两种D-氨基酸的酶法制备工艺研究

发布时间：2021-11-01 17:35

　　氨基酸广泛存在于自然界之中,是构成蛋白质的基本单位,也是人类摄取的重要营养素之一,有D型和L型氨基酸两种异构体,它们在生物体内发挥着不同的生理功能。D-对羟基苯甘氨酸可用于合成β-内酰胺类半合成抗生素,D-缬氨酸是一种重要的有机手性源,主要应用于手性药物、添加剂等领域。本文将探索两种D-氨基酸的酶法生产工艺,为工业化生产提供理论基础。本文首先构建两种海因消旋酶工程菌,其一为从红球菌R04中克隆得到,通过在NCBI网站GenBank中进行序列比对确定该基因为一个新基因;其次对两种D-氨基酸生产工艺进行优化,工程菌HC01发酵过程中选用玉米浆培养基培养,其表达N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶（CAB）的比活力是LB（安琪）培养基的0.6722倍,是LB（Oxide）培养基的1.1860倍,培养基成本分别降低1.33元/L和4.97元/L,D-对羟基苯甘氨酸提取过程中加入适量活性炭可去除反应液颜色,简化了提取步骤,新工艺降低了培养基成本,减少了酸用量、废水排放量等,为工业化生产提供了理论基础;在D-缬氨酸转化过程中使用上述两种海因消旋酶基因工程菌,结果表明当以DL-5’-异丙基海因作为底物时... 

【文章来源】：山西大学山西省

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

重组质粒pRSET-hyu1表达Fig.2.5RecombinantplasmidPRSET-hyu1expression

图 2.7 重组质粒 pMAL-s-hyu2 表达Fig. 2.7 Recombinant plasmid pMAL-s-hyu2 expression3)未诱导 ；2.pMAL- s/BL21(DE3)诱导 ；3.pMAL-s--s-hyu2/BL21(DE3)诱导全菌；5.pMAL-s-hyu2/BL21(D

图 2.6 重组质粒 pRSET-hyu1 不同温度表达情况xpression of recombinant plasmid PRSET-hyu1 at different temperL21(DE3)16℃表达全菌、上清、沉淀；4-6. pRSET-hyu1/BL21清、沉淀；7-9.pRSET-hyu1/BL21(DE3)37℃表达全菌、上清、

【参考文献】：
期刊论文
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[3]新型扁桃酸消旋酶的基因挖掘和性能表征[J]. 周茂志,唐存多,许建和,郁惠蕾.  生物工程学报. 2018(06)
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[10]重组大肠杆菌利用不同培养基发酵产琥珀酸的研究[J]. 华渤文,赵锦芳,王金华,肖子康,赵筱.  食品工业科技. 2013(06)

博士论文
[1]工程菌生物转化D-氨基酸及其相关酶的研究[D]. 钮利喜.山西大学 2007

硕士论文
[1]不对称转化法制备D-组氨酸和D-苯甘氨酸的工艺研究[D]. 陶影.南昌大学 2006



本文编号：3470516