蝙蝠蛾拟青霉虫草素高产菌株的选育及其培养条件优化

发布时间：2022-02-23 00:36

　　冬虫夏草（Cordyceps sinensis）作为中国传统的中药,其市场前景广阔。蝙蝠蛾拟青霉（Paecilomyces hepiali）是冬虫夏草的共生菌,其活性成分和冬虫夏草高度相似,可以作为野生冬虫夏草的替代品,在保健药品领域也有着广泛的应用,如根据蝙蝠蛾拟青霉深层发酵得到的菌丝体生产的药品金水宝颗粒,在临床上应用广泛。而虫草素是天然核苷类抗生素,已被证实是冬虫夏草活性成分之一,并且其在多种疾病的治疗中发挥着不可或缺的作用。虫草素是蝙蝠蛾拟青霉的主要活性成分,虫草素含量的提高有利于增强蝙蝠蛾拟青霉发酵菌粉的市场竞争力。本文从野生冬虫夏草菌虫复合体中分离得到了一株能够产虫草素的蝙蝠蛾拟青霉菌株,并以该菌株作为出发菌株进行诱变选育及发酵条件的优化,提高了菌丝体产量和虫草素含量。主要研究结果如下:首先,从青海玉树采集野生冬虫夏草菌虫复合体进行共生菌的分离鉴定。得到的一株蝙蝠蛾拟青霉菌株（OR-1）,对其进行形态学鉴定,包括单菌落观察、光学显微镜观察和扫描电镜（SEM）观察;生理生化鉴定以及18S rDNA分子鉴定,并构建了系统进化树。对蝙蝠蛾拟青霉OR-1的深层发酵进行实时监测,发酵... 

【文章来源】：浙江工业大学浙江省

【文章页数】：87 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
    1.1 引言
    1.2 蝙蝠蛾拟青霉简介
    1.3 虫草素的研究进展
    1.4 菌株选育
        1.4.1 60Co-γ射线诱变
        1.4.2 紫外诱变
        1.4.3 复合诱变
    1.5 发酵过程的主要影响因素
        1.5.1 碳源
        1.5.2 氮源
        1.5.3 金属离子
        1.5.4 前体物质
    1.6 本课题的选题背景与意义
        1.6.1 立题背景和意义
        1.6.2 本文主要研究内容
第二章 蝙蝠蛾拟青霉OR-1的分离、鉴定
    2.1 引言
    2.2 实验材料
        2.2.1 野生冬虫夏草的采集
        2.2.2 仪器与设备
        2.2.3 主要药品与试剂
        2.2.4 培养基及溶液的配制
    2.3 实验方法
        2.3.1 单菌落的分离
        2.3.2 培养物的菌种鉴定
        2.3.3 虫草素含量测定
        2.3.4 单菌落的深层发酵
    2.4 结论
        2.4.1 单菌落分离及观察
        2.4.2 虫草素含量的测定
        2.4.3 单菌落的深层发酵
    2.5 本章小结
第三章 蝙蝠蛾拟青霉OR-1的诱变
    3.1 引言
    3.2 实验材料
        3.2.1 出发菌株
        3.2.2 仪器与设备
        3.2.3 主要药品与试剂
        3.2.4 培养基与溶液的配制
    3.3 实验方法
        3.3.1 分析方法
        3.3.2 孢子悬液的制备
        3.3.3 ~(60) Co-γ射线诱变
        3.3.4 紫外诱变
        3.3.5 复合诱变
    3.4 结论
        3.4.1 ~(60) Co-γ辐射诱变
        3.4.2 紫外诱变
        3.4.3 复合诱变
        3.4.4 诱变菌与原始菌对比
    3.5 本章小结
第四章 蝙蝠蛾拟青霉OR-1 及其突变株ZJB18001 的培养基优化
    4.1 引言
    4.2 实验材料
        4.2.1 实验菌株
        4.2.2 仪器与设备
        4.2.3 主要药品与试剂
        4.2.4 培养基与溶液的配制
    4.3 实验方法
        4.3.1 分析方法
        4.3.2 碳源优化
        4.3.3 氮源优化
        4.3.4 金属离子添加
        4.3.5 前体物质优化
        4.3.6 四因素三水平响应面法优化培养条件
    4.4 结果与讨论
        4.4.1 碳源优化
        4.4.2 氮源优化
        4.4.3 金属离子优化
        4.4.4 前体物质优化
        4.4.5 响应面设计实验结果
    4.5 本章小结
第五章 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 展望
参考文献
致谢
作者简介
    1 作者简历
    2 攻读硕士学位期间发表的学术论文
    3 发明专利
学位论文数据集


【参考文献】：
期刊论文
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[3]戊唑醇降解菌B1的培养基优化[J]. 侯晓娟,赵巍巍,杨茜,李莎,常津毓,张浩.  吉林农业大学学报. 2019(01)
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[6]L-异亮氨酸高产菌选育及其培养基优化[J]. 王壮壮,魏佳,于海波,徐建中,张伟国.  生物技术通报. 2019(01)
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博士论文
[1]蝙蝠蛾拟青霉胞外多糖的发酵优化、结构鉴定及生物活性研究[D]. 武忠伟.南京农业大学 2014

硕士论文
[1]蛹虫草复合诱变及固态发酵条件优化[D]. 孙翠.安徽大学 2018
[2]虫草素合成相关酶基因克隆与表达[D]. 王文婷.山东师范大学 2016
[3]蝙蝠蛾拟青霉菌株发酵工艺优化、菌粉质量标准及免疫活性研究[D]. 滕伟卓.吉林大学 2015
[4]黑曲霉产β-葡萄糖苷酶优良菌株的Co～（60）辐射诱变选育及发酵特性研究[D]. 王贵娟.合肥工业大学 2007
[5]～（60）Co-γ射线对柠檬酸产生菌的诱变育种[D]. 穆晓玲.江南大学 2005



本文编号：3640507