降尿酸乳酸菌的筛选及其功能评价
发布时间：2021-06-14 07:15
本文以30株供试菌株为研究对象,采用高效液相色谱法筛选出具有较高核苷分解速率的菌株。对耐酸、耐胆盐、胃肠道转运、粘附、抑菌能力和药物敏感性进行检测,评价其益生潜力。并通过黄嘌呤氧化酶（XOD）-黄嘌呤反应体系和LPS-THP-1炎症模型等试验对其功能进行初步评价。研究结果如下:（1）采用高效液相色谱法从30株供试菌株中筛选出4株具有较高核苷（鸟苷、肌苷）降解率的乳酸菌,即菌株WX-94、AM60-10PH4、SS-9和SD-H9。菌株WX-94和AM60-10PH4对鸟苷和肌苷的降解率均可达到100%,菌株SS-9和SD-H9对鸟苷的降解率可达到90%以上,但对肌苷的降解率较低,分别为68.18%和49.45%。（2）对4株乳酸菌的益生潜力进行评价结果表明,菌株WX-94、SS-9和SD-H9具有较好的潜在降尿酸作用。其中SS-9经胃肠道运转后存活率最高,可达到58.40%;菌株SD-H9的粘附能力最强,可达到9.5±0.8 CFU/cells,并对13种抗生素有敏感性。并且以上3株菌对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和阴沟肠杆菌均有不同程度的抑制作用。（3）菌株WX-94、SS...
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３?肌苷标准曲线??Ｆｉｇ．３?Ｓｔａｎｄａｒｄ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｉｎｏｓｉｎｅ??３．１．３降解鸟苷和肌苷乳酸菌的筛选结果??３０株供试菌株对鸟苷和肌苷的降解作用见表４和表５
２６?降尿酸乳酸菌的筛选及其功能评价???胃液对植物乳杆菌ＦＪＡＴ－７９２６和干酪乳杆菌ＦＪＡＴ－７９２８的存活影响较大，??处理２?ｈ后，存活率分别为０．０２％和０．０７％。供试菌株对人工肠液耐受性优??于高彩霞［ｍ］等研宄结果中干酪乳杆菌ＢＤ００５４、干酪乳杆菌ＬＣ２Ｗ和肠膜??明串珠菌肠膜亚种ＢＤ１７１０对人工肠液的耐受性。??３．２．３目的菌株的粘附能力??３．２．３．１定性检测目的菌株粘附能力??菌株粘附于肠壁细胞的能力是其发挥作用的首要因素［ｎｉ］。本研究以??ＨＴ－２９结肠细胞为模型评价菌株的粘附潜力。??供试菌株对ＨＴ－２９细胞的粘附能力见图４。??图４?菌株对ＨＴ－２９细胞的粘附能力（ｘｌ〇〇〇倍）??Ｆｉｇ．４?Ａｄｈｅｓｉｏｎ?ｏｆ?ｂａｃｔｅｒｉａ?ｔｏ?ＨＴ－２９?ｃｅｌｌｓ?（?１０００?ｔｉｍｅｓ）??由图４可知，菌株ＷＸ－９４、ＳＳ－９和ＳＤ－Ｈ９均有粘附于ＨＴ－２９细胞的??能力，箭头所指向的是菌株ＷＸ－９４。推测以上３株乳酸菌可以定植肠道，??从而发挥其益生作用。??３．２．３．２定量检测目的菌株粘附能力??３株乳酸菌对ＨＴ－２９细胞的粘附能力试验结果见图５。??
?内蒙古农业大学硕士学位论文?２７＿??Ｉ?４?｜??雄：??ＷＸ－９４?ＳＳ－９?ＳＤ－Ｈ９??菌株编号??图５?菌株对ＨＴ－２９细胞的粘附能力??Ｆｉｇ．５?Ａｄｈｅｓｉｏｎ?ｏｆ?ｂａｃｔｅｒｉａ?ｔｏ?ＨＴ－２９?ｃｅｌｌｓ??注：字母不同表示差异显著，尸＜０．０１??由图５可以看出各菌株粘附能力存在显著差异，ＳＤ－Ｈ９的粘附能力最??强可达到９．５±０．８?ＣＦＵ／ｃｅｌｌｓ，ＷＸ－９４与ＳＳ－９的粘附能力分别为５．２±１．０??ＣＦＵ／ｃｅｌｌｓ、７．５±０．８ＣＦＵ／ｃｅｌｌｓ。以上结果表明，３株乳酸菌均可定植于肠道??上皮细胞，目前普遍认为乳酸菌的粘附性是决定其免疫调节活性的重要因??素之一，粘附能力强的乳酸菌能更好地增强机体的免疫应答［１１２］。??３．２．４?目的菌株的抑菌能力??目前普遍认为某些乳酸菌可以通过产生有机酸、过氧化氢和类似细菌??素的蛋白或肽类等物质，抑制或杀死病原菌，以维持肠道微生态平衡，保??护人体免疫系统［”３］。??本试验采用牛津杯法分别探宄以上３株乳酸菌对四株指示菌的抑制能??力，结果如表１０所示。３株乳酸菌对四株指示菌均有不同程度的抑制作用。??ＳＤ－Ｈ９较其他２株菌相比对大肠杆菌的抑制能力较强；ＷＸ－９４对金黄色葡??萄球菌、铜绿假单胞菌的抑制能力较强；菌株ＳＤ－Ｈ９和ＷＸ－９４对阴沟肠??杆菌的抑制作用与菌株ＳＳ－９相比较弱。??
【参考文献】：
期刊论文
[1]植物乳杆菌UA149的降尿酸作用[J]. 牛春华,肖茹雪,赵子健,高磊,崔伟东,梁铁,林丽,李盛钰. 现代食品科技. 2020(02)
[2]优良抗氧化能力发酵乳杆菌P13的筛选及其耐逆特性[J]. 王英,董月,夏秀东,李莹,周剑忠. 中国食品学报. 2019(08)
[3]原发性痛风和高尿酸血症相关基因研究现状[J]. 白雪,邱洪斌,王景涛,袁维卓,王艳秋,李长红,张国艳,刘艳姝,杨兆柱,关宝生. 海南医学院学报. 2019(16)
[4]现代中医治疗高尿酸血症进展研究[J]. 刘瑞琪,杨洪涛. 内蒙古中医药. 2019(05)
[5]降尿酸药物治疗高尿酸血症及痛风的现状及研究进展[J]. 唐子猗,青玉凤. 中华风湿病学杂志. 2019 (03)
[6]植物乳杆菌ZXH-1304S降解肌酐和尿酸的活力研究[J]. 张晓晖,关海滨,冬颖,张爱武. 食品工业科技. 2019(11)
[7]白耙齿菌固体发酵物对高尿酸血症及痛风性关节炎的治疗作用[J]. 黄静,李昂,刘宇光,张执刚,白忠秀,杜大军,王淑敏. 西北药学杂志. 2018(04)
[8]德氏乳杆菌QS701产ACE抑制肽发酵条件的优化[J]. 吴楠,万月,许伟瀚,双全. 食品工业科技. 2018(13)
[9]尿酸代谢异常与慢性炎症的新认识[J]. 张晓洁,姜林娣. 中华医学杂志. 2018 (13)
[10]降酸灵对高尿酸血症动物的药理作用研究[J]. 钱凯,许露,韩彬,邱玉琴,龚梦鹃,王颖芳,胡旭光. 广东化工. 2018(04)
博士论文
[1]益生菌对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的影响及机制[D]. 曹统.青岛大学 2017
[2]益生乳酸杆菌的黏附及免疫调节作用研究[D]. 任大勇.吉林大学 2013
[3]乳酸杆菌对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化形成的影响及机制研究[D]. 陈丽华.中南大学 2013
硕士论文
[1]益生菌对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的影响及机制[D]. 叶泽.兰州大学 2019
[2]具有潜在益生特性发酵乳杆菌的筛选[D]. 鲍雅静.内蒙古农业大学 2012
[3]桦褐孔菌提取物降血脂降尿酸功能评价[D]. 孙玮.天津科技大学 2010
[4]乳酸菌抗氧化活性的研究[D]. 张江巍.南昌大学 2006
[5]一株产尿酸氧化酶菌株的分离及酶特性研究[D]. 周学来.浙江大学 2005
本文编号：3229335
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３?肌苷标准曲线??Ｆｉｇ．３?Ｓｔａｎｄａｒｄ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｉｎｏｓｉｎｅ??３．１．３降解鸟苷和肌苷乳酸菌的筛选结果??３０株供试菌株对鸟苷和肌苷的降解作用见表４和表５
２６?降尿酸乳酸菌的筛选及其功能评价???胃液对植物乳杆菌ＦＪＡＴ－７９２６和干酪乳杆菌ＦＪＡＴ－７９２８的存活影响较大，??处理２?ｈ后，存活率分别为０．０２％和０．０７％。供试菌株对人工肠液耐受性优??于高彩霞［ｍ］等研宄结果中干酪乳杆菌ＢＤ００５４、干酪乳杆菌ＬＣ２Ｗ和肠膜??明串珠菌肠膜亚种ＢＤ１７１０对人工肠液的耐受性。??３．２．３目的菌株的粘附能力??３．２．３．１定性检测目的菌株粘附能力??菌株粘附于肠壁细胞的能力是其发挥作用的首要因素［ｎｉ］。本研究以??ＨＴ－２９结肠细胞为模型评价菌株的粘附潜力。??供试菌株对ＨＴ－２９细胞的粘附能力见图４。??图４?菌株对ＨＴ－２９细胞的粘附能力（ｘｌ〇〇〇倍）??Ｆｉｇ．４?Ａｄｈｅｓｉｏｎ?ｏｆ?ｂａｃｔｅｒｉａ?ｔｏ?ＨＴ－２９?ｃｅｌｌｓ?（?１０００?ｔｉｍｅｓ）??由图４可知，菌株ＷＸ－９４、ＳＳ－９和ＳＤ－Ｈ９均有粘附于ＨＴ－２９细胞的??能力，箭头所指向的是菌株ＷＸ－９４。推测以上３株乳酸菌可以定植肠道，??从而发挥其益生作用。??３．２．３．２定量检测目的菌株粘附能力??３株乳酸菌对ＨＴ－２９细胞的粘附能力试验结果见图５。??
?内蒙古农业大学硕士学位论文?２７＿??Ｉ?４?｜??雄：??ＷＸ－９４?ＳＳ－９?ＳＤ－Ｈ９??菌株编号??图５?菌株对ＨＴ－２９细胞的粘附能力??Ｆｉｇ．５?Ａｄｈｅｓｉｏｎ?ｏｆ?ｂａｃｔｅｒｉａ?ｔｏ?ＨＴ－２９?ｃｅｌｌｓ??注：字母不同表示差异显著，尸＜０．０１??由图５可以看出各菌株粘附能力存在显著差异，ＳＤ－Ｈ９的粘附能力最??强可达到９．５±０．８?ＣＦＵ／ｃｅｌｌｓ，ＷＸ－９４与ＳＳ－９的粘附能力分别为５．２±１．０??ＣＦＵ／ｃｅｌｌｓ、７．５±０．８ＣＦＵ／ｃｅｌｌｓ。以上结果表明，３株乳酸菌均可定植于肠道??上皮细胞，目前普遍认为乳酸菌的粘附性是决定其免疫调节活性的重要因??素之一，粘附能力强的乳酸菌能更好地增强机体的免疫应答［１１２］。??３．２．４?目的菌株的抑菌能力??目前普遍认为某些乳酸菌可以通过产生有机酸、过氧化氢和类似细菌??素的蛋白或肽类等物质，抑制或杀死病原菌，以维持肠道微生态平衡，保??护人体免疫系统［”３］。??本试验采用牛津杯法分别探宄以上３株乳酸菌对四株指示菌的抑制能??力，结果如表１０所示。３株乳酸菌对四株指示菌均有不同程度的抑制作用。??ＳＤ－Ｈ９较其他２株菌相比对大肠杆菌的抑制能力较强；ＷＸ－９４对金黄色葡??萄球菌、铜绿假单胞菌的抑制能力较强；菌株ＳＤ－Ｈ９和ＷＸ－９４对阴沟肠??杆菌的抑制作用与菌株ＳＳ－９相比较弱。??
【参考文献】：
期刊论文
[1]植物乳杆菌UA149的降尿酸作用[J]. 牛春华,肖茹雪,赵子健,高磊,崔伟东,梁铁,林丽,李盛钰. 现代食品科技. 2020(02)
[2]优良抗氧化能力发酵乳杆菌P13的筛选及其耐逆特性[J]. 王英,董月,夏秀东,李莹,周剑忠. 中国食品学报. 2019(08)
[3]原发性痛风和高尿酸血症相关基因研究现状[J]. 白雪,邱洪斌,王景涛,袁维卓,王艳秋,李长红,张国艳,刘艳姝,杨兆柱,关宝生. 海南医学院学报. 2019(16)
[4]现代中医治疗高尿酸血症进展研究[J]. 刘瑞琪,杨洪涛. 内蒙古中医药. 2019(05)
[5]降尿酸药物治疗高尿酸血症及痛风的现状及研究进展[J]. 唐子猗,青玉凤. 中华风湿病学杂志. 2019 (03)
[6]植物乳杆菌ZXH-1304S降解肌酐和尿酸的活力研究[J]. 张晓晖,关海滨,冬颖,张爱武. 食品工业科技. 2019(11)
[7]白耙齿菌固体发酵物对高尿酸血症及痛风性关节炎的治疗作用[J]. 黄静,李昂,刘宇光,张执刚,白忠秀,杜大军,王淑敏. 西北药学杂志. 2018(04)
[8]德氏乳杆菌QS701产ACE抑制肽发酵条件的优化[J]. 吴楠,万月,许伟瀚,双全. 食品工业科技. 2018(13)
[9]尿酸代谢异常与慢性炎症的新认识[J]. 张晓洁,姜林娣. 中华医学杂志. 2018 (13)
[10]降酸灵对高尿酸血症动物的药理作用研究[J]. 钱凯,许露,韩彬,邱玉琴,龚梦鹃,王颖芳,胡旭光. 广东化工. 2018(04)
博士论文
[1]益生菌对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的影响及机制[D]. 曹统.青岛大学 2017
[2]益生乳酸杆菌的黏附及免疫调节作用研究[D]. 任大勇.吉林大学 2013
[3]乳酸杆菌对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化形成的影响及机制研究[D]. 陈丽华.中南大学 2013
硕士论文
[1]益生菌对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的影响及机制[D]. 叶泽.兰州大学 2019
[2]具有潜在益生特性发酵乳杆菌的筛选[D]. 鲍雅静.内蒙古农业大学 2012
[3]桦褐孔菌提取物降血脂降尿酸功能评价[D]. 孙玮.天津科技大学 2010
[4]乳酸菌抗氧化活性的研究[D]. 张江巍.南昌大学 2006
[5]一株产尿酸氧化酶菌株的分离及酶特性研究[D]. 周学来.浙江大学 2005
本文编号：3229335
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