表面活性素发酵条件优化及抗菌作用研究
发布时间：2022-01-17 18:07
表面活性素（Surfactin）是目前表面活性优良的生物类表面活性剂之一,且其还具有抗菌、抗病毒、抗癌、易降解、不会造成环境污染等特点。目前,Surfactin在医药、食品、农业、畜牧业、日化和石油工业等行业广泛应用,但其发酵产量低、分离难度大制约了Surfactin的工业化应用。本研究以前期获得的一株高产Surfactin的贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）HSB1为出发菌株,从Surfactin分离纯化和结构鉴定、发酵条件优化和抗菌作用等方面进行了具体研究,主要结论如下:1.采用高效液相色谱仪（Waters E2695）进行Surfactin含量检测,优化后液相条件为:色谱柱:ZORBAX SB-C18（5 um,4.6*250 mm）,柱温35℃,流动相A:纯水+0.1%三氟乙酸,流动相B:乙腈+0.1%三氟乙酸,检测波长205 nm,流速0.8 mL/min,洗脱条件:0-9 min,流动相A 40%,9-25 min,流动相A由40%降低到7%,25-30 min,流动相A由7%升高到40%。2.采用制备型高效液相色谱仪（岛津LC-...
【文章来源】：河南工业大学河南省
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Surfactin标准曲线
河南工业大学硕士学位论文182.3.2表面活性素单组分分离纯化将制备好的脂肽样品用岛津制备型HPLC进行分离，如图2-2所示分离收集了12组馏分。将12组馏分分别使用分析型HPLC进行检测，如图2-4所示2、4、6、9号组分的保留时间与标准品有很好的对应且纯度较高，峰面积纯度均在95%以上。通过与标准品的色谱图2-3对比可知1、11、12号馏分在标准品中未找到对应的保留时间，推测为Surfactin的同系物但标准品中的含量极少，峰高较低导致被忽略。图2-2贝莱斯芽孢杆菌(Bacillusvelezensis)HSB1产Surfactin制备高效液相色谱图Figure2-2PreparationofSurfactinfromBacillusvelezensisHSB1byHPLC图2-3Surfactin（Surfactin）标准样品色谱图Figure2-3Chromatogramofsurfactinstandard
河南工业大学硕士学位论文182.3.2表面活性素单组分分离纯化将制备好的脂肽样品用岛津制备型HPLC进行分离，如图2-2所示分离收集了12组馏分。将12组馏分分别使用分析型HPLC进行检测，如图2-4所示2、4、6、9号组分的保留时间与标准品有很好的对应且纯度较高，峰面积纯度均在95%以上。通过与标准品的色谱图2-3对比可知1、11、12号馏分在标准品中未找到对应的保留时间，推测为Surfactin的同系物但标准品中的含量极少，峰高较低导致被忽略。图2-2贝莱斯芽孢杆菌(Bacillusvelezensis)HSB1产Surfactin制备高效液相色谱图Figure2-2PreparationofSurfactinfromBacillusvelezensisHSB1byHPLC图2-3Surfactin（Surfactin）标准样品色谱图Figure2-3Chromatogramofsurfactinstandard
【参考文献】：
期刊论文
[1]金黄色葡萄球菌拮抗菌株的筛选鉴定及其抗菌物质分析[J]. 刘萍,王祖华,张七,史文静,杨宇昊,杨瑞先. 微生物学通报. 2020(05)
[2]番茄灰霉病高效内生拮抗细菌的筛选与定殖特性[J]. 高振峰,李娜,张晓宇,韩巨才. 河南农业科学. 2020(03)
[3]云贵川湖泊芽孢杆菌分离、鉴定及抗动物病原菌活性研究[J]. 张君利,刘超兰,郭义东,林家富. 四川动物. 2019(06)
[4]Bacillus subtilis VD18R19脂肽类产物鉴定及其对胡椒花叶病的田间生防效果[J]. 高圣风,王锋,刘爱勤,苟亚峰,孙世伟,王政,孟倩倩. 热带农业科学. 2019(10)
[5]瓦雷兹芽孢杆菌YH-20发酵液的抑菌特性初探[J]. 丁森,叶建仁. 西部林业科学. 2019(05)
[6]解淀粉芽孢杆菌G9R-3脂肽类化合物抑制香蕉枯萎病菌机理及防效评价[J]. 周维,田丹丹,杨扬,韦弟,李朝生,覃柳燕,刘挺燕,黄素梅. 西南农业学报. 2019(08)
[7]枯草芽孢杆菌诱变株产抗菌脂肽的特性[J]. 曾国洪,丛丽娜,毕楠. 大连工业大学学报. 2019(04)
[8]浅析生物表面活性剂的生产与应用[J]. 赵英. 化工管理. 2019(15)
[9]枯草菌脂肽钠的性能及其在纺织业中的应用现状[J]. 郭雨宁,周嫦娥,许长海. 纺织导报. 2019(02)
[10]表面活性素、杆菌霉素L、罗克霉素和泛革素4种脂肽类抗生素高效制备方法及其生物学活性[J]. 罗楚平,张婧,季冬淳,陈树桥,陈永兴,赵玉萍,李相前. 西南农业学报. 2018(11)
博士论文
[1]新型糖肽及脂肽类抗生素的设计、合成与抗耐药菌活性研究[D]. 管栋梁.中国科学院大学(中国科学院上海药物研究所) 2019
[2]细菌S76拮抗禾谷镰刀菌机理及小麦储藏中菌群和毒素变异研究[D]. 袁青松.华中农业大学 2018
[3]Bacillus subtilis fmbJ产生的脂肽抗微生物效果及安全性评价[D]. 黄现青.南京农业大学 2006
硕士论文
[1]脂肽化合物的分离及其抑制胡麻枯萎病病原菌的研究[D]. 孙艳新.内蒙古大学 2019
[2]产脂肽枯草芽孢杆菌的发酵优化以及在面包中的应用[D]. 张楠楠.江南大学 2017
[3]解淀粉芽孢杆菌S3-1的田间应用及表面活性素发酵工艺优化[D]. 李颂硕.上海师范大学 2017
[4]解淀粉芽孢杆菌MG-3抗菌物质的分离纯化及其应用[D]. 连燕萍.福州大学 2016
[5]饲料中添加抗菌脂肽Surfactin对断奶仔猪生长性能及血液生化指标的影响[D]. 陈旭波.集美大学 2016
[6]新型免疫佐剂—芽胞杆菌SURFACTIN激活巨噬细胞机制的研究[D]. 甘萍.华中农业大学 2015
[7]Bacillus amyloliquefaciens M1菌株生产的抗菌脂肽对耐药性海洋病原弧菌抑菌活性的研究[D]. 徐红梅.中国海洋大学 2014
[8]生物表面活性物质产生菌Bacillus sp. SAC-11发酵条件优化及所产表面活性剂的纯化[D]. 房玉玺.山东大学 2012
[9]淀粉液化芽孢杆菌ES-2抗菌脂肽生产工艺的研究[D]. 魏浩.南京农业大学 2011
[10]脂肽生物表面活性剂的制备、理化性质和抑菌活性研究[D]. 陈云瑛.中国海洋大学 2008
本文编号：3595196
【文章来源】：河南工业大学河南省
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Surfactin标准曲线
河南工业大学硕士学位论文182.3.2表面活性素单组分分离纯化将制备好的脂肽样品用岛津制备型HPLC进行分离，如图2-2所示分离收集了12组馏分。将12组馏分分别使用分析型HPLC进行检测，如图2-4所示2、4、6、9号组分的保留时间与标准品有很好的对应且纯度较高，峰面积纯度均在95%以上。通过与标准品的色谱图2-3对比可知1、11、12号馏分在标准品中未找到对应的保留时间，推测为Surfactin的同系物但标准品中的含量极少，峰高较低导致被忽略。图2-2贝莱斯芽孢杆菌(Bacillusvelezensis)HSB1产Surfactin制备高效液相色谱图Figure2-2PreparationofSurfactinfromBacillusvelezensisHSB1byHPLC图2-3Surfactin（Surfactin）标准样品色谱图Figure2-3Chromatogramofsurfactinstandard
河南工业大学硕士学位论文182.3.2表面活性素单组分分离纯化将制备好的脂肽样品用岛津制备型HPLC进行分离，如图2-2所示分离收集了12组馏分。将12组馏分分别使用分析型HPLC进行检测，如图2-4所示2、4、6、9号组分的保留时间与标准品有很好的对应且纯度较高，峰面积纯度均在95%以上。通过与标准品的色谱图2-3对比可知1、11、12号馏分在标准品中未找到对应的保留时间，推测为Surfactin的同系物但标准品中的含量极少，峰高较低导致被忽略。图2-2贝莱斯芽孢杆菌(Bacillusvelezensis)HSB1产Surfactin制备高效液相色谱图Figure2-2PreparationofSurfactinfromBacillusvelezensisHSB1byHPLC图2-3Surfactin（Surfactin）标准样品色谱图Figure2-3Chromatogramofsurfactinstandard
【参考文献】：
期刊论文
[1]金黄色葡萄球菌拮抗菌株的筛选鉴定及其抗菌物质分析[J]. 刘萍,王祖华,张七,史文静,杨宇昊,杨瑞先. 微生物学通报. 2020(05)
[2]番茄灰霉病高效内生拮抗细菌的筛选与定殖特性[J]. 高振峰,李娜,张晓宇,韩巨才. 河南农业科学. 2020(03)
[3]云贵川湖泊芽孢杆菌分离、鉴定及抗动物病原菌活性研究[J]. 张君利,刘超兰,郭义东,林家富. 四川动物. 2019(06)
[4]Bacillus subtilis VD18R19脂肽类产物鉴定及其对胡椒花叶病的田间生防效果[J]. 高圣风,王锋,刘爱勤,苟亚峰,孙世伟,王政,孟倩倩. 热带农业科学. 2019(10)
[5]瓦雷兹芽孢杆菌YH-20发酵液的抑菌特性初探[J]. 丁森,叶建仁. 西部林业科学. 2019(05)
[6]解淀粉芽孢杆菌G9R-3脂肽类化合物抑制香蕉枯萎病菌机理及防效评价[J]. 周维,田丹丹,杨扬,韦弟,李朝生,覃柳燕,刘挺燕,黄素梅. 西南农业学报. 2019(08)
[7]枯草芽孢杆菌诱变株产抗菌脂肽的特性[J]. 曾国洪,丛丽娜,毕楠. 大连工业大学学报. 2019(04)
[8]浅析生物表面活性剂的生产与应用[J]. 赵英. 化工管理. 2019(15)
[9]枯草菌脂肽钠的性能及其在纺织业中的应用现状[J]. 郭雨宁,周嫦娥,许长海. 纺织导报. 2019(02)
[10]表面活性素、杆菌霉素L、罗克霉素和泛革素4种脂肽类抗生素高效制备方法及其生物学活性[J]. 罗楚平,张婧,季冬淳,陈树桥,陈永兴,赵玉萍,李相前. 西南农业学报. 2018(11)
博士论文
[1]新型糖肽及脂肽类抗生素的设计、合成与抗耐药菌活性研究[D]. 管栋梁.中国科学院大学(中国科学院上海药物研究所) 2019
[2]细菌S76拮抗禾谷镰刀菌机理及小麦储藏中菌群和毒素变异研究[D]. 袁青松.华中农业大学 2018
[3]Bacillus subtilis fmbJ产生的脂肽抗微生物效果及安全性评价[D]. 黄现青.南京农业大学 2006
硕士论文
[1]脂肽化合物的分离及其抑制胡麻枯萎病病原菌的研究[D]. 孙艳新.内蒙古大学 2019
[2]产脂肽枯草芽孢杆菌的发酵优化以及在面包中的应用[D]. 张楠楠.江南大学 2017
[3]解淀粉芽孢杆菌S3-1的田间应用及表面活性素发酵工艺优化[D]. 李颂硕.上海师范大学 2017
[4]解淀粉芽孢杆菌MG-3抗菌物质的分离纯化及其应用[D]. 连燕萍.福州大学 2016
[5]饲料中添加抗菌脂肽Surfactin对断奶仔猪生长性能及血液生化指标的影响[D]. 陈旭波.集美大学 2016
[6]新型免疫佐剂—芽胞杆菌SURFACTIN激活巨噬细胞机制的研究[D]. 甘萍.华中农业大学 2015
[7]Bacillus amyloliquefaciens M1菌株生产的抗菌脂肽对耐药性海洋病原弧菌抑菌活性的研究[D]. 徐红梅.中国海洋大学 2014
[8]生物表面活性物质产生菌Bacillus sp. SAC-11发酵条件优化及所产表面活性剂的纯化[D]. 房玉玺.山东大学 2012
[9]淀粉液化芽孢杆菌ES-2抗菌脂肽生产工艺的研究[D]. 魏浩.南京农业大学 2011
[10]脂肽生物表面活性剂的制备、理化性质和抑菌活性研究[D]. 陈云瑛.中国海洋大学 2008
本文编号：3595196
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