牛脊髓肽的制备及其抗氧化活性研究

发布时间：2021-05-20 06:31

　　牛脊髓是牛中枢神经系统的一部分,经常被人们作为一种高营养食物食用。中医认为其具有补中益气、滋养脾胃、强筋健骨、化痰息风、止渴止涎之功效,适宜于中气下陷、气短体虚、筋骨酸软、久病贫血及面黄目眩之人食用。其富含丰富的蛋白质、脂肪、碳水化合物、花生四烯酸、棕榈酸、硬脂酸、亚油酸、锌、钙等。牛脊髓其氨基酸组成很接近人体需要,可使机体抗病能力增强,适宜病后调养的人食用,能起到补血益气、修复组织的作用,极具开发潜力。但是目前牛脊髓利用方式有限,对于牛脊髓中的蛋白质开发率较低,因此本试验以新鲜牛脊髓为原料,经高温蒸煮、打浆、均质、脱脂等步骤,从牛脊髓中以酶解法分离多肽。酶解过程分别采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶单酶以及碱性蛋白酶与中性蛋白酶、中性蛋白酶与木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶复合酶酶解,以水解度和DPPH清除率为指标优化酶解条件,采用超滤技术分级分离牛脊髓多肽,运用体外化学法和细胞生物法初步研究牛脊髓多肽的抗氧化活性。最后以新鲜牛脊髓为原料制备牛脊髓速溶营养全粉。主要研究结果如下;1.新鲜牛脊髓中基本成分如下:蛋白质15.9%、脂肪17.2%、碳水化合物2.47%、锌4.44 m... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：87 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
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英文缩写词表
第一章 绪论
    1.1 牛脊髓的研究现状
        1.1.1 脊髓概况
        1.1.2 牛脊髓国内外研究现状
        1.1.3 牛脊髓营养价值功效及产品研究现状
    1.2 生物活性肽的研究概况
        1.2.1 生物活性肽的定义
        1.2.2 生物活性肽的分类及生物学功能
        1.2.3 生物活性肽的制备方法
    1.3 抗氧化肽研究概述
        1.3.1 抗氧化肽的简介
        1.3.2 抗氧化肽的评价方法
        1.3.3 抗氧化肽的抗氧化机理
        1.3.4 抗氧化肽的研究现状
        1.3.5 抗氧化肽的分离纯化方法
    1.4 本文研究内容
第二章 牛脊髓肽的制备及纯化
    2.1 前言
    2.2 试验材料与设备
        2.2.1 试验材料与试剂
        2.2.2 试验仪器与设备
    2.3 试验方法
        2.3.1 牛脊髓基本营养物质的测定
        2.3.2 可溶性蛋白浓度的测定
        2.3.3 牛脊髓粗肽的制备工艺
        2.3.4 水解度的测定方法
        2.3.5 SDS-PAGE凝胶电泳测定蛋白质分子量
        2.3.6 蛋白酶的筛选
        2.3.7 酶解条件的优化
        2.3.8 超滤法分级分离牛脊髓肽
        2.3.9 酶解前后牛脊髓蛋白傅里叶红外光谱(FTIR)测定
    2.4 试验结果与讨论
        2.4.1 牛脊髓营养物质测定结果
        2.4.2 牛脊髓蛋白分子量测定结果
        2.4.3 牛脊髓蛋白酶解条件优化结果
        2.4.4 傅里叶红外光谱(FTIR)测定结果
    2.5 本章小结
第三章 牛脊髓多肽体外抗氧化活性测定
    3.1 前言
    3.2 试验材料与设备
        3.2.1 试验材料与试剂
    3.3 抗氧化活性研究
        3.3.1 ABTS自由基清除试验
        3.3.2 DPPH自由基清除试验
        3.3.3 超氧阴离子自由基清除试验
        3.3.4 羟自由基清除试验
    3.4 结果与讨论
        3.4.1 ABTS自由基清除能力测定结果
        3.4.2 DPPH自由基清除能力测定结果
        3.4.3 超氧阴离子自由基清除能力测定结果
        3.4.4 羟自由基清除能力测定结果
    3.5 本章小结
第四章 牛脊髓肽对HepG_2细胞氧化应激损伤的影响
    4.1 前言
    4.2 试验材料与设备
        4.2.1 试验材料与试剂
        4.2.2 试验仪器与设备
    4.3 试验方法
        4.3.1 细胞培养
        4.3.2 细胞存活率试验
        4.3.3 H_2O_2 诱导HepG_2细胞氧化应激模型的建立
        4.3.4 细胞内MDA含量的测定
        4.3.5 细胞内SOD的测定
        4.3.6 细胞内GSH含量的测定
    4.4 试验结果与结论
        4.4.1 MTT法检测细胞存活率
        4.4.2 细胞氧化模型的建立
        4.4.3 细胞内MDA含量的测定结果
        4.4.4 细胞内SOD的测定结果
        4.4.5 细胞内GSH含量的测定结果
    4.5 本章小结
第五章 牛脊髓速溶粉的制备
    5.1 前言
    5.2 试验材料与设备
    5.3 牛脊髓速溶粉制备工艺
    5.4 喷雾干燥条件的研究
        5.4.1 进风温度对牛脊髓速溶粉的影响
        5.4.2 进料量对牛脊髓速溶粉的影响
        5.4.3 可溶性固形物含量对牛脊髓速溶粉的影响
        5.4.4 β-环状糊精添加量对牛脊髓速溶粉的影响
        5.4.5 正交试验
    5.5 结果与分析
        5.5.1 进风温度对牛脊髓速溶粉影响结果
        5.5.2 进料量对牛脊髓速溶粉影响结果
        5.5.3 可溶性固形物含量对牛脊髓速溶粉影响结果
        5.5.4 β-环状糊精添加量对牛脊髓速溶粉影响结果
        5.5.5 正交试验结果
        5.5.6 速溶粉
    5.6 本章小结
第六章 结论与展望
    6.1 结论
    6.2 展望
参考文献
导师简介
作者介绍及攻读硕士学位期间的科研成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]三氯乙酸法测定烟叶中蛋白质含量[J]. 刘肖肖,樊新顺,施东青,田泱源,王艺霖,丁瑞红,王洪涛,王文领.  化学研究. 2018(05)
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[9]玛咖速溶粉制备及其性能[J]. 梁辰,王清亭,周辉,王丽卫,赵兵.  过程工程学报. 2013(03)
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博士论文
[1]背根神经残端导引靶向再生修复脊髓损伤的实验研究[D]. 林世德.中国人民解放军军事医学科学院 2017
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[4]鹿茸与牛脊髓中糖脂类物质的分离纯化[D]. 鲍妮娜.吉林大学 2014
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硕士论文
[1]速溶鹧鸪茶的开发及加工中关键技术研究[D]. 郭莹.黑龙江东方学院 2018
[2]鲈鱼鱼肉抗氧化肽的分离鉴定及其对HepG2细胞氧化损伤的保护作用研究[D]. 赵翊君.华南理工大学 2018
[3]黑果枸杞速溶粉的制备及其品质评价[D]. 杨冬彦.中国科学院大学(中国科学院过程工程研究所) 2018
[4]叶酸对铅暴露下PC12细胞增殖、凋亡及抗氧化能力的影响[D]. 崔灿.河南农业大学 2018
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[6]鹿角多肽的分离纯化及成骨活性研究[D]. 高志惠.山东中医药大学 2017
[7]林蛙骨抗氧化肽的制备及产品研发[D]. 项莹.吉林大学 2017
[8]速溶酸浆粉的加工工艺研究[D]. 柏通.山西农业大学 2017
[9]马鲛鱼鱼皮生物活性肽的制备与分离[D]. 刘东阳.华侨大学 2017
[10]小米速溶粉的制备及其性质研究[D]. 宋超洋.江南大学 2016



本文编号：3197273