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发酵乳ACE抑制性生物活性肽降低高血压的体内外评价

发布时间:2020-08-08 05:49
【摘要】:食物被认为是人体的能量来源。动物或植物来源的食物均含有一定量的对人体有益的生物活性物质。患有血管疾病的人对植物来源的一些活性肽产生的反应与对动物来源活性肽产生的反应相同。这些活性肽可以通过应用不同的技术从食物中获得,如通过开发水解酶,微生物酶或蛋白酶。最近,科学家们正试图利用食物中的生物活性肽来消除或减少高血压等心血管疾病给人体带来的负担。已经证明活性肽能够缓解高血压和抑制ACE,因为ACE被认为是高血压和其他心血管疾病的主要致病因子。这项研究的主要目的是,通过优化发酵时间对发酵水牛奶和发酵羊奶产品进行体外和体内评估,并在在血清蛋白水平的基础上评估新的ACE抑制肽。由于山羊和水牛奶的优质蛋白质组成和在世界上的广泛分布,因此被设计为本研究的对象。在山羊奶和水牛奶脱脂和冻干后,乳蛋白作为更深入研究对象。在通过进行血液化学测试评估水牛的健康状况后,基于血清蛋白水平选择四只奶牛幼奶牛(22,26,30和34个月)用于进一步分析,并用它们所产奶进行LC发酵。对于山羊奶,乳蛋白通过优化孵育时间至8,16,24和36小时与LH进行发酵。1-D-22作为水牛组的空白对照,比较ACE抑制趋势,而S-8则用作山羊组的空白对照。将水牛脱脂乳与LC共培养24小时后,通过使用截留分子量10000 Da(PM-10)的超滤膜纯化样品肽。2-通过应用nin-hydrin反应和SDS-PAGE确定蛋白质水解情况。ACE抑制试验的结果表明34个月大的动物乳汁(D-34)在体外具有出更高的ACE抑制活性。另一方面,通过使用分子量截留量10000Da(PM-10)的超滤膜和ultracel 3K膜从发酵样品中纯化得到ACE抑制肽。通过nin-hydrin反应和 SDS-PAGE,3-发现孵育时间24小时的样品与其他样品相比水解效果最好。ACE抑制试验进一步验证了 S-24在体外抑制ACE的真实性。4-此外,Q exactive Hybrid Quadrapole-Orbitra质谱用于确定两组动物中ACE抑制肽的分子结构和氨基酸序列。肽链序列通过MaxQuant数据库的鉴定。最后,5-在D-34中鉴定出具有更高浓度的脯氨酸,赖氨酸和芳香族氨基酸的肽。高浓度的疏水脂肪族氨基酸PIN-94和PIN-332的存在表明D-34在发酵的水牛乳蛋白样品中作为ACE抑制剂是有效的。而对于S-24,含有功能性氨 基 酸 结 构 的 VLPVPQKAVPQ,VLPVPQKVVPQ 和TQTPVVVPPFLQPEIMGVPKVKE中的三种肽基于强度,大小和较高浓度的疏水性氨基酸被认为具有最高的ACE抑制活性。6-在SHR中进行体内分析,以应用遥测方法检查那些丰富肽的作用。对于D-34,在12-14小时后记录到收缩压降低,14-16小时后的记录到舒张压降低。对于S-24,在10-12和8-10小时后在分别观察到收缩压和舒张压降低。根据观察结果确定,具有功能性氨基酸的小肽可用作功能性食品的一部分以抑制ACE,并可用作降低血压的药物。这样,发酵乳蛋白可以作为具有健康促进作用的高血压患者的营养保健品。以这种实惠价格生产出的功能性食品,可以为高血压和心血管患者的生活带来更好的变化。
【学位授予单位】:北京林业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:TS201.4

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本文编号:2785146

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