无患子抑菌成分的分离纯化及其应用研究

发布时间：2022-02-20 09:32

　　无患子果皮中富含的三萜类皂苷具有优良的表面活性,以及杀菌、消炎、抗氧化、抗肿瘤等药理功效。鉴于古文记载无患子具有“浣垢去面”、“去腻”的功效,本文采用无患子果皮作为原料,以皂苷得率及对痤疮丙酸杆菌ATCC 6919（Propionibacterium acnes ATCC 6919,以下简称P.acnes ATCC 6919）的最低抑菌浓度（MIC）为评价指标,考察复合萃取剂对其进行初步纯化的效果。同时探索无患子萃取物中的抑菌活性成分,并对其抑菌机理进行初探。此外,将提取物添加至面膜基质中,以期拓展无患子的开发利用领域。首先,以皂苷得率、纯度及其对P.acnes ATCC 6919的MIC作为评价指标,系统考察了三种溶剂及四种提取工艺条件对活性成分提取效果的影响。结果表明,三种溶剂对皂苷的提取效果的影响具有显著差异（P<0.05）,其中水提皂苷得率最高（56.84%）,其次为乙醇,乙酸乙酯最低。纯度恰好表现相反,乙酸乙酯提取得到的皂苷纯度最高（83.24%）,而水提所得皂苷的纯度最差。在水提基础上,利用米曲霉发酵并进行乙酸乙酯萃取使得皂苷纯度提高了4.29%（为87.53%）,但... 

【文章来源】：江南大学江苏省211工程院校教育部直属院校

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
缩写表
1 绪论
    1.1 痤疮的简介
    1.2 无患子概述
        1.2.1 无患子简介
        1.2.2 无患子果皮的化学成分
    1.3 无患子有效成分的分离纯化
        1.3.1 溶剂萃取
        1.3.2 酶法提取
        1.3.3 超滤膜分离
        1.3.4 泡沫分离
        1.3.5 微波萃取
        1.3.6 大孔树脂分离
        1.3.7 微生物发酵
        1.3.8 制备高效液相色谱
    1.4 无患子皂苷抑菌性的研究概况
        1.4.1 抗细菌
        1.4.2 抗真菌
        1.4.3 抗植物病原菌
    1.5 无患子皂苷的开发与应用
        1.5.1 无患子产品概述
        1.5.2 面膜的简介
    1.6 研究目的及意义
    1.7 研究内容
2 实验材料与方法
    2.1 实验材料
    2.2 仪器与设备
    2.3 具有抑制痤疮丙酸杆菌的无患子果皮活性成分的分离提取
        2.3.1 无患子果皮提取物的制备
        2.3.2 无患子活性成分提取溶剂的筛选和抑菌活性的测定
        2.3.3 皂苷含量的测定
    2.4 液液萃取实验
        2.4.1 萃取剂的选择
        2.4.2 复合萃取剂比例
        2.4.3 料液比
        2.4.4 萃取时间
        2.4.5 萃取次数
        2.4.6 振荡频率
    2.5 无患子提取物的进一步分级纯化
        2.5.1 HPLC分析无患子提取物的条件
        2.5.2 半制备型HPLC纯化无患子提取物
    2.6 抑菌组分的HPLC-DAD/MS检测
    2.7 无患子提取物抑制痤疮丙酸杆菌机理的初探
        2.7.1 样品的制备
        2.7.2 微生物的活化与传代培养
        2.7.3 MIC的测定
        2.7.4 最低杀菌浓度的测定
        2.7.5 抑菌率的测定
        2.7.6 半抑菌浓度的测定
        2.7.7 核酸泄漏的测定
        2.7.8 K~+、Mg~(2+)含量测定
        2.7.9 碱性磷酸酶含量测定
        2.7.10 透射电子显微镜观察
    2.8 无患子提取物在面膜中的应用初探
        2.8.1 面膜基质的筛选与制备
        2.8.2 无患子提取物在面膜中适宜添加量的确定
        2.8.3 面膜的感官评价
        2.8.4 面膜理化指标的测定
        2.8.5 面膜的功效测评
    2.9 数据分析与统计方法
3 结果与讨论
    3.1 溶剂及提取工艺对抑制痤疮丙酸杆菌的无患子活性成分提取的影响
        3.1.1 皂苷得率及纯度
        3.1.2 MIC
    3.2 SSFW的萃取工艺优化
        3.2.1 溶剂种类
        3.2.2 料液比
        3.2.3 萃取时间
        3.2.4 萃取次数
        3.2.5 振荡频率
    3.3 EAWF的进一步分级
    3.4 分级产物的定性表征
    3.5 EAWF抑制痤疮丙酸杆菌机理的初探
        3.5.1 MIC与MBC
        3.5.2 抑菌率
        3.5.3 EC_(50)
        3.5.4 对大分子物质吸光度的影响
        3.5.5 对K~+、Mg~(2+)浓度的影响
        3.5.6 对细胞壁通透性的影响
        3.5.7 透射电子显微镜观察结果
    3.6 无患子提取物添加量对面膜特性的影响
        3.6.1 添加量对面膜pH的影响
        3.6.2 添加量对面膜粘度的影响
        3.6.3 添加量对痤疮丙酸杆菌抑制率的影响
        3.6.4 添加量对脂肪酶抑制率的影响
        3.6.5 添加无患子提取物的面膜感官评定
    3.7 面膜的感官指标
    3.8 面膜的理化指标
    3.9 面膜的稳定性
    3.10 干燥时间
    3.11 面膜的功效测评
        3.11.1 保湿率
        3.11.2 抑菌率
        3.11.3 对酪氨酸酶的抑制率
主要结论与展望
    主要结论
    展望
致谢
参考文献
附图：化合物质谱图
附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文


【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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[4]薏苡仁饮料及面膜的研究与开发[D]. 吴映梅.贵州大学 2015
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[8]驼乳面膜的研制[D]. 陈宸.内蒙古农业大学 2013
[9]无患子皂苷的发酵法纯化及应用性能研究[D]. 伍恒.江南大学 2013
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本文编号：3634761