粗壮脉纹孢菌蛋白水解酶的分离纯化、酶学性质和菌株应用
发布时间：2022-02-22 10:29
粗壮脉纹孢菌具有高产纤维素酶和较强的生产类胡萝卜素的能力,目前对其所产纤维素酶和类胡萝卜素已有相应研究,而对其所产蛋白酶却鲜有研究。本论文以粗壮脉纹孢菌为出发菌株,将其接种在豆渣上进行固态发酵,对其产蛋白酶和生产可溶性蛋白质的发酵条件进行了优化,对所产蛋白酶进行了分离纯化和鉴定,并对其酶学性质进行了探讨,最后将菌株用于固态发酵菜籽粕,探讨改善其营养品质的方法。主要研究结果如下:1、确定豆渣作为固态发酵培养基的原料,采用单因素法和响应面Box-Behnken组合设计法优化了菌株产蛋白酶和可溶性蛋白质的发酵条件。为方便实验确定最佳产酶和生产可溶性蛋白质的发酵条件如下:豆渣10 g,加水量21 mL,接种量2 mL,培养温度30℃,培养基初始pH 5.0,发酵时间72 h。最终蛋白酶酶活力为1959.82±9.54 U/g,可溶性蛋白质含量达到9.99±0.04mg/g,发现得到的蛋白酶活力和可溶性蛋白质含量与预测值相近,说明模型的拟合程度较好。2、采用硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和Sephadex G-75对粗壮脉纹孢菌蛋白酶进行分离纯化,...
【文章来源】：南昌大学江西省211工程院校
【文章页数】：92 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
酪氨酸标准曲线
13图 2.2 蛋白酶活力的测定Fig 2.2 The determination of protease activity（3）蛋白酶活力计计算在 40℃每分钟水解酪蛋白产生 1μg 酪氨酸，为 1 个蛋白酶活力单位。
图 2.3 蛋白质浓度标准曲线Fig 2.3 The standard curve of protein（4）样品测定同（3），将标准溶液换成样品，通过样品吸光度查标准曲线得到样品质含量，每个样品重复三次。（5）计算式中：C―查的标准曲线值（μg）N―稀释倍数W―样品重量（g）.2.4 酶的比活力酶的比活力不仅能衡量酶的纯度，而且也表示单位质量的蛋白质的催。酶的比活力与蛋白酶的纯度呈正相关。
【参考文献】：
期刊论文
[1]粗壮脉纹孢菌孢子中β-胡萝卜素的提取优化[J]. 杜佳,胡盛本,余诚玮,梁莎,邓泽元,李静. 食品工业. 2017(11)
[2]一种高效表达碱性蛋白酶的新型启动子的筛选及研究[J]. 陈坤,袁飞燕,柴昊男,刘焕,王兴吉,张会图,路福平. 生物技术通报. 2018(01)
[3]蜡样芽胞杆菌YSQ08碱性蛋白酶aprA基因在毕赤酵母中的表达[J]. 黄东彦,Shanti Mazu,朱辉,朱剑锋,胡文锋. 现代食品科技. 2016(12)
[4]菜籽粕发酵脱毒效果模糊评判[J]. 方洁,徐浩,魏芬,李菁楠,丁承超,刘武康,丁之恩. 中国粮油学报. 2016(03)
[5]通过粗壮脉纹孢菌发酵改善豆粕营养结构的研究[J]. 任志青,邓泽元,宋沥文,杨建远,刘蓉,范亚苇. 食品工业科技. 2016(12)
[6]蜡状芽孢杆菌产中性蛋白酶发酵条件的优化[J]. 解万翠,杨亚东,杨锡洪,吴帅,吉宏武. 食品与机械. 2016(01)
[7]米曲霉蛋白酶的分离纯化及酶学性质研究[J]. 马俊阳,诸葛斌,方慧英,宗红,孙进,龚星慧,诸葛健,楼笑笑,冯倩. 微生物学通报. 2014(01)
[8]粗壮脉纹孢菌发酵豆渣过程中营养成分的变化研究[J]. 叶俊,李静,范亚苇,杨风玲,邓泽元. 中国食品学报. 2013(12)
[9]混菌固态发酵山药皮产类胡萝卜素的工艺研究[J]. 杨婷婷,蒋海伟,贺玉珊,邓泽元,刘蓉,李静. 食品工业科技. 2014(07)
[10]脉胞菌lca-1基因调控无性产孢及类胡萝卜素的合成（英文）[J]. 何纯,孙宪昀,段碧华. Agricultural Science & Technology. 2013(01)
博士论文
[1]南极嗜冷菌Colwellia sp.NJ341产适冷蛋白酶及低温适应性的研究[D]. 王全富.中国海洋大学 2006
硕士论文
[1]猪小肠上皮细胞大豆凝集素特异性结合蛋白的分离和鉴定[D]. 沙爽.吉林农业大学 2016
[2]碱性蛋白酶的分离纯化及其酶学特性的研究[D]. 杨丽媛.东北师范大学 2015
[3]米曲霉蛋白酶的酶学性质及其应用研究[D]. 冯颖杰.江南大学 2015
[4]粗糙脉孢菌ncw1基因功能研究[D]. 陈永.天津科技大学 2015
[5]不同碳源诱导粗壮脉纹胞菌CGMCC3088产纤维素酶酶学性质的研究[D]. 刘沛毅.南昌大学 2014
[6]粗壮脉纹孢菌发酵农副产品生产类胡萝卜素的研究[D]. 杨风玲.南昌大学 2014
[7]产蛋白酶海洋菌株的选育及发酵豆粕的研究[D]. 钟泓波.华南理工大学 2014
[8]益生菌混合发酵菜籽粕及其营养特性的研究[D]. 肖萌.湖南农业大学 2014
[9]粗糙脉胞菌中两个纤维二糖脱氢酶基因的同源表达、蛋白纯化及作用机制研究[D]. 徐晨伟.南京农业大学 2014
[10]深海菌株Exiguobacterium sp.SWJS2发酵产蛋白酶、酶学性质及酶解特异性研究[D]. 雷芬芬.华南理工大学 2014
本文编号：3639270
【文章来源】：南昌大学江西省211工程院校
【文章页数】：92 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
酪氨酸标准曲线
13图 2.2 蛋白酶活力的测定Fig 2.2 The determination of protease activity（3）蛋白酶活力计计算在 40℃每分钟水解酪蛋白产生 1μg 酪氨酸，为 1 个蛋白酶活力单位。
图 2.3 蛋白质浓度标准曲线Fig 2.3 The standard curve of protein（4）样品测定同（3），将标准溶液换成样品，通过样品吸光度查标准曲线得到样品质含量，每个样品重复三次。（5）计算式中：C―查的标准曲线值（μg）N―稀释倍数W―样品重量（g）.2.4 酶的比活力酶的比活力不仅能衡量酶的纯度，而且也表示单位质量的蛋白质的催。酶的比活力与蛋白酶的纯度呈正相关。
【参考文献】：
期刊论文
[1]粗壮脉纹孢菌孢子中β-胡萝卜素的提取优化[J]. 杜佳,胡盛本,余诚玮,梁莎,邓泽元,李静. 食品工业. 2017(11)
[2]一种高效表达碱性蛋白酶的新型启动子的筛选及研究[J]. 陈坤,袁飞燕,柴昊男,刘焕,王兴吉,张会图,路福平. 生物技术通报. 2018(01)
[3]蜡样芽胞杆菌YSQ08碱性蛋白酶aprA基因在毕赤酵母中的表达[J]. 黄东彦,Shanti Mazu,朱辉,朱剑锋,胡文锋. 现代食品科技. 2016(12)
[4]菜籽粕发酵脱毒效果模糊评判[J]. 方洁,徐浩,魏芬,李菁楠,丁承超,刘武康,丁之恩. 中国粮油学报. 2016(03)
[5]通过粗壮脉纹孢菌发酵改善豆粕营养结构的研究[J]. 任志青,邓泽元,宋沥文,杨建远,刘蓉,范亚苇. 食品工业科技. 2016(12)
[6]蜡状芽孢杆菌产中性蛋白酶发酵条件的优化[J]. 解万翠,杨亚东,杨锡洪,吴帅,吉宏武. 食品与机械. 2016(01)
[7]米曲霉蛋白酶的分离纯化及酶学性质研究[J]. 马俊阳,诸葛斌,方慧英,宗红,孙进,龚星慧,诸葛健,楼笑笑,冯倩. 微生物学通报. 2014(01)
[8]粗壮脉纹孢菌发酵豆渣过程中营养成分的变化研究[J]. 叶俊,李静,范亚苇,杨风玲,邓泽元. 中国食品学报. 2013(12)
[9]混菌固态发酵山药皮产类胡萝卜素的工艺研究[J]. 杨婷婷,蒋海伟,贺玉珊,邓泽元,刘蓉,李静. 食品工业科技. 2014(07)
[10]脉胞菌lca-1基因调控无性产孢及类胡萝卜素的合成（英文）[J]. 何纯,孙宪昀,段碧华. Agricultural Science & Technology. 2013(01)
博士论文
[1]南极嗜冷菌Colwellia sp.NJ341产适冷蛋白酶及低温适应性的研究[D]. 王全富.中国海洋大学 2006
硕士论文
[1]猪小肠上皮细胞大豆凝集素特异性结合蛋白的分离和鉴定[D]. 沙爽.吉林农业大学 2016
[2]碱性蛋白酶的分离纯化及其酶学特性的研究[D]. 杨丽媛.东北师范大学 2015
[3]米曲霉蛋白酶的酶学性质及其应用研究[D]. 冯颖杰.江南大学 2015
[4]粗糙脉孢菌ncw1基因功能研究[D]. 陈永.天津科技大学 2015
[5]不同碳源诱导粗壮脉纹胞菌CGMCC3088产纤维素酶酶学性质的研究[D]. 刘沛毅.南昌大学 2014
[6]粗壮脉纹孢菌发酵农副产品生产类胡萝卜素的研究[D]. 杨风玲.南昌大学 2014
[7]产蛋白酶海洋菌株的选育及发酵豆粕的研究[D]. 钟泓波.华南理工大学 2014
[8]益生菌混合发酵菜籽粕及其营养特性的研究[D]. 肖萌.湖南农业大学 2014
[9]粗糙脉胞菌中两个纤维二糖脱氢酶基因的同源表达、蛋白纯化及作用机制研究[D]. 徐晨伟.南京农业大学 2014
[10]深海菌株Exiguobacterium sp.SWJS2发酵产蛋白酶、酶学性质及酶解特异性研究[D]. 雷芬芬.华南理工大学 2014
本文编号：3639270
本文链接：https://www.wllwen.com/projectlw/hxgylw/3639270.html
最近更新
教材专著
