Fe 3 O 4 @Cu纳米模拟酶的制备及在四环素检测中的应用
发布时间：2021-05-20 00:04
四环素作为目前可用的低廉广谱抗生素种类之一,在人类疾病治疗、畜牧生产和水产养殖中广泛用于细菌、原虫和真菌感染的治疗,具有重要的使用价值。由于四环素预防治疗疾病的效果明显,在使用过程中常出现滥用情况,导致动物源食品中存在一定的四环素残留,而人类长期接触低水平的抗生素可能会引起过敏性反应、对肝脏和肠胃造成伤害,甚至导致潜在耐药菌的产生。因此,开发具有高选择性、高灵敏度的四环素检测方法已成为四环素残留检测领域的研究热点。相比于传统方法的高成本、操作复杂、仪器昂贵等弊端,将纳米模拟酶信号放大技术、核酸适配体特异性识别作用与比色可视化传感技术相结合的生物传感器不仅具有较高的灵敏度、较强的特异性,而且操作简单、耗时短、样品消耗小、分析成本低,因而受到了广泛的研究和应用。因此,本文利用溶剂热法合成了四氧化三铁纳米模拟酶,利用氧化还原法在四氧化三铁表面包裹铜合成核壳型纳米材料Fe3O4@Cu,并将Fe3O4@Cu纳米模拟酶与核酸适配体相结合,开发了两种选择性好、灵敏度高、低成本、简单快速的比色传感器,用于四环素残留...
【文章来源】：西华大学四川省
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 绪论
1.1 四环素概况
1.1.1 四环素简介
1.1.2 食品中四环素限定标准
1.1.3 国内外食品中四环素残留检测现状
1.2 纳米材料模拟酶
1.2.1 纳米模拟酶简介
1.2.2 纳米模拟酶研究进展
1.2.3 影响纳米模拟酶活性的因素
1.2.4 四氧化三铁纳米酶
1.2.5 四氧化三铁复合纳米酶
1.3 核酸适配体
1.3.1 核酸适配体简介
1.3.2 核酸适配体的优势
1.4 立题意义及研究内容
第二章 纳米材料的制备和表征
2.1 引言
2.2 实验材料
2.3.1 实验试剂及制备方法
2.3.2 实验仪器
2.3 实验方法
2.3.1 Fe_3O_4纳米材料的制备
2.3.2 Fe_3O_4@Cu核壳型纳米材料制备
2.3.3 纳米模拟酶动力学分析
2.3.4 酶促反应底物浓度选择
2.3.5 纳米酶活性稳定性测定
2.4 结果与讨论
2.4.1 纳米材料表征
2.4.2 酶促反应动力学
2.4.3 最佳底物浓度的确定
2.4.4 核壳型纳米材料酶活稳定性
2.5 小结
第三章 基于纳米模拟酶与适配体“turn off”型比色传感器检测体系的建立
3.1 引言
3.2 实验材料
3.2.1 实验试剂及制备方法
3.2.2 实验仪器
3.3 实验方法
3.3.1 Fe_3O_4@Cu纳米模拟酶的合成
3.3.2 检测体系操作流程
3.3.3 最佳封闭剂浓度的选择
3.3.4 最佳cDNA-1浓度选择
3.3.5 最佳Aptamer浓度选择
3.3.6 最佳cDNA-2浓度选择
3.3.7 标准曲线测定
3.3.8 方法特异性研究
3.3.9 加标回收率研究
3.4 结果与讨论
3.4.1 方法原理
3.4.2 最佳封闭剂浓度的确定
3.4.3 最佳cDNA-1浓度的确定
3.4.4 最佳Aptamer浓度的确定
3.4.5 最佳cDNA-2浓度的确定
3.4.6 标准曲线获得
3.4.7 检测体系特异性
3.4.8 牛奶样品中的加标回收
3.5 小结
第四章 基于纳米模拟酶与适配体“turn on”型比色传感器检测体系的建立
4.1 引言
4.2 实验材料
4.2.1 实验试剂及制备方法
4.2.2 实验仪器
4.3 实验方法
4.3.1 Fe_3O_4@Cu纳米模拟酶的合成
4.3.2 检测体系操作流程
4.3.3 琼脂糖电泳实验
4.3.4 最佳cDNA-1浓度选择
4.3.5 标准曲线测定
4.3.6 方法特异性研究
4.4 结果与讨论
4.4.1 方法原理
4.4.2 杂交反应可行性验证
4.4.3 最佳cDNA-1浓度的确定
4.4.4 标准曲线获得
4.4.5 检测体系特异性
4.5 小结
结论
参考文献
攻读硕士学位期间发表论文及科研结果
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]高效液相色谱法在药残测定中的研究进展[J]. 贾书芬,梁存军,耿晓修,黎晓敏. 畜禽业. 2006(10)
博士论文
[1]基于核酸适配体传感器的蜂蜜中四环素残留快速检测方法研究[D]. 王赛.北京化工大学 2017
硕士论文
[1]基于多层纳米核-壳结构复合材料模拟酶的制备及其应用研究[D]. 黄飞.武汉工程大学 2018
[2]基于氧化石墨烯—适配体传感检测食品中四环素残留的研究[D]. 唐亚利.北京化工大学 2017
[3]核酸适配体技术应用于四环素类抗生素的快速检测新方法研究[D]. 罗艳芳.上海交通大学 2014
本文编号：3196687
【文章来源】：西华大学四川省
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 绪论
1.1 四环素概况
1.1.1 四环素简介
1.1.2 食品中四环素限定标准
1.1.3 国内外食品中四环素残留检测现状
1.2 纳米材料模拟酶
1.2.1 纳米模拟酶简介
1.2.2 纳米模拟酶研究进展
1.2.3 影响纳米模拟酶活性的因素
1.2.4 四氧化三铁纳米酶
1.2.5 四氧化三铁复合纳米酶
1.3 核酸适配体
1.3.1 核酸适配体简介
1.3.2 核酸适配体的优势
1.4 立题意义及研究内容
第二章 纳米材料的制备和表征
2.1 引言
2.2 实验材料
2.3.1 实验试剂及制备方法
2.3.2 实验仪器
2.3 实验方法
2.3.1 Fe_3O_4纳米材料的制备
2.3.2 Fe_3O_4@Cu核壳型纳米材料制备
2.3.3 纳米模拟酶动力学分析
2.3.4 酶促反应底物浓度选择
2.3.5 纳米酶活性稳定性测定
2.4 结果与讨论
2.4.1 纳米材料表征
2.4.2 酶促反应动力学
2.4.3 最佳底物浓度的确定
2.4.4 核壳型纳米材料酶活稳定性
2.5 小结
第三章 基于纳米模拟酶与适配体“turn off”型比色传感器检测体系的建立
3.1 引言
3.2 实验材料
3.2.1 实验试剂及制备方法
3.2.2 实验仪器
3.3 实验方法
3.3.1 Fe_3O_4@Cu纳米模拟酶的合成
3.3.2 检测体系操作流程
3.3.3 最佳封闭剂浓度的选择
3.3.4 最佳cDNA-1浓度选择
3.3.5 最佳Aptamer浓度选择
3.3.6 最佳cDNA-2浓度选择
3.3.7 标准曲线测定
3.3.8 方法特异性研究
3.3.9 加标回收率研究
3.4 结果与讨论
3.4.1 方法原理
3.4.2 最佳封闭剂浓度的确定
3.4.3 最佳cDNA-1浓度的确定
3.4.4 最佳Aptamer浓度的确定
3.4.5 最佳cDNA-2浓度的确定
3.4.6 标准曲线获得
3.4.7 检测体系特异性
3.4.8 牛奶样品中的加标回收
3.5 小结
第四章 基于纳米模拟酶与适配体“turn on”型比色传感器检测体系的建立
4.1 引言
4.2 实验材料
4.2.1 实验试剂及制备方法
4.2.2 实验仪器
4.3 实验方法
4.3.1 Fe_3O_4@Cu纳米模拟酶的合成
4.3.2 检测体系操作流程
4.3.3 琼脂糖电泳实验
4.3.4 最佳cDNA-1浓度选择
4.3.5 标准曲线测定
4.3.6 方法特异性研究
4.4 结果与讨论
4.4.1 方法原理
4.4.2 杂交反应可行性验证
4.4.3 最佳cDNA-1浓度的确定
4.4.4 标准曲线获得
4.4.5 检测体系特异性
4.5 小结
结论
参考文献
攻读硕士学位期间发表论文及科研结果
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]高效液相色谱法在药残测定中的研究进展[J]. 贾书芬,梁存军,耿晓修,黎晓敏. 畜禽业. 2006(10)
博士论文
[1]基于核酸适配体传感器的蜂蜜中四环素残留快速检测方法研究[D]. 王赛.北京化工大学 2017
硕士论文
[1]基于多层纳米核-壳结构复合材料模拟酶的制备及其应用研究[D]. 黄飞.武汉工程大学 2018
[2]基于氧化石墨烯—适配体传感检测食品中四环素残留的研究[D]. 唐亚利.北京化工大学 2017
[3]核酸适配体技术应用于四环素类抗生素的快速检测新方法研究[D]. 罗艳芳.上海交通大学 2014
本文编号：3196687
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