食用菌中烟碱类化合物含量及其它代谢物的研究
发布时间：2021-06-10 22:36
食用菌中烟碱类化合物为普遍存在的内源性微量物质,但在出口限量标准严格控制其含量。食用菌中烟碱类化合物形成机制尤其是代谢途径尚未明确。本课题分别对不同食用菌以及自栽培的香菇中烟碱类化合物进行检测,另外对香菇内源性代谢物轮廓进行研究,研究烟碱类化合物和代谢物之间的关系,初步探讨食用菌中烟碱类物质的形成机理。采用U3000-Q Exactive超高效液相色谱-质谱联用仪和AB SCIEX QTRAP 5500LC/MS/MS超高效液相色谱-质谱联用仪,通过优化实验条件和样品前处理采用方法,完成方法学验证,包括专属性、线性关系、定量限及检出限、精密度、回收率和基质效应等各项考察均符合要求。该方法定量结果准确可靠、灵敏度高、分析时间短。可用于食用菌中8种烟碱类化合物的分析。不同食用菌烟碱含量分析表明,16种食用菌中除了去氢烟碱均未检出外,其余7种烟碱类化合物均有不同程度检出。尼古丁、可替丁、新烟碱和二烯烟碱含量较高,分布广泛。各种不同烟碱的含量在不同食用菌之间有显著不同。可替宁含量与联吡啶、尼古丁含量为正相关;可替宁含量与新烟碱含量负相关;尼古丁含量与麦斯明或可替宁含量正相关。不同生长阶段香菇中...
【文章来源】：闽南师范大学福建省
【文章页数】：128 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
八种烟碱类化合物结构式天然的烟碱在室温下为无色或淡黄色的油状液体，在20℃下的密度为1.0071
第1章综述-2-图1-1八种烟碱类化合物结构式天然的烟碱在室温下为无色或淡黄色的油状液体，在20℃下的密度为1.0071kg/m3,沸点为247℃，闪点95℃。当pH值大于10时,主要以烟碱分子态存在，易与水生成水合物，极易溶于醇、醚、氯仿及石油醚等有机溶剂，可随水蒸气一起挥发，能与多种酸反应成盐，所生成的盐大多易溶于水和有机溶剂。图1-2烟碱的3种异构体结构烟碱（尼古丁）会使人上瘾或产生依赖性，重复使用会增加心率和升高血压并降低食欲。大剂量的尼古丁会引起呕吐以及恶心，严重时人会死亡。尼古丁是烟草的主要精神活性成分，通过作用于中枢神经系统中的烟碱乙酰胆碱受体，导致神经递质（如多巴胺和5-羟色胺）的释放，从而导致身体依赖，这些递质通过激活中脑皮质激素多巴胺系统产生增强作用[3]。尼古丁在人体中可以通过各种途径会代谢为降尼古盯可的宁、降
第2章食用菌中八种烟碱类化合物的检测方法学建立-25-等度洗脱的流动相条件既能将各目标峰完全分离，又能快速洗脱，保证高效洗脱（结果见图2-3）。图2-3QTRAP5500液质联用仪优化流动相后的色谱图注：HILIC色谱柱，0.3mL/min梯度洗脱，A相初始10%0.1%甲酸10mM乙酸铵水溶液，B相乙腈2.4.3.2线性范围和检出限定量限将空白溶剂乙腈混合标准系列工作液及基质混合标准系列工作液注入液质联用色谱仪中，测定相应的峰面积，以标准工作液的浓度（X）为横坐标，以峰面积(Y)纵坐标，绘制校准曲线并列出校准曲线的线性方程和线性范围。结果见表2-5，本法线性范围较宽，大约在0.3-500μg/kg范围内，线性相关系数大于0.995。表2-5仪器AB5500线性关系、相关系数及检出限、定量限(μg/kg)名称线性范围线性方程R2LODLOQ可替宁0.03-500Y=6.96e5x-5.118e40.99820.010.03降烟碱0.2-500Y=1.21e5x-98630.99690.050.2新烟碱0.03-500Y=5.53e4x+63680.99590.010.03尼古丁0.3-500Y=1.21e5x+4.42e50.99800.10.3二烯烟碱0.3-500Y=1.92e5x+1.25e50.99900.10.3去氢烟碱0.3-500Y=2.79e5x-7.34e40.99930.10.32.3-联吡啶0.06-500Y=1.83e6x-1.18e50.99810.020.06麦沙明0.03-500Y=2.51e5x+1.61e50.99830.010.03取混合标准中间液0.1mL加入到0.5g基质中，加乙腈定容25mL后过滤，取上清液稀释后，过滤膜进行分析得出8种化合物的检出信号，以信号和噪音（S/N）的比值作为考察定量限和检出限的指标。S/N=10的信号浓度为定量限，S/N=3的信号浓度为检出限，结果见表2-5。定量限及检出限较低，LOD为0.01-0.5μg/kg，LOQ在0.03-0.3μg/kg
本文编号：3223237
【文章来源】：闽南师范大学福建省
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【学位级别】：硕士
【部分图文】：
八种烟碱类化合物结构式天然的烟碱在室温下为无色或淡黄色的油状液体，在20℃下的密度为1.0071
第1章综述-2-图1-1八种烟碱类化合物结构式天然的烟碱在室温下为无色或淡黄色的油状液体，在20℃下的密度为1.0071kg/m3,沸点为247℃，闪点95℃。当pH值大于10时,主要以烟碱分子态存在，易与水生成水合物，极易溶于醇、醚、氯仿及石油醚等有机溶剂，可随水蒸气一起挥发，能与多种酸反应成盐，所生成的盐大多易溶于水和有机溶剂。图1-2烟碱的3种异构体结构烟碱（尼古丁）会使人上瘾或产生依赖性，重复使用会增加心率和升高血压并降低食欲。大剂量的尼古丁会引起呕吐以及恶心，严重时人会死亡。尼古丁是烟草的主要精神活性成分，通过作用于中枢神经系统中的烟碱乙酰胆碱受体，导致神经递质（如多巴胺和5-羟色胺）的释放，从而导致身体依赖，这些递质通过激活中脑皮质激素多巴胺系统产生增强作用[3]。尼古丁在人体中可以通过各种途径会代谢为降尼古盯可的宁、降
第2章食用菌中八种烟碱类化合物的检测方法学建立-25-等度洗脱的流动相条件既能将各目标峰完全分离，又能快速洗脱，保证高效洗脱（结果见图2-3）。图2-3QTRAP5500液质联用仪优化流动相后的色谱图注：HILIC色谱柱，0.3mL/min梯度洗脱，A相初始10%0.1%甲酸10mM乙酸铵水溶液，B相乙腈2.4.3.2线性范围和检出限定量限将空白溶剂乙腈混合标准系列工作液及基质混合标准系列工作液注入液质联用色谱仪中，测定相应的峰面积，以标准工作液的浓度（X）为横坐标，以峰面积(Y)纵坐标，绘制校准曲线并列出校准曲线的线性方程和线性范围。结果见表2-5，本法线性范围较宽，大约在0.3-500μg/kg范围内，线性相关系数大于0.995。表2-5仪器AB5500线性关系、相关系数及检出限、定量限(μg/kg)名称线性范围线性方程R2LODLOQ可替宁0.03-500Y=6.96e5x-5.118e40.99820.010.03降烟碱0.2-500Y=1.21e5x-98630.99690.050.2新烟碱0.03-500Y=5.53e4x+63680.99590.010.03尼古丁0.3-500Y=1.21e5x+4.42e50.99800.10.3二烯烟碱0.3-500Y=1.92e5x+1.25e50.99900.10.3去氢烟碱0.3-500Y=2.79e5x-7.34e40.99930.10.32.3-联吡啶0.06-500Y=1.83e6x-1.18e50.99810.020.06麦沙明0.03-500Y=2.51e5x+1.61e50.99830.010.03取混合标准中间液0.1mL加入到0.5g基质中，加乙腈定容25mL后过滤，取上清液稀释后，过滤膜进行分析得出8种化合物的检出信号，以信号和噪音（S/N）的比值作为考察定量限和检出限的指标。S/N=10的信号浓度为定量限，S/N=3的信号浓度为检出限，结果见表2-5。定量限及检出限较低，LOD为0.01-0.5μg/kg，LOQ在0.03-0.3μg/kg
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