荧光素衍生染料多肽复合物的合成与生物应用

发布时间：2021-10-21 21:42

　　近年来,从癌细胞的生理特性、信号转导方式以及肿瘤生长环境因素等方向进行肿瘤产生发展机制的研究,寻找新的探针作用靶点,已经成为了研究热点。在各种探针类型中,基于多肽的分子信标,即所谓的蛋白酶可激活的光学探针因其具有优异的生物相容性、自组装性与良好的化学修饰性在蛋白酶靶向药物研发领域中非常有前景。其中基质金属蛋白酶MMPs已被证实由于其能够水解细胞外基质,所以对肿瘤细胞在组织间的转移和浸润起到了重要的作用。鉴于多肽分子探针对肿瘤细胞诊疗的广泛应用前景,本论文设计合成了具有肿瘤细胞靶向功能和FRET性能的MMP-13可激活探针。基于MMP-13选择性多肽片段进行了一系列的合理的设计和优化,通过将多肽的侧链与两种能够发生FRET效应的荧光染料FL和CY7以共价连接的方式缀合,开发出了靶标与光学分子成像一体的MMP-13激活的诊疗一体化近红外荧光探针分子FL-MMP-CY7。同时也改善了FL的水溶性,利于后期的光动力治疗。通过体外的光物理性能测试,验证了我们合成的探针具有良好的FRET效果。体外酶促实验和MDA-MB细胞的共聚焦成像也进一步验证了探针分子FL-MMP-CY7可被MMP-13选择性... 

【文章来源】：大连理工大学辽宁省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
1 文献综述
    1.1 多肽荧光探针的发展
    1.2 光敏剂的发展
        1.2.1 常用的光敏剂
            1.2.2.1 基于卟啉的PS
            1.2.2.2 基于BODIPY的 PS
            1.2.2.3 基于过渡金属配合物的PS
            1.2.2.4 基于纳米粒子的PS
            1.2.2.5 光动力的局限性和发展前景
    1.3 诊疗一体化探针的发展
    1.4 论文选题意义及研究内容
2 基于基质金属蛋白酶的多肽荧光探针的制备和性能测试
    2.1 引言
    2.2 探针的合成路线
        2.2.1 荧光素FL的合成
        2.2.2 菁染料CY7 的合成
        2.2.3 MMP-13 选择性切割多肽片段的合成
        2.2.4 探针分子FL-MMP-CY7 的合成
    2.3 探针FL-MMP-CY7的性能测试
    2.4 结果与讨论
        2.4.1 探针FL-MMP-CY7 的油水分配系数的计算
        2.4.2 探针FL-MMP-CY7 的光谱性质
        2.4.3 探针FL-MMP-CY7 的体外酶促实验
        2.4.4 探针FL-MMP-CY7的DPBF测试
        2.4.5 探针FL-MMP-CY7 的细胞共聚焦荧光成像
        2.4.6 探针FL-MMP-CY7 对细胞毒性的检测
    2.5 本章小结
3 用于肿瘤光动力治疗的多肽纳米粒子的制备与性能研究
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 探针合成步骤
        3.2.2 原料和仪器
    3.3 纳米粒子的性能测试
    3.4 结果与讨论
        3.4.1 纳米粒子透射电镜图
        3.4.2 癌细胞与正常细胞共聚焦成像
        3.4.3 细胞内单线态氧检测
        3.4.4 细胞器共定位实验
        3.4.5 溶酶体破坏测定
        3.4.6 纳米粒子Nano1 对细胞毒性的检测
    3.5 本章小结
结论
参考文献
附录 A 附录内容名称
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]基于多肽的纳米药物递送系统的研究[J]. 徐柳,钱晨,朱辰奇,陈志鹏,陈瑞.  化学进展. 2018(09)
[2]MMP-2和MMP-9在食管癌中表达的研究[J]. 武志,潘晓玲,仲洁.  国际肿瘤学杂志. 2013 (09)

博士论文
[1]肿瘤诊疗一体化智能纳米探针的设计、合成及其性能研究[D]. 汪志义.兰州大学 2018



本文编号：3449765