玫瑰功能性成分分析及毛状根诱导研究

发布时间：2020-05-03 19:38

【摘要】：玫瑰(Rosarugosa Thunb.)不仅是观赏和经济价值俱佳的园林植物,也是我国传统的药食同源植物,其花朵可提取玫瑰精油、制作玫瑰花茶,其根可入药,药用和保健价值高,且产品越来越多样化,深受消费者的喜爱。然而,不同玫瑰制品的选材及加工方式不同,导致其功能性成分也存在很大的差异。本文以我国传统玫瑰为试材,检测比较了不同开放程度、不同干燥方式下制作的玫瑰花茶水提取液中功能性成分及其抗氧化能力的差异。建立了玫瑰根中具有艾滋病毒抗性的功能性成分-野蔷薇苷的提取与检测技术体系,并比较了其在不同种质资源中的含量差异,并初步建立了玫瑰毛状根诱导的技术体系,可作为野蔷薇苷等代谢产物的扩大反应容器,为玫瑰功能性成分的生物合成奠定了基础。主要研究结果如下:1.采用以水为溶剂的热回流方法提取了不同开放程度和不同烘干工艺制备的玫瑰花茶的水提取液,检测了提取液的抗氧化能力和活性成分。结果显示,在负离子模式下检测并通过标准品确证,分离鉴定了9种成分,分别是多酚类物质为丹皮酚和没食子酸,黄酮类物质为原花青素B3、表儿茶素、二氢槲皮素、芦丁、槲皮素-3-0-葡萄糖苷、番石榴苷和槲皮苷。玫瑰花的抗氧化能力可能与这些活性成分及其含量有关。试验结果表明,原花青素B3和表儿茶素在半开期含量最高,二氢槲皮素、没食子酸和丹皮酚在花蕾期含量最高,槲皮素-3-O-葡萄糖苷、番石榴苷、芦丁和槲皮素盛开期含量最高;真空冻干干燥制备的玫瑰花茶水提取液中没食子酸、芦丁、原花青素B3、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、表儿茶素、番石榴苷、槲皮苷的含量均高于低温烘干制备的玫瑰花茶水提取液,而二氢槲皮素与丹皮酚刚好相反;总抗氧化能力、抗超氧阴离子自由基能力和抑制羟自由基能力在花蕾期较强;低温烘干工艺制备的玫瑰花茶水提液在的总抗氧化能力、抗超氧阴离子能力、抑制羟自由基能力均显著低于真空冻干干燥工艺下的水提取液。为进一步研究玫瑰花的不同药理作用提供了理论基础。2.建立了玫瑰根中野蔷薇苷提取与含量检测技术体系,并比较了 11种蔷薇属植物根中野蔷薇苷含量的差异,结果表明,山刺玫根中野蔷薇苷含量最高,为20.233 μg/mL,狗蔷薇、伞房蔷薇中的含量也较高。珲春野生玫瑰根中野蔷薇苷含量明显高于威海野生玫瑰,说明野蔷薇苷的含量在不同蔷薇属植物根中存在明显差异。山刺玫作为我国常见的蔷薇属植物,其根系富含野蔷薇苷,具有较大的开发应用潜力。3.对无菌苗叶片采取毛状根诱导处理,通过对毛状根诱导存在影响的相关因素和条件(包括外植体、共培养时间、菌液浓度、浸润时间、培养基等)进行优化,可实现高于32%的毛状根诱导率。建立了系统的玫瑰毛状根诱导技术体系如下:以紫枝玫瑰无菌苗叶片为外植体,培养基为1/2B5,预培养2d,采用ATCC15834发根农杆菌侵染,选择菌液OD600值0.6,侵染时间15 min,共培养时间3d,最高诱导率可达到32.86%。侵染时间与共培养时间不宜过长,否则伤口处的菌株富集,菌株生长难以被抗生素控制,过度繁殖以至于将外植体吞没。毛状根PCR检测结果显示,Ri质粒的T-DNA已经整合到玫瑰毛状根基因组中,表明获得了玫瑰毛状根。毛状根作为次生代谢产物的反应容器,可为后续玫瑰产品开发提供工厂化生产基础。
【图文】：

花蕾期,开放程度,玫瑰,半开

２０逦扬州大学硕士学位论文逦逡逑２．１．２试验方法逡逑２．１．２．１样品制备逡逑取干燥的玫瑰花朵粉碎，称取５ｇ置圆底烧瓶中，加５０ｍＬ水，９９°Ｃ±１°Ｃ恒温加热，逡逑提取３０邋ｍｉｎ，趁热过滤得上清液，，冷却后转移至５０邋ｍＬ的容量瓶中，检测前过０．２２逦滤逡逑膜，分别进行液质分析和抗氧化能力测定试验。逡逑

总离子流,花茶,功能性成分,花蕾期

逦方学敏玫瑰功能性成分分析及毛状根诱导研宄逦２５逡逑图２－２不同开放程度的玫瑰花水提取液的总离子流图逡逑Ａ．花蕾期；Ｂ．初开期；Ｃ．半开期；Ｄ．盛开期逡逑Ｆｉｇ．２－２邋Ｔｏｔａｌ邋ｉｏｎ邋ｆｌｏｗ邋ｄｉａｇｒａｍ邋ｏｆ邋ｗａｔｅｒ邋ｅｘｔｒａｃｔ邋ｏｆ邋ｒｏｓｅ邋ｉｎ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｏｐｅｎｉｎｇ邋ｓｔａｇｅｓ逡逑ｂｕｄｄｉｎｇ邋ｓｔａｇｅ；邋Ｂ．邋ｅａｒｌｙ邋ｏｐｅｎｉｎｇ邋ｓｔａｇｅ；邋Ｃ．邋ｈａｌｆ－ｏｐｅｎｉｎｇ邋ｓｔａｇｅ；邋Ｄ．邋ｆｕｌｌ邋ｏｐｅｎｉｎｇ邋ｓｔａｇｅ逡逑
【学位授予单位】：扬州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：TS207.3

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