神经节苷脂单体制备及结构表征

发布时间：2025-01-01 05:33

　　目的:开发一种快速、稳定的离线多维色谱分离纯化方法,用于神经节苷脂的单体制备,开展神经节苷脂类物质的质谱解析规律研究,为神经节苷脂的结构解析奠定基础。方法:在单体的分离纯化方面,以实验室自主研发的X5H色谱柱,采用不同极性的溶剂进行洗脱,实现了按照唾液酸数量的不同依次分级分离的效果,最终获得了GA(去唾液酸神经节苷脂)、GM(单唾液酸神经节苷脂)、GD(双唾液酸神经节苷脂)、GT(三唾液酸神经节苷脂)、GQ(四唾液酸神经节苷脂)等一维产物。对分级分离获得的一维产物采用自制的C8HC反相色谱填料进行二维纯化,最终获得了一系列的神经节苷脂单体。在单体结构表征方面,利用神经节苷脂的对照品,总结出神经节苷脂二级质谱断裂规律,并将其应用到制备的单体化合物中开展了结构解析工作;在神经节苷脂糖链母核鉴定方面,首先通过化学降解方法去掉脂链结构获得糖链结构,而后采用酶解方式除去糖链结构中的唾液酸获得糖链母核结构,通过与不同的糖链母核对照品色谱及质谱的比对,对单唾液酸神经节苷脂的组成及含量进行深度分析。结果:采用离线二维色谱分离纯化的方法,最终获得了28个神经节苷脂单体。利用对照品总结了质谱断裂规律,并依据...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1 GM1的结构式(a),GM1的结构简式(b)及神经节苷脂的命名规则(c)

神经节苷脂的命名通常采用Svennerholm法:字母“G"代表神经节苷脂;用A、M、D、T、Q、P、H分别表示神经节苷脂中含有0～6个唾液酸;图1-1中形象的说明了神经节苷脂缩写名称中各部分的含义。神经节苷脂中神经酰胺的结构通常表示在糖链后的括号内,比如GM1(d18:1/2....

图1-2常见的神经节苷脂及其结构

图1-1GM1的结构式(a),GM1的结构简式(b)及神经节苷脂的命名规则(c)神经节苷脂属于鞘糖脂的一种,因此神经节苷脂糖链部分除上述唾液酸和寡糖数目的变化外,其母核结构也存在一定的变化和差异,表1-1为部分鞘糖脂的结构[25],这些母核结构也会组成少量的神经节苷脂。

图2-1神经节苷脂一维制备谱图

图2-1为神经节苷脂一维制备谱图,按图中所示,一共收集了14个馏分,分别标记为F1^F14,其中F1为上样流出液,体积为200mL,其余馏分为不同极性溶剂洗脱馏分,体积均为80mL。利用该方法分离神经节苷脂粗提物,一共制备3次且重复性良好。为了分析每个馏分....

图2-2不同p H值下,神经节苷脂在反相色谱柱上的保留情况

神经节苷脂在反相色谱上经常发生色谱峰形拖尾的现象,在流动相中加入缓冲盐,可屏蔽神经节苷脂中含带负电的唾液酸的影响,有利于改善峰形[77]。缓冲盐溶液的pH值是影响色谱峰形的重要因素,因此,我们探究了使用不同pH值缓冲盐作为流动相神经节苷脂样品的分离情况。图2-2为不同的pH值条件....

本文编号：4022111