广西野生铁皮石斛多糖及其衍生物结构和活性研究
发布时间：2021-08-30 19:18
铁皮石斛具有较高的药用价值,具有“药中黄金”、“救命仙草”的美誉。广西植物资源丰富,但野生铁皮石斛资源处于濒危状态,为了更好地开发应用铁皮石斛,本文对广西野生铁皮石斛多糖进行了结构鉴定和活性研究。采用热水浸提法,得到粗多糖。通过单因素实验确定了提取温度、料液比及提取时间三种因素的水平,进而通过响应面实验探究多糖提取的最佳条件。粗多糖经过脱色、除蛋白,上柱分离,分别过DEAE-52纤维素柱和Sephadex G-100凝胶柱,分离纯化得到两个中性多糖组分（DOP1和DOP2）,通过原子力显微镜、红外光谱、高效凝胶色谱、高效液相色谱、气质联用、核磁共振对多糖结构进行表征,并首次在广西铁皮石斛中分离到一种寡糖。对DOP1进行硫酸化和乙酰化修饰,取代度分别为1.20和0.64,红外光谱显示具有相应的特征峰。以抗坏血酸为对照,采用三种方法来评价多糖及其衍生物的抗氧化活性。以5-氟尿嘧啶为对照,采用MTT法考察它们对癌细胞的抑制作用。其清除率或抑制率为修饰多糖>粗多糖>纯化多糖。对于不同的抗氧化实验或不同癌细胞,硫酸化修饰和乙酰化修饰各有高低,显示出不同的效果。本研究对铁皮石斛多糖的功...
【文章来源】：广西民族大学广西壮族自治区
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
温度和料液比相互
20图2.7温度和时间相互作用对铁皮石斛多糖提取率的影响图2.8料液比和时间相互作用对铁皮石斛多糖提取率的影响2.5小结采用热水浸提法提取多糖，实验简单方便。不同多糖在不同浓度的醇溶液中溶解度不同，按80%的醇浓度沉淀得到部分粗多糖，若改变醇沉时乙醇浓度，可能仍会有多糖沉淀，而多糖具体含量还有待实验进一步探究。冷冻干燥得到粗多糖，提取率31.65%，高于其他品种的石斛多糖提取率；多糖含量42%，需进行纯化工作。对影响多糖得率的四种因素进行单因素实验，根据结果确定了提取温度、料液比及提取时间三种因素的水平，进而通过响应面实验探究提取率的最佳条件。利用Design-Expert软件得到提取模型，提取温度一次项、提取温度二次项、料液比一次项、料液比二次项、时间二次项、温度与料液比项极显著，时间一次项、温度时间项显著，料液比时间项不显著。根据F值可知各因素对多糖得率的影响大小顺序为：料液比>温度>时间。通过3D曲面和等高线分析验证，温度和料液比相互作用对铁皮石斛多糖的提取率影响极显著，温度和时间相互作用对多糖得率显著，而料液比和时间相互作用对多糖得率影响不显著，模拟得到最佳提取条件：提取温度70.3℃，料液比1:36.9，提取时间2.18h，此时提取率为39.51%。重复验证试验对提取条件略做改动，在70℃，料液比1:37，提取2.18小时，提取2次，三次实验多糖平均得率是39.38%，稍低于模拟所得提取率，说明该条件可用于石斛多糖提龋
20图2.7温度和时间相互作用对铁皮石斛多糖提取率的影响图2.8料液比和时间相互作用对铁皮石斛多糖提取率的影响2.5小结采用热水浸提法提取多糖，实验简单方便。不同多糖在不同浓度的醇溶液中溶解度不同，按80%的醇浓度沉淀得到部分粗多糖，若改变醇沉时乙醇浓度，可能仍会有多糖沉淀，而多糖具体含量还有待实验进一步探究。冷冻干燥得到粗多糖，提取率31.65%，高于其他品种的石斛多糖提取率；多糖含量42%，需进行纯化工作。对影响多糖得率的四种因素进行单因素实验，根据结果确定了提取温度、料液比及提取时间三种因素的水平，进而通过响应面实验探究提取率的最佳条件。利用Design-Expert软件得到提取模型，提取温度一次项、提取温度二次项、料液比一次项、料液比二次项、时间二次项、温度与料液比项极显著，时间一次项、温度时间项显著，料液比时间项不显著。根据F值可知各因素对多糖得率的影响大小顺序为：料液比>温度>时间。通过3D曲面和等高线分析验证，温度和料液比相互作用对铁皮石斛多糖的提取率影响极显著，温度和时间相互作用对多糖得率显著，而料液比和时间相互作用对多糖得率影响不显著，模拟得到最佳提取条件：提取温度70.3℃，料液比1:36.9，提取时间2.18h，此时提取率为39.51%。重复验证试验对提取条件略做改动，在70℃，料液比1:37，提取2.18小时，提取2次，三次实验多糖平均得率是39.38%，稍低于模拟所得提取率，说明该条件可用于石斛多糖提龋
【参考文献】：
期刊论文
[1]金针菇子实体多糖FVPB2对小鼠T淋巴细胞和巨噬细胞的免疫调节作用[J]. 余冬生,吴莹莹,冯婷,张劲松,张赫男,吴迪,杨焱,刘肖肖,刘振东,贾薇,汪雯翰. 菌物学报. 2019(06)
[2]假芝菌丝体多糖ARP的纯化、结构及抗氧化活性[J]. 伍燕,申利群,朱华. 食品与发酵工业. 2019(09)
[3]仙茅多糖对小鼠巨噬细胞吞噬活性的影响[J]. 杨翠萍,蔡琨,宣锦,杨娟,徐彬人,陈海宁,郭金洲. 中国民族民间医药. 2019(08)
[4]白及多糖BSP-1的分离纯化、结构表征及抗肿瘤活性研究[J]. 陈思思,吴蓓,谭婷,谢赛赛,杨世林,冯育林,温泉. 中草药. 2019(08)
[5]三叶青地上部分多糖对乳腺癌小鼠的抗肿瘤作用[J]. 郭菁菁,赵英杰,李伟,钱朝东,丁志山. 中成药. 2019(04)
[6]大蒜多糖的提取纯化及对鸡体外外周血淋巴细胞增殖的影响[J]. 王慧,胡元亮,邱树磊,陈晓兰,刘海霞,郭长明,武彩红. 黑龙江畜牧兽医. 2018(03)
[7]新疆不同产地红花多糖含量测定及抗氧化活性研究[J]. 任丽君,袁洁,姚军. 新疆医科大学学报. 2018(02)
[8]昆仑雪菊多糖预防急性及免疫性肝损伤[J]. 曾诚,杨晓艺,赵文惠. 时珍国医国药. 2017(11)
[9]铁皮石斛多糖提取工艺及优化研究[J]. 黄丽,文凤娟,李桂琼,郭成鑫,熊娇,何丹,周洋帆,贺飞飞,文国松. 云南农业大学学报(自然科学). 2017(05)
[10]4种石斛的多糖对高血压大鼠降血压的影响[J]. 王再花,叶庆生,李杰,章金辉,徐晔春. 热带作物学报. 2017(09)
博士论文
[1]天然来源的糖类化合物分离分析研究[D]. 梁图.华东理工大学 2015
[2]铁皮石斛与美花石斛茎尖生长机理及其多糖累积规律研究[D]. 滕建北.成都中医药大学 2009
[3]铁皮石斛多糖成分研究[D]. 华允芬.浙江大学 2005
硕士论文
[1]广西产拳卷地钱的化学成分及活性研究[D]. 牛思琪.广西民族大学 2019
[2]重楼多糖的化学修饰及体外活性研究[D]. 蔡艳妮.陕西理工大学 2018
[3]K4多糖及其硫酸化衍生物结构和生物活性研究[D]. 邱美玲.江南大学 2018
[4]铁皮石斛多糖的提取、抗氧化活性及其多糖/介孔二氧化硅纳米粒的制备研究[D]. 陈立弟.深圳大学 2017
[5]铁皮石斛多糖提取工艺优化及其抗氧化活性研究[D]. 邱现创.山西大学 2017
[6]铁皮石斛多糖结构及其硫酸化衍生物活性研究[D]. 乐晗.遵义医学院 2017
[7]金钗石斛多糖的结构鉴定及其乙酰化和硫酸化衍生物的生物活性研究[D]. 靳灿.遵义医学院 2017
[8]灵芝孢子粉多糖的分离纯化与结构鉴定[D]. 王亚涛.上海海洋大学 2017
[9]霍山铁皮石斛多糖DOPA-1的结构特征及对HepG2细胞凋亡的影响[D]. 王琳炜.江苏大学 2017
[10]霍山石斛多糖研究[D]. 司华阳.安徽中医药大学 2017
本文编号：3373354
【文章来源】：广西民族大学广西壮族自治区
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
温度和料液比相互
20图2.7温度和时间相互作用对铁皮石斛多糖提取率的影响图2.8料液比和时间相互作用对铁皮石斛多糖提取率的影响2.5小结采用热水浸提法提取多糖，实验简单方便。不同多糖在不同浓度的醇溶液中溶解度不同，按80%的醇浓度沉淀得到部分粗多糖，若改变醇沉时乙醇浓度，可能仍会有多糖沉淀，而多糖具体含量还有待实验进一步探究。冷冻干燥得到粗多糖，提取率31.65%，高于其他品种的石斛多糖提取率；多糖含量42%，需进行纯化工作。对影响多糖得率的四种因素进行单因素实验，根据结果确定了提取温度、料液比及提取时间三种因素的水平，进而通过响应面实验探究提取率的最佳条件。利用Design-Expert软件得到提取模型，提取温度一次项、提取温度二次项、料液比一次项、料液比二次项、时间二次项、温度与料液比项极显著，时间一次项、温度时间项显著，料液比时间项不显著。根据F值可知各因素对多糖得率的影响大小顺序为：料液比>温度>时间。通过3D曲面和等高线分析验证，温度和料液比相互作用对铁皮石斛多糖的提取率影响极显著，温度和时间相互作用对多糖得率显著，而料液比和时间相互作用对多糖得率影响不显著，模拟得到最佳提取条件：提取温度70.3℃，料液比1:36.9，提取时间2.18h，此时提取率为39.51%。重复验证试验对提取条件略做改动，在70℃，料液比1:37，提取2.18小时，提取2次，三次实验多糖平均得率是39.38%，稍低于模拟所得提取率，说明该条件可用于石斛多糖提龋
20图2.7温度和时间相互作用对铁皮石斛多糖提取率的影响图2.8料液比和时间相互作用对铁皮石斛多糖提取率的影响2.5小结采用热水浸提法提取多糖，实验简单方便。不同多糖在不同浓度的醇溶液中溶解度不同，按80%的醇浓度沉淀得到部分粗多糖，若改变醇沉时乙醇浓度，可能仍会有多糖沉淀，而多糖具体含量还有待实验进一步探究。冷冻干燥得到粗多糖，提取率31.65%，高于其他品种的石斛多糖提取率；多糖含量42%，需进行纯化工作。对影响多糖得率的四种因素进行单因素实验，根据结果确定了提取温度、料液比及提取时间三种因素的水平，进而通过响应面实验探究提取率的最佳条件。利用Design-Expert软件得到提取模型，提取温度一次项、提取温度二次项、料液比一次项、料液比二次项、时间二次项、温度与料液比项极显著，时间一次项、温度时间项显著，料液比时间项不显著。根据F值可知各因素对多糖得率的影响大小顺序为：料液比>温度>时间。通过3D曲面和等高线分析验证，温度和料液比相互作用对铁皮石斛多糖的提取率影响极显著，温度和时间相互作用对多糖得率显著，而料液比和时间相互作用对多糖得率影响不显著，模拟得到最佳提取条件：提取温度70.3℃，料液比1:36.9，提取时间2.18h，此时提取率为39.51%。重复验证试验对提取条件略做改动，在70℃，料液比1:37，提取2.18小时，提取2次，三次实验多糖平均得率是39.38%，稍低于模拟所得提取率，说明该条件可用于石斛多糖提龋
【参考文献】：
期刊论文
[1]金针菇子实体多糖FVPB2对小鼠T淋巴细胞和巨噬细胞的免疫调节作用[J]. 余冬生,吴莹莹,冯婷,张劲松,张赫男,吴迪,杨焱,刘肖肖,刘振东,贾薇,汪雯翰. 菌物学报. 2019(06)
[2]假芝菌丝体多糖ARP的纯化、结构及抗氧化活性[J]. 伍燕,申利群,朱华. 食品与发酵工业. 2019(09)
[3]仙茅多糖对小鼠巨噬细胞吞噬活性的影响[J]. 杨翠萍,蔡琨,宣锦,杨娟,徐彬人,陈海宁,郭金洲. 中国民族民间医药. 2019(08)
[4]白及多糖BSP-1的分离纯化、结构表征及抗肿瘤活性研究[J]. 陈思思,吴蓓,谭婷,谢赛赛,杨世林,冯育林,温泉. 中草药. 2019(08)
[5]三叶青地上部分多糖对乳腺癌小鼠的抗肿瘤作用[J]. 郭菁菁,赵英杰,李伟,钱朝东,丁志山. 中成药. 2019(04)
[6]大蒜多糖的提取纯化及对鸡体外外周血淋巴细胞增殖的影响[J]. 王慧,胡元亮,邱树磊,陈晓兰,刘海霞,郭长明,武彩红. 黑龙江畜牧兽医. 2018(03)
[7]新疆不同产地红花多糖含量测定及抗氧化活性研究[J]. 任丽君,袁洁,姚军. 新疆医科大学学报. 2018(02)
[8]昆仑雪菊多糖预防急性及免疫性肝损伤[J]. 曾诚,杨晓艺,赵文惠. 时珍国医国药. 2017(11)
[9]铁皮石斛多糖提取工艺及优化研究[J]. 黄丽,文凤娟,李桂琼,郭成鑫,熊娇,何丹,周洋帆,贺飞飞,文国松. 云南农业大学学报(自然科学). 2017(05)
[10]4种石斛的多糖对高血压大鼠降血压的影响[J]. 王再花,叶庆生,李杰,章金辉,徐晔春. 热带作物学报. 2017(09)
博士论文
[1]天然来源的糖类化合物分离分析研究[D]. 梁图.华东理工大学 2015
[2]铁皮石斛与美花石斛茎尖生长机理及其多糖累积规律研究[D]. 滕建北.成都中医药大学 2009
[3]铁皮石斛多糖成分研究[D]. 华允芬.浙江大学 2005
硕士论文
[1]广西产拳卷地钱的化学成分及活性研究[D]. 牛思琪.广西民族大学 2019
[2]重楼多糖的化学修饰及体外活性研究[D]. 蔡艳妮.陕西理工大学 2018
[3]K4多糖及其硫酸化衍生物结构和生物活性研究[D]. 邱美玲.江南大学 2018
[4]铁皮石斛多糖的提取、抗氧化活性及其多糖/介孔二氧化硅纳米粒的制备研究[D]. 陈立弟.深圳大学 2017
[5]铁皮石斛多糖提取工艺优化及其抗氧化活性研究[D]. 邱现创.山西大学 2017
[6]铁皮石斛多糖结构及其硫酸化衍生物活性研究[D]. 乐晗.遵义医学院 2017
[7]金钗石斛多糖的结构鉴定及其乙酰化和硫酸化衍生物的生物活性研究[D]. 靳灿.遵义医学院 2017
[8]灵芝孢子粉多糖的分离纯化与结构鉴定[D]. 王亚涛.上海海洋大学 2017
[9]霍山铁皮石斛多糖DOPA-1的结构特征及对HepG2细胞凋亡的影响[D]. 王琳炜.江苏大学 2017
[10]霍山石斛多糖研究[D]. 司华阳.安徽中医药大学 2017
本文编号：3373354
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