香菇柄多肽的制备、分离及其生物活性研究

发布时间：2020-07-09 14:42

【摘要】：香菇是世界上十分重要的一种食用菌资源,我国是世界上最大的香菇生产和出口的国家。香菇中含有蛋白质、氨基酸、膳食纤维、维生素以及人体所需的其他营养物质,并具有重要的保健作用。香菇柄占香菇重量的30%,由于香菇柄中含有大量的膳食纤维导致了香菇的口感粗糙并难以咀嚼,以及在加工过程中会影响香菇制品的质量,每年都会有大量的香菇柄被当做废弃物处理掉。所以,为了更加充分的利用香菇资源,对香菇柄中的多肽进行研究,开发出更多的香菇产品具有重要的意义,一方面,可以满足大众对营养又健康食品的需求,另一方面,也提高了对香菇的利用率和经济效益。本文以香菇柄为实验原料,对香菇柄中的蛋白质进行提取、酶解,制备出香菇柄多肽,以及从中分离纯化得到不同分子质量的多肽,最后将分离纯化的多肽组分进行抗氧化和抗菌活性研究。主要的研究结论如下:1.选择超声波法对香菇柄中的蛋白质进行提取,研究不同条件下超声波提取对蛋白提取率的影响。依据实验结果可得到最佳工艺条件为:超声提取的功率100W,温度50℃,pH9.0,料液比1:25,提取时间1.5h,提取2次,最终测得提取率达到17.8%。2.从5种蛋白酶中筛选出中性蛋白酶,作为香菇柄蛋白提取的最佳酶进行酶解实验,以香菇柄多肽的得率为评价指标,实验结果表明,酶解最佳条件:pH6.0,温度55℃,酶用量为4000U/g,时间为3h,测得多肽得率达到19.98%。3.用超滤膜分离香菇柄多肽,获得香菇柄多肽的四个组分,分别是组分Ⅰ(10KDa)、组分Ⅱ(5kDa-10KDa)、组分Ⅲ(1KDa-5kDa)和组分Ⅳ(1KDa)。4.利用香菇柄多肽四个不同组分对·OH自由基、DPPH自由基的清除力及还原力进行测定,结果表明香菇柄多肽四个组分都有较强的自由基清除作用,说明其属于抗氧化活性肽。但不同分子量肽的抗氧化能力不同,其抗氧化活性与分子量有关。其中分子量小于1KDa和5kDa-10KDa之间的多肽抗氧化活性更强。5.香菇柄多肽四个组分抗菌能力测定,结果表明香菇多肽四个组分对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌及沙门氏菌4种细菌都具有抑菌作用,抑制作用最强的是对沙门氏菌,其次是对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,而抑制作用最弱的是对枯草芽孢杆菌。对青霉菌和黄曲霉无抑制作用。
【学位授予单位】：西北大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：TS201.2
【图文】：

曲线,曲线,蛋白质测定,蛋白提取率

L934），见下表 2-1。表 2-1 香菇柄蛋白提取率正交试验因素水平表ab.2-1 Lentinus edodes stalk protein extraction rate screening test factor le平提取时间 pH 料液比提取次数1 0.5 7.0 1:20 12 1.0 8.0 1:25 23 1.5 9.0 1:30 3分析到标准曲线1 可得到回归方程:OD595nm=2.9155x+0.0047（R2=0.998）。由此 0.998，线性良好，曲线可以作为蛋白质测定的标准曲线。

蛋白提取率,方法,蛋白质,细胞破壁

图 2-2 不同提取方法对香菇柄蛋白提取率的影响g.2-2 Effects of extraction method on extraction rate of lentinus edodes sta2 可以看出，将香菇柄利用传统的热回流提取法提取，其提取率波法提取，蛋白质的提取率则可提高到 10.53％。超声波法利用间内使香菇细胞破壁，使蛋白质更好的提取出来，蛋白质的提提高达 50％以上，而且超声波提取比传统的方法操作简单，提大程度的节约了生产成本。提取香菇柄蛋白的单因素实验结果香菇柄蛋白提取率的影响3 所示，香菇柄蛋白的提取率受 pH 影响很大，开始时随着 pH 升高，当 pH=9.0 时，香菇柄蛋白的提取率达到最高值，而当呈下降趋势。这是因为蛋白质在碱性溶液中易发生酸式水解，

蛋白提取率,提取率,香菇,提取时间

图 2-3 pH 对香菇柄蛋白提取率的影响Fig.2-3 Effect of pH on extraction rate of lentinus edodes stalk protein时间对香菇柄蛋白提取率的影响4 所示，利用超声波提取香菇柄蛋白时，其提取率受超声提时间的推移，蛋白的提取率持续增高，在 0.5～1h 内香菇蛋白提提取时间到 1.5h 后，提取率增加的幅度变小。原因是超声波提完全破壁，蛋白质溶出率较高，随着时间的延长，溶解度达溶出逐渐减少，提取率增加的幅度逐渐降低。为了防止时间过虑到成本问题，本实验以提取时间为 1.5h 作为香菇蛋白提取最

【相似文献】