珍珠粉水溶性成分的分离纯化及其活性研究

发布时间：2023-04-19 00:19

　　珍珠粉是一种可以延缓衰老,药用价值高应用前景广的美容养颜佳品。由于其可以促进新陈代谢,增强免疫力,延缓皮肤衰老,近年来珍珠粉的研究工作主要围绕在成分分析,对疾病的治疗以及抗疲劳抗衰老中展开。然而纳米珍珠粉由于其分离纯化条件复杂,水溶性成分提取困难往往被人们所忽视。研究表明纳米珍珠粉水溶性成分具有强抗氧化和美白活性。因此本文针对纳米珍珠粉水溶性成分,采用大孔吸附树脂分离工艺方法,动态轴向制备色谱、制备型高效液相色谱研究了纳米珍珠中可溶性成分的提取和纯化方法,主要研究内容和结果如下:(1)研究建立了纳米珍珠粉水溶性成分的大孔吸附树脂分离工艺方法。首先采用水提法从纳米珍珠粉中提取水溶性成分,以大孔树脂吸附的方法对水提液中主要组分蛋白进行了初步纯化。综合解析效率、生产条件、经济等因素筛选出提取珍珠蛋白的最佳条件:吸附树脂为AB-8,吸附时间为4h,吸附率为96.46%,解吸率为90.53%。然后通过大孔吸附树脂分离纯化珍珠蛋白后,采用HPLC法测定珍珠蛋白的分子量,得出纯化产物的分子量均在2100Kda以下。上述结果表明,大孔吸附树脂能够有效地分离纯化纳米珍珠粉水溶性成分。(2)系统研究了纳米...

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【学位级别】：硕士

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致谢
摘要
Abstract
1 绪论
    1.1 珍珠及珍珠粉
        1.1.1 研究及应用现状
        1.1.2 珍珠粉的主要成分及其与珍珠层粉的区别
    1.2 蛋白质分离纯化相关工艺的研究
        1.2.1 蛋白质的组成和作用
        1.2.2 蛋白质含量测定的方法
        1.2.3 蛋白质分离、纯化的方法
        1.2.4 珍珠可溶性蛋白分离提取研究进展
    1.3 珍珠活性肽及其美白作用
        1.3.1 活性肽的生理功能
        1.3.2 珍珠活性肽对酪氨酸酶活性的影响
    1.4 动态轴向制备色谱法
        1.4.1 动态轴向制备色谱技术简介
        1.4.2 影响动态轴向压缩色谱柱性能的因素
        1.4.3 动态轴向压缩法在物质制备中的应用
    1.5 本课题研究意义及内容
        1.5.1 本课题研究意义
        1.5.2 本课题研究内容
2 纳米珍珠粉水溶性成分的大孔吸附树脂分离工艺研究
    2.1 试剂与仪器
        2.1.1 试剂与材料
        2.1.2 仪器设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 纳米珍珠粉水溶性提取物的制备
        2.2.2 考马斯亮蓝法测定可溶性蛋白含量
        2.2.3 纳米珍珠粉水溶性蛋白的大孔吸附树脂分离与纯化
        2.2.4 HPLC法测定纳米珍珠粉水溶性蛋白的分子量范围
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 考马斯亮蓝法中牛血清蛋白含量标准曲线的绘制
        2.3.2 11种不同类型大孔树脂静态吸附性能考察
        2.3.3 D101和AB-8大孔吸附树脂动态吸附性能考察
        2.3.4 珍珠纯化蛋白的分子量测定
    2.4 本章小结
3 纳米珍珠粉水溶性蛋白的美白及抗氧化活性研究
    3.1 前言
    3.2 试剂与仪器
        3.2.1 材料与试剂
        3.2.2 实验仪器
    3.3 酪氨酸酶抑制活性研究
        3.3.1 溶液配制
        3.3.2 酶实验波长的选择
        3.3.3 酪氨酸酶酶活力测定
        3.3.4 对酪氨酸酶抑制率的测定
        3.3.5 熊果苷对酪氨酸酶抑制率曲线绘制
        3.3.6 不同提取条件对纳米珍珠粉水溶性提取物美白活性的影响
        3.3.7 纳米珍珠粉水溶性提取物及纯化蛋白的酪氨酸抑制率测定
    3.4 抗氧化活性研究
        3.4.1 样品制备
        3.4.2 纳米珍珠粉水溶性提取物及纯化蛋白对DPPH自由基的清除率的测定
        3.4.3 纳米珍珠粉水溶性提取物及纯化蛋白对超氧阴离子自由基清除率的测定
        3.4.4 纳米珍珠粉水溶性提取物及纯化蛋白对羟自由基的清除率的测定
    3.5 结果与讨论
        3.5.1 熊果苷对酪氨酸酶抑制率曲线绘制
        3.5.2 不同提取条件对纳米珍珠粉水溶性提取物美白活性的影响
            3.5.2.1 料液比对纳米珍珠粉水溶性提取物含氮量和美白活性的影响
            3.5.2.2 提取时间对水提液含氮量和美白活性的影响
            3.5.2.3 温度对水提液含氮量和美白活性的影响
        3.5.3 纳米珍珠粉水溶性提取物及纯化蛋白对酪氨酸酶的抑制作用
        3.5.4 纳米珍珠粉水溶性提取物及纯化蛋白的抗氧化活性研究
            3.5.4.1 清除DPPH自由基能力测定
            3.5.4.2 清除超氧阴离子自由基能力测定
            3.5.4.3 清除羟自由基能力测定
    3.6 本章小结
4 纳米珍珠粉美白活性成分的高效制备技术研究
    4.1 试剂与仪器
        4.1.1 实验材料与试剂
        4.1.2 常规仪器
        4.1.3 制备色谱仪
    4.2 实验方法
        4.2.1 分析型高效液相色谱分析条件
        4.2.2 动态轴向制备色谱条件
        4.2.3 制备型高效液相色谱条件
        4.2.4 活性成分的结构分析
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 珍珠粉蛋白的HPLC分析结果
        4.3.2 珍珠美白活性成分的制备工艺流程
        4.3.3 动态轴向制备色谱分离结果
        4.3.4 珍珠活性成分的制备型高效液相色谱精制分离及结构分析
    4.4 本章小结
5 研究结论与展望
参考文献
附录 攻读硕士研究生期间发表的论文



本文编号：3793333