基于球形聚电解质刷的选择性蛋白质分离的研究
发布时间：2023-03-23 03:24
基于相分离的方法,利用聚电解质分离蛋白质是一种简单,高效且具有高选择性的纯化蛋白质的方法,它具备现存的蛋白质分离方法所不具有的一些特性,如具有更加高效和更大规模的分离能力,是一种十分有潜力的新技术。当聚电解质与蛋白质发生相互作用时,由于蛋白质表面电荷的各向异性,在一定条件下聚电解质能够对目标蛋白质产生选择性吸附,实现对蛋白质的分离纯化。这种相互作用本质是静电作用,受到溶液中pH和离子强度等因素的影响,可以通过调节这些变量实现分离过程的优化。本文分别研究了单一的纳米球形聚电解质刷(SPB)与各种蛋白质之间的相互作用及含有相反电荷的两种聚电解质和蛋白质组成的三元体系之间的相互作用,并探究了pH和离子强度对相互作用的影响,验证了利用蛋白质电荷的各向异性分离蛋白质的可能,主要的研究内容如下:1.在本文中,我们证明了蛋白质在阳离子型聚(2-甲基丙烯酰氧乙基)三甲基氯化铵刷PDMC-SPB上的结合行为会受蛋白质电荷各向异性的影响。与蛋白质结合时,强阳离子SPB可以获得比弱阳离子SPB更高的结合亲和力,因此蛋白质在强阳离子SPB上的选择性吸附更强,可以获得更好的分离效率。利用浊度滴定法和等温量热滴定...
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
符号说明
第1章 绪论
1.1 蛋白质分离方法简介
1.2 利用聚电解质分离蛋白质的方法
1.2.1 聚电解质-蛋白质凝聚的成因
1.2.2 影响聚电解质-蛋白质凝聚的因素
1.2.3 利用聚电解质分离蛋白质的有关研究
1.3 利用球形纳米聚电解质刷( SPB)分离蛋白质的方法
1.3.1 SPB的制备及表征
1.3.2 SPB和蛋白质的相互作用
1.3.3 SPB在分离纯化蛋白质上的应用
1.4 蛋白质和聚电解质相互作用的表征方式
1.4.1 浊度滴定
1.4.2 动态光散射(DLS)
1.4.3 等温滴定量热法(ITC)
1.4.4 其它的表征方式
1.5 本文的创新点及研究内容
1.5.1 本文创新点
1.5.2 研究内容
第2章 利用球形聚电解质刷选择性分离等电点相近蛋白质的研究
2.1 引言
2.2 实验部分
2.2.1 实验材料和仪器
2.2.2 球形聚电解质刷的合成
2.2.3 浊度滴定
2.2.4 动态光散射(DLS)
2.2.5 蛋白质的荧光标记
2.2.6 SPB-蛋白质复合物的制备
2.2.7 紫外-可见分光光度法
2.2.8 等温量热滴定法(ITC)
2.2.9 DelPhi建模
2.3 结果与讨论
2.3.1 球形纳米聚电解质刷的合成
2.3.2 荧光标记蛋白质的标准曲线
2.3.3 BSA和BLG的分离
2.4 本章小结
第3章 利用球形聚电解质刷选择性分离分子量相近蛋白质的研究
3.1 引言
3.2 实验部分
3.2.1 实验材料和仪器
3.2.2 SPB-蛋白质复合物的制备
3.2.3 分析与测试方法
3.3 结果与讨论
3.3.1 BSA和HB的分离
3.4 本章小结
第4章 利用球形聚电解质刷选择性分离复杂蛋白质体系的研究
4.1 引言
4.2 实验部分
4.2.1 实验材料和仪器
4.2.2 SPB-蛋白质复合物的制备
4.2.3 阴离子色谱法
4.2.4 分析与测试方法
4.3 结果与讨论
4.3.1 BSA,BLG和HB的分离
4.3.2 BLG-A和BLG-B的分离
4.4 本章小结
第5章 利用聚电解质复合物分离蛋白质的研究
5.1 引言
5.2 实验部分
5.2.1 实验材料和仪器
5.2.2 三元体系中聚电解质-蛋白质凝聚物的制备
5.2.3 三元体系聚电解质-蛋白质凝聚物粒径测量
5.2.4 蛋白质的荧光标记
5.2.5 三元体系对于蛋白质的分离
5.3 结果与讨论
5.3.1 体系中两种聚电解质的比例对吸附蛋白质的影响
5.3.2 聚电解质体系在Fopt-时对蛋白质的吸附极限
5.3.3 离子强度对聚电解质体系吸附蛋白质的影响
5.3.4 pH对聚电解质体系吸附蛋白质的影响
5.3.5 利用聚电解质复合物分离纯化蛋白质
5.4 本章小结
第6章 结论与展望
6.1 全文总结
6.2 研究展望
参考文献
致谢
硕士期间论文发表情况
本文编号：3768181
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
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中文摘要
英文摘要
符号说明
第1章 绪论
1.1 蛋白质分离方法简介
1.2 利用聚电解质分离蛋白质的方法
1.2.1 聚电解质-蛋白质凝聚的成因
1.2.2 影响聚电解质-蛋白质凝聚的因素
1.2.3 利用聚电解质分离蛋白质的有关研究
1.3 利用球形纳米聚电解质刷( SPB)分离蛋白质的方法
1.3.1 SPB的制备及表征
1.3.2 SPB和蛋白质的相互作用
1.3.3 SPB在分离纯化蛋白质上的应用
1.4 蛋白质和聚电解质相互作用的表征方式
1.4.1 浊度滴定
1.4.2 动态光散射(DLS)
1.4.3 等温滴定量热法(ITC)
1.4.4 其它的表征方式
1.5 本文的创新点及研究内容
1.5.1 本文创新点
1.5.2 研究内容
第2章 利用球形聚电解质刷选择性分离等电点相近蛋白质的研究
2.1 引言
2.2 实验部分
2.2.1 实验材料和仪器
2.2.2 球形聚电解质刷的合成
2.2.3 浊度滴定
2.2.4 动态光散射(DLS)
2.2.5 蛋白质的荧光标记
2.2.6 SPB-蛋白质复合物的制备
2.2.7 紫外-可见分光光度法
2.2.8 等温量热滴定法(ITC)
2.2.9 DelPhi建模
2.3 结果与讨论
2.3.1 球形纳米聚电解质刷的合成
2.3.2 荧光标记蛋白质的标准曲线
2.3.3 BSA和BLG的分离
2.4 本章小结
第3章 利用球形聚电解质刷选择性分离分子量相近蛋白质的研究
3.1 引言
3.2 实验部分
3.2.1 实验材料和仪器
3.2.2 SPB-蛋白质复合物的制备
3.2.3 分析与测试方法
3.3 结果与讨论
3.3.1 BSA和HB的分离
3.4 本章小结
第4章 利用球形聚电解质刷选择性分离复杂蛋白质体系的研究
4.1 引言
4.2 实验部分
4.2.1 实验材料和仪器
4.2.2 SPB-蛋白质复合物的制备
4.2.3 阴离子色谱法
4.2.4 分析与测试方法
4.3 结果与讨论
4.3.1 BSA,BLG和HB的分离
4.3.2 BLG-A和BLG-B的分离
4.4 本章小结
第5章 利用聚电解质复合物分离蛋白质的研究
5.1 引言
5.2 实验部分
5.2.1 实验材料和仪器
5.2.2 三元体系中聚电解质-蛋白质凝聚物的制备
5.2.3 三元体系聚电解质-蛋白质凝聚物粒径测量
5.2.4 蛋白质的荧光标记
5.2.5 三元体系对于蛋白质的分离
5.3 结果与讨论
5.3.1 体系中两种聚电解质的比例对吸附蛋白质的影响
5.3.2 聚电解质体系在Fopt-时对蛋白质的吸附极限
5.3.3 离子强度对聚电解质体系吸附蛋白质的影响
5.3.4 pH对聚电解质体系吸附蛋白质的影响
5.3.5 利用聚电解质复合物分离纯化蛋白质
5.4 本章小结
第6章 结论与展望
6.1 全文总结
6.2 研究展望
参考文献
致谢
硕士期间论文发表情况
本文编号：3768181
本文链接：https://www.wllwen.com/projectlw/hxgylw/3768181.html
