以，这说明与其他蛋白酶水解相比，碱性蛋白酶存在更多的催化位点用来制备生物活性肽。图2.2TPSP的水解曲线Figure2.2ThehydrolysiscurvesofTPSP

第2章牡丹籽蛋白解产物的理化特性122.4.3牡丹籽蛋白水解物的粒径分布和SDS-PAGE电泳分析图2.3TPSP水解物的粒径分布图Figure2.3TheparticlesizedistributionofTPSPhydrolysates图2.4TPSP水解物的平均粒径Figure2.4TheparticlesizedistributionofTPSPhydrolysatesTPSP水解物的粒径分布和平均粒径如图2.3和图2.4所示。TPSP粒径的特点是在100至10000nm之间广泛分布，并且在粒径分布（PSD）中观察到四个峰（图2.3）。中性蛋白酶和复合蛋白酶水解物的PSD显示三个峰，其中一个峰的粒径范围>5000nm。碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解物的PSD仅在100-500nm处显示两个峰。碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶和风味蛋白酶水解物的平均粒径（图2.4）分别为231.33±36nm、346.13±31nm、296.73±25nm、336.23±27nm和364.83±34nm。显然，与TPSP（512.06nm）相比，TPSP水解物的平均粒径明显减小（P<0.05）。而且碱性蛋白酶水解物的平均粒

【参考文献】：
期刊论文
[1]酶解牡丹籽粕蛋白制备抗氧化肽的工艺优化[J]. 阎震,郭溆,张金宝,王青,程安玮,贺圣文,孙金月.  食品工业科技. 2018(07)
[2]牡丹籽酶解制备降血糖肽工艺的响应面优化[J]. 颜辉,蔡豪,贾俊强,江明珠,吴琼英.  江苏农业科学. 2017(14)

硕士论文
[1]牡丹籽油及蛋白的制备及其性质研究[D]. 庞雪风.武汉轻工大学 2014
[2]酶法制备玉米高F值寡肽及其抗疲劳活性的研究[D]. 刘金伟.山东轻工业学院 2012



本文编号：3373378