Caspase-3酶响应型纳米载药体系设计及其用于肿瘤联合治疗研究

发布时间：2024-12-11 22:43

　　化疗、放疗及手术等传统肿瘤治疗手段由于种种缺陷,已不能满足临床需要。近年来光动力治疗(Photodynamic Therapy,PDT)、光热治疗(Photothermal Therapy,PTT)及免疫疗法(Immunotherapy)等迅速发展,尤其是基于这些方法的联合治疗已成为肿瘤治疗研究的热点。本论文从凋亡酶(Caspase enzyme)入手,基于肿瘤微环境,研究设计了caspase-3酶响应的纳米载药系统,主要研究内容及取得成果如下:1.Caspase-3酶响应的嵌合肽用于化疗/光动力联合治疗本文设计了基于肿瘤微环境中的caspase-3酶响应的嵌合肽,用于降低系统毒性的化疗/光动力联合治疗。固相合成法合成了两端具有阿霉素(doxorubicin,DOX)和光敏剂脱镁叶绿酸盐-a(pheophorbide-a,pha)的嵌合肽序列。体外的实验表明,阿霉素只有在和caspase-3酶孵育时才能被释放,嵌合肽胶束经光照后处理的细胞毒性达到了25%,与对照组有较为明显的差异。共聚焦实验和流式细胞分析结果显示实验组的嵌合肽具有最高程度的细胞凋亡比例,实验组的流式分析结果显示高达61%...

【文章页数】：86 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
缩略语表
第一章 绪论
    1.1 肿瘤及其微环境简述
        1.1.1 肿瘤简述
        1.1.2 肿瘤微环境
            1.1.2.1 微酸性
            1.1.2.2 谷胱甘肽
            1.1.2.3 酶的高表达
    1.2 肿瘤治疗手段
        1.2.1 化疗
            1.2.1.1 无机纳米颗粒解决化疗耐药性
            1.2.1.2 有机纳米颗粒解决化疗耐药性
        1.2.2 光动力治疗
        1.2.3 光热治疗
        1.2.4 免疫治疗
    1.3 联合治疗
        1.3.1 化疗/光动力联合治疗
        1.3.2 化疗/光热联合治疗
        1.3.3 光动力/光热联合治疗
    1.4 论文设计思路及意义
        1.4.1 论文设计思路
        1.4.2 论文技术路线图
第二章 caspase-3 酶响应型纳米载药体系设计及其用于乳腺癌光动力/化疗联合治疗
    2.1 前言
    2.2 实验试剂与仪器
        2.2.1 实验所用细胞株
        2.2.2 实验试剂
        2.2.3 实验仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 ph D,ph ED和 ph DD的制备
        2.3.2 phDD的材料表征
        2.3.3 体外caspase-3 酶切前后高效液相色谱(HPLC)检测
        2.3.4 蛋白印迹分析
        2.3.5 细胞毒性测试
        2.3.6 细胞Calcein AM/PI staining&Annexin V-FITC/PI流式细胞分析
        2.3.7 药代动力学,小动物成像和组织分布
        2.3.8 体内联合抗肿瘤治疗和系统毒性
    2.4 实验结果与讨论
        2.4.1 phDD的材料表征
        2.4.2 体外caspase-3 酶切前后高效液相色谱(HPLC)检测
        2.4.3 蛋白印迹分析和细胞毒性测试
        2.4.4 细胞Calcein AM/PI staining&Annexin V-FITC/PI流式细胞分析
        2.4.5 药代动力学,小动物成像和组织分布
        2.4.6 体内抗肿瘤联合治疗和系统毒性
    2.5 本章小结
第三章 caspase-3 酶响应型纳米载药体系设计及其用于乳腺癌光动力/光热联合治疗
    3.1 前言
    3.2 实验试剂与仪器
        3.2.1 实验所用细胞株
        3.2.2 实验试剂
        3.2.3 实验仪器
    3.3 实验方法
        3.3.1 PEP,PP2000和PDP的制备
        3.3.2 PDP的自组装行为和理化性质
        3.3.3 细胞内摄取和荧光淬灭
        3.3.4 细胞毒性和体外高效液相分析
        3.3.5 体外光热实验和光声成像
        3.3.6 体内荧光成像和组织分布
        3.3.7 体内光动力介导的PDP的聚集和光热成像
        3.3.8 联合治疗和系统毒性分析
        3.3.9 体内光声成像监测凋亡
    3.4 实验结果与讨论
        3.4.1 PDP的自组装行为和理化性质
        3.4.2 细胞内摄取和荧光淬灭
        3.4.3 细胞毒性和体外高效液相分析
        3.4.4 体外光热实验和光声成像
        3.4.5 体内荧光成像和组织分布
        3.4.6 体内光动力介导的PDP的聚集和光热成像
        3.4.7 联合治疗和系统毒性分析
        3.4.8 体内光声成像监测凋亡
    3.5 本章小结
第四章 全文总结及展望
    4.1 全文总结
    4.2 展望
参考文献
附录
致谢



本文编号：4016397