丝蛋白纳米纤维结构调控及其对干细胞干性维持的影响

发布时间：2021-10-11 06:07

　　干细胞研究是再生医学的核心方向,如何通过生物材料的智能化设计实现干细胞行为的主动控制关系到干细胞和生物材料的未来发展。丝蛋白可被制成多种材料形式,具有可调的机械性能与可载药性,是研究干细胞分化、增殖和干性维持等细胞行为的理想备选材料。然而,丝蛋白多变的内在结构和不明确的组装机制极大限制了丝蛋白材料的制备和生物功能设计;也增加了以丝蛋白为基质整合多种影响因素,进行干细胞微环境体外构筑调控细胞行为的技术难度。为解决上述问题,本论文以课题组制备的丝蛋白纳米纤维为基础,通过物理和化学法调控其结构,深入研究丝蛋白结构和性能关系,设计具有特定结构和功能的丝蛋白材料,研究其对干细胞干性的调控行为。首先系统研究丝蛋白的结构变化对化学调控的影响规律,提出有效提高丝蛋白化学修饰性能的可行策略,加深对丝蛋白内在结构变化机制的理解。随后通过电场调控的方法制备丝蛋白凝胶,实现对囊胚腔内细胞团生长特定微环境的模拟,在不添加白血病抑制因子的情况下,实现胚胎干细胞干性的体外长效维持,并分析研究丝蛋白凝胶实现干细胞体外干性维持的内在机制。最后基于丝蛋白纳米纤维水凝胶材料对胚胎干细胞的干性维持效果,继续调节水凝胶的结构,... 

【文章来源】：苏州大学江苏省 211工程院校

【文章页数】：93 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１丝蛋白在分子运动、电荷量、亲水作用和浓度调控下的自组装过程［１２］

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ｉｔｉｖｅ?ｄｏｍａｉｎ?ｃ?ｍ?■?ｐｌａｓｍｉｄ?＾??ｕｓｅｄ?ａｓ?ｔｅｍｐｌａｔｅ?Ｈ?ｊ?ｊ??＿?１！??ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ?ｓｅｑｕｅｎｃｅ?ｆｃ．?＾??Ｃ－ｍｏｄｕｌｅ?■?＾?ｏ??ｎ?Ｉ??Ｉ?Ｉ??ｘ?ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ?＾?＾??ｉｎ?ｈｏｓｔ?＾??ｃｏｌｔ??ｅＡＤＦ４（Ｃ１６）?卜卜卜｜ｍ?｜－卜卜卜■？卜置??＾＾＾ＢｍＡＳＧＰＧＧＶＧＰＥＮＱＧＰＳＧＰＧＧＹＧＰＧＧＰ?１?ｉｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ?ｐｒｏｔｅｉｎ??图１－３以圆蛛丝蛋白（Ａｒａｎｅｕｓ?ｄｉａｄｅｍａｔｕｓ?ｆｉｂｒｏｉｎ?４，简称ＡＤＦ４）的重复单元??为模板制备重组丝蛋白：氨基酸模板经扩增、逆转录、密码子优化得到重组基因并??转移至质粒中，以大肠杆菌为宿主表达重组基因得到重组丝蛋白１＾。??Ｆｉｇ，?１－３?Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ?ｓｉｌｋ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｕｓｉｎｇ?ｔｈｅ?ｒｅｐｅｔｉｔｉｖｅ?ｃｏｒｅ?ｏｆ?Ａｒａｎｅｕｓ?ｄｉａｄｅｍａｔｕｓ??ｆｉｂｒｏｉｎ?４?（ＡＤＦ４）?ａｓ?ａ?ｔｅｍｐｌａｔｅ：?ｔｈｅ?ｔｅｍｐｌａｔｅ?ｗａｓ?ｒｅｐｅａｔｅｄ?１６?ｔｉｍｅｓ，?ｂａｃｋ?ｔｒａｎｓｌａｔｅｄ?ａｎｄ??ｃｏｄｏｎ?ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ?ｔｏ?ｇｅｎｅｒａｔｅ?ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ?ｇｅｎｅ?ａｎｄ?ｔｒａｎｓｆｅｒｒｅｄ?ｉｎｔｏ?ａ?ｐｌａｓｍｉｄ．?Ｔｈｅ?ｈｏｓｔ?Ｅ．??ｃｏｉｌ?ｗａｓ?ｔｈｅｎ?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ?ｂｙ?ｔｈｅ?ｐｌａｓｍｉｄ?ａｎｄ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ?ｔｒｉｇｇｅｒｅｄ．??５??


本文编号：3429935