大豆寡肽（QRPR、HCQRPR）对Hep G2细胞凋亡的作用及机制的研究
发布时间：2021-05-11 17:17
作为食源性活性肽,大豆肽具有各种功能活性,例如抗氧化,降血压和抗炎。食源性活性肽在满足癌症患者的身体功能和营养需求的同时干预癌细胞生长增殖。原发性肝癌是最常见的恶性肿瘤之一,最常见的类型是肝细胞癌（HCC）,目前关于癌症患者食用食源性活性肽的研究报道尚少。本文以免疫活性大豆寡肽QRPR（Gln-Arg-Pro-Arg）、HCQRPR（His-Cys-Gln-Arg-Pro-Arg）为研究对象,选用Hep G2人肝癌细胞为模型细胞,从细胞凋亡角度出发,从分子水平探讨大豆寡肽（QRPR、HCQRPR）抑制Hep G2细胞增殖的机制;并从结构与功效的关系入手,探索大豆寡肽（QRPR、HCQRPR）在Hep G2细胞增殖过程中发挥的作用。本论文主要研究内容与结果如下:（1）进行大豆寡肽（QRPR、HCQRPR）对Hep G2细胞活力影响的评价,选用Hep G2细胞作为模型细胞。MTS试验结果表明大豆寡肽（QRPR、HCQRPR）对Hep G2细胞增殖有抑制作用,在相同处理浓度和时间条件下,大豆寡肽QRPR、HCQRPR联合处理Hep G2细胞比两者单独处理的抑制率高,可显著抑制Hep G2细胞...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：90 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩写词表
第一章 绪论
1.1 大豆蛋白和大豆肽的研究进展
1.1.1 大豆蛋白概况
1.1.2 大豆肽简介
1.1.3 大豆肽与免疫活性
1.1.4 大豆肽营养价值
1.2 细胞凋亡研究概况
1.2.1 细胞凋亡的概念及过程
1.2.2 细胞凋亡的信号传导
1.2.3 细胞凋亡的体外研究方法
1.2.4 多肽物质和肿瘤细胞凋亡的研究进展
1.3 TNF-α通路
1.4 蛋白质的结构鉴定
1.5 本论文的研究内容及创新点
1.5.1 研究内容
1.5.2 本研究的总体技术路线
1.5.3 本研究的创新点
1.6 本论文的研究意义
第二章 大豆寡肽对Hep G2 细胞增殖的影响
2.1 引言
2.2 材料与设备
2.2.1 培养细胞系
2.2.2 仪器与设备
2.2.3 材料与试剂
2.3 试验方法
2.3.1 细胞培养
2.3.2 细胞活力检测
2.3.3 细胞的形态观察
2.3.4 细胞周期检测
2.3.5 实时荧光定量PCR检测PTEN基因的表达水平
2.3.6 数据处理与分析
2.4 结果与分析
2.4.1 大豆寡肽QRPR和 HCQRPR对 Hep G2 细胞活力的影响
2.4.2 大豆寡肽QRPR和 HCQRPR对 Hep G2 细胞形态的影响
2.4.3 大豆寡肽QRPR和 HCQRPR对 Hep G2 细胞周期的影响
2.4.4 PTEN的 mRNA水平变化
2.5 讨论
2.6 小结
第三章 大豆寡肽诱导Hep G2 细胞凋亡的研究
3.1 引言
3.2 材料与设备
3.2.1 培养细胞系
3.2.2 仪器与设备
3.2.3 材料与试剂
3.3 试验方法
3.3.1 通过透射电子显微镜观察细胞的超微结构变化
3.3.2 Annexin V-FITC/PI双染色凋亡测定
3.3.3 酶联免疫吸附试验测定肿瘤坏死因子TNF-α
3.3.4 实时荧光定量PCR检测caspase-8和caspase-3 的表达水平
3.3.5 Western-blot检测caspase-8和caspase-3 的表达水平
3.3.6 数据处理与分析
3.4 结果与分析
3.4.1 大豆寡肽QRPR和 HCQRPR对细胞超微结构的影响
3.4.2 大豆寡肽QRPR和 HCQRPR诱导细胞凋亡
3.4.3 TNF-α分泌水平的变化
3.4.4 Caspase-8的mRNA和蛋白水平变化
3.4.5 Caspase-3的mRNA和蛋白水平变化
3.5 讨论
3.6 小结
第四章 大豆寡肽构效关系的预测
4.1 引言
4.2 材料与设备
4.2.1 仪器与设备
4.2.2 材料与试剂
4.3 试验方法
4.3.1 圆二色谱
4.3.2 傅里叶变换红外扫描光谱
4.3.3 等电点测定
4.3.4 结构预测
4.3.5 数据处理与分析
4.4 结果与分析
4.4.1 大豆寡肽的结构分析
4.4.2 大豆寡肽的官能团分析
4.4.3 大豆寡肽的等电点
4.4.4 大豆寡肽的结构预测
4.4.5 大豆寡肽的等电点预测
4.4.6 大豆寡肽的亲疏水性预测
4.5 讨论
4.6 小结
第五章 结论与展望
5.1 结论
5.2 展望
参考文献
导师简介
作者简介及科研成果
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]L-左旋肌肽诱导人肾癌Caki-2细胞凋亡的体外研究[J]. 薛庆,王佳,倪建鑫,李纪君,秦卫军,袁建林. 现代生物医学进展. 2018(04)
[2]豆类蛋白和谷物蛋白的功能性对比[J]. 魏倩,张莹莹,阎欣,郭兴凤. 粮食加工. 2018(01)
[3]大豆分离蛋白的功能特性及应用[J]. 冯建岭,彭云婷,李迎秋. 粮食与食品工业. 2017(06)
[4]马来酸酐酰化改性对大豆分离蛋白功能性质的影响[J]. 由耀辉,陈利维,项能双,熊林颖,郑小刚. 中国油脂. 2017(04)
[5]大豆分离蛋白在食品中的应用与前景[J]. 李昂,张华江,迟玉杰,肖冰,饶越,鲍慧娴. 食品研究与开发. 2016(12)
[6]纳豆脂肽诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的机制研究[J]. 刘瑞雪,安秀峰,冯莉,李勇超,张波. 癌变·畸变·突变. 2015(06)
[7]细胞凋亡途径及其机制[J]. 李敏,林俊. 国际妇产科学杂志. 2014(02)
[8]大豆肽的制备、提取与结构鉴定研究进展[J]. 富校轶,高永欣,张佰荣,孙茂成,王舒然. 吉林医药学院学报. 2014(01)
[9]TNF-α介导的NF-κB信号通路在类风湿性关节炎血管形成中的作用[J]. 石慧,王丹彤,乌日嘎,李鸿斌. 医学综述. 2012(15)
[10]抗肿瘤活性抗菌肽的研究进展[J]. 孟硕,王凤山. 中国生化药物杂志. 2011(03)
博士论文
[1]人参皂苷协同抑制HEK-293细胞氧化应激损伤及机制研究[D]. 刘迪.吉林大学 2016
[2]草鱼蛋白源抗疲劳生物活性肽的制备分离及鉴定技术研究[D]. 任娇艳.华南理工大学 2008
硕士论文
[1]rBTI上调PTEN表达抑制Hep G2细胞增殖的研究[D]. 任荣.山西大学 2016
[2]抗菌肽的构效关系与活性机理的研究[D]. 谭娟娟.吉林大学 2012
[3]鹰嘴豆肽生物活性及构效关系解析[D]. 高捷.天津大学 2012
[4]液态发酵豆粕制备大豆肽饮料的研究[D]. 秦思思.山东轻工业学院 2011
本文编号：3181797
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：90 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩写词表
第一章 绪论
1.1 大豆蛋白和大豆肽的研究进展
1.1.1 大豆蛋白概况
1.1.2 大豆肽简介
1.1.3 大豆肽与免疫活性
1.1.4 大豆肽营养价值
1.2 细胞凋亡研究概况
1.2.1 细胞凋亡的概念及过程
1.2.2 细胞凋亡的信号传导
1.2.3 细胞凋亡的体外研究方法
1.2.4 多肽物质和肿瘤细胞凋亡的研究进展
1.3 TNF-α通路
1.4 蛋白质的结构鉴定
1.5 本论文的研究内容及创新点
1.5.1 研究内容
1.5.2 本研究的总体技术路线
1.5.3 本研究的创新点
1.6 本论文的研究意义
第二章 大豆寡肽对Hep G2 细胞增殖的影响
2.1 引言
2.2 材料与设备
2.2.1 培养细胞系
2.2.2 仪器与设备
2.2.3 材料与试剂
2.3 试验方法
2.3.1 细胞培养
2.3.2 细胞活力检测
2.3.3 细胞的形态观察
2.3.4 细胞周期检测
2.3.5 实时荧光定量PCR检测PTEN基因的表达水平
2.3.6 数据处理与分析
2.4 结果与分析
2.4.1 大豆寡肽QRPR和 HCQRPR对 Hep G2 细胞活力的影响
2.4.2 大豆寡肽QRPR和 HCQRPR对 Hep G2 细胞形态的影响
2.4.3 大豆寡肽QRPR和 HCQRPR对 Hep G2 细胞周期的影响
2.4.4 PTEN的 mRNA水平变化
2.5 讨论
2.6 小结
第三章 大豆寡肽诱导Hep G2 细胞凋亡的研究
3.1 引言
3.2 材料与设备
3.2.1 培养细胞系
3.2.2 仪器与设备
3.2.3 材料与试剂
3.3 试验方法
3.3.1 通过透射电子显微镜观察细胞的超微结构变化
3.3.2 Annexin V-FITC/PI双染色凋亡测定
3.3.3 酶联免疫吸附试验测定肿瘤坏死因子TNF-α
3.3.4 实时荧光定量PCR检测caspase-8和caspase-3 的表达水平
3.3.5 Western-blot检测caspase-8和caspase-3 的表达水平
3.3.6 数据处理与分析
3.4 结果与分析
3.4.1 大豆寡肽QRPR和 HCQRPR对细胞超微结构的影响
3.4.2 大豆寡肽QRPR和 HCQRPR诱导细胞凋亡
3.4.3 TNF-α分泌水平的变化
3.4.4 Caspase-8的mRNA和蛋白水平变化
3.4.5 Caspase-3的mRNA和蛋白水平变化
3.5 讨论
3.6 小结
第四章 大豆寡肽构效关系的预测
4.1 引言
4.2 材料与设备
4.2.1 仪器与设备
4.2.2 材料与试剂
4.3 试验方法
4.3.1 圆二色谱
4.3.2 傅里叶变换红外扫描光谱
4.3.3 等电点测定
4.3.4 结构预测
4.3.5 数据处理与分析
4.4 结果与分析
4.4.1 大豆寡肽的结构分析
4.4.2 大豆寡肽的官能团分析
4.4.3 大豆寡肽的等电点
4.4.4 大豆寡肽的结构预测
4.4.5 大豆寡肽的等电点预测
4.4.6 大豆寡肽的亲疏水性预测
4.5 讨论
4.6 小结
第五章 结论与展望
5.1 结论
5.2 展望
参考文献
导师简介
作者简介及科研成果
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]L-左旋肌肽诱导人肾癌Caki-2细胞凋亡的体外研究[J]. 薛庆,王佳,倪建鑫,李纪君,秦卫军,袁建林. 现代生物医学进展. 2018(04)
[2]豆类蛋白和谷物蛋白的功能性对比[J]. 魏倩,张莹莹,阎欣,郭兴凤. 粮食加工. 2018(01)
[3]大豆分离蛋白的功能特性及应用[J]. 冯建岭,彭云婷,李迎秋. 粮食与食品工业. 2017(06)
[4]马来酸酐酰化改性对大豆分离蛋白功能性质的影响[J]. 由耀辉,陈利维,项能双,熊林颖,郑小刚. 中国油脂. 2017(04)
[5]大豆分离蛋白在食品中的应用与前景[J]. 李昂,张华江,迟玉杰,肖冰,饶越,鲍慧娴. 食品研究与开发. 2016(12)
[6]纳豆脂肽诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的机制研究[J]. 刘瑞雪,安秀峰,冯莉,李勇超,张波. 癌变·畸变·突变. 2015(06)
[7]细胞凋亡途径及其机制[J]. 李敏,林俊. 国际妇产科学杂志. 2014(02)
[8]大豆肽的制备、提取与结构鉴定研究进展[J]. 富校轶,高永欣,张佰荣,孙茂成,王舒然. 吉林医药学院学报. 2014(01)
[9]TNF-α介导的NF-κB信号通路在类风湿性关节炎血管形成中的作用[J]. 石慧,王丹彤,乌日嘎,李鸿斌. 医学综述. 2012(15)
[10]抗肿瘤活性抗菌肽的研究进展[J]. 孟硕,王凤山. 中国生化药物杂志. 2011(03)
博士论文
[1]人参皂苷协同抑制HEK-293细胞氧化应激损伤及机制研究[D]. 刘迪.吉林大学 2016
[2]草鱼蛋白源抗疲劳生物活性肽的制备分离及鉴定技术研究[D]. 任娇艳.华南理工大学 2008
硕士论文
[1]rBTI上调PTEN表达抑制Hep G2细胞增殖的研究[D]. 任荣.山西大学 2016
[2]抗菌肽的构效关系与活性机理的研究[D]. 谭娟娟.吉林大学 2012
[3]鹰嘴豆肽生物活性及构效关系解析[D]. 高捷.天津大学 2012
[4]液态发酵豆粕制备大豆肽饮料的研究[D]. 秦思思.山东轻工业学院 2011
本文编号：3181797
本文链接：https://www.wllwen.com/projectlw/qgylw/3181797.html
