绿豆中谷氨酸脱羧酶的性质及结构研究

发布时间：2024-12-07 01:01

　　γ-氨基丁酸,别名4-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid,GABA）,它有很多生理功能并且这些生理功能非常重要。谷氨酸脱羧酶（GAD,EC 4.1.1.15）是γ-氨基丁酸（GABA）的催化酶,可催化L-谷氨酸以产生成γ-氨基丁酸。制备GABA利用植物组织代谢GAD是一个很好的方法和途径。通过研究我们可以发现,绿豆具有较高的GAD活力。论文中的GAD是从绿豆中分离纯化得到的,主要研究的是GAD活性、GAD的分离纯化和研究温度、pH、金属离子以及试剂这几个因素对GAD的影响以及对GAD结构影响进行研究,探讨绿豆中GAD的活性,为进一步利用绿豆GAD富集产生GABA提供理论基础。在论文中,用FDNB柱前衍生化法衍生GABA,该反应使用谷氨酸脱羧酶催化L-谷氨酸脱羧生成γ-氨基丁酸的这一反应特性,检测绿豆中GAD活力。在360 nm下检测衍生物,使用HPLC Lichrospher C 18色谱柱进行分离样品,因而可以得到GABA的含量,以及可以得到绿豆组织中的GAD活力;建立了硫酸铵沉淀法、DEAE-Cellulose离子交换色谱法、葡聚糖凝胶Sephadex G-100层析法...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1GABA支路和其它代谢途径之间的关系

文献综述11图1-1GABA支路和其它代谢途径之间的关系Fig.1-1RelationshipbetweenGABAbranchesandothermetabolicpathways1.4植物中钙调素在生物体中，Ca2+是生物学功能的关键元素。Ca2+和磷酸盐复合物的形成可以形成....

图1-2技术路线

文献综述131.6研究的主要内容本论文通过构建绿豆GABA含量和GAD酶活性的检测方法，并采用硫酸铵沉淀法、离子交换色谱、葡聚糖凝胶分离等方法构建分离纯化工艺体系，进而得到酶活较高且成分单一的绿豆GAD组分；考察了不同条件对硫酸铵盐析GAD蛋白样品的沉淀效果的影响，对纯化后的绿豆....

图3-1(NH4)2SO4浓度对绿豆谷氨酸脱羧酶分离效果的影响

结果与分析223.结果与分析3.1绿豆GAD的分离纯化3.1.1（NH4）2SO4分级沉淀3.1.1.1不同（NH4）2SO4浓度对绿豆GAD酶分离效果的影响用饱和度不同的（NH4）2SO4（硫酸铵）将提取液中的谷氨酸脱羧酶沉淀，取上清液，透析后测定残留的谷氨酸脱羧酶的酶活力，测....

图3-2沉淀时间对绿豆谷氨酸脱羧酶分离效果的影响

绿豆中谷氨酸脱羧酶的性质及结构研究233.1.1.2沉淀时间对绿豆GAD酶分离效果的影响图3-2沉淀时间对绿豆谷氨酸脱羧酶分离效果的影响Figure3-2EffectofprecipitationtimeonmungbeanontheactivityofmungbeanGAD由图....

本文编号：4014539