黄腊果籽蛋白理化功能性质表征及其在叶黄素包埋中的应用
发布时间：2021-06-23 07:18
黄腊果（Stauntonia brachyanthera Hand.Mazz.,S.brachyanthera）属于木通科野木瓜属植物,黄腊果籽富含油脂和蛋白质,但在生产过程中经常被直接丢弃,造成了资源的大量浪费。本研究提取了黄腊果果实种子中的分离蛋白和主要蛋白组分,包括清蛋白、球蛋白和谷蛋白,并对其理化和功能特性进行了研究。未脱脂和脱脂种子的蛋白质含量分别为17.27±0.3%和33.60±0.8%。分离蛋白及各组分蛋白的亚基分子量分布在11.0至51.0 kDa,具有平衡的氨基酸比例,除清蛋白中的蛋氨酸外,其必需氨基酸含量均符合WHO/FAO对成年人的建议。同时,分离蛋白、清蛋白和谷蛋白显示相似的二级结构组成、X射线衍射峰和变性温度。清蛋白是种子中的主要储藏蛋白质,其表面疏水性（516.7±7.9）、溶解性、乳化能力（乳化能力指数110.9±1.6m2/g,乳化稳定性指数80.5±1.3%）和起泡性（679.1±53%）均高于分离蛋白和谷蛋白。同时,与其他一些植物蛋白相比,分离蛋白具有更好的氨基酸组成、更高的起泡能力（406.7±41%）、持水（4.66g/g）/持油（9.06g/...
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：85 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．〗黄腊果籽及蛋白照片??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１?Ａｐｐｅａｒａｎｃｅ?ｏｆ?ｂｒａｃｈｙａｎｔｈｅｒａ?ｓｅｅｄｓ?ａｎｄ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｆｒａｃｔｉｏｎｓ??
蛋白含量分别为１０．６４％和０．７２％，没有鉴定出醇溶蛋??白组分。ＳＳＰＩ、清蛋白、球蛋白和谷蛋白的蛋白质纯度分别为８９．９牡０．５％、??８４．４６±０．５％、５５．６２±１．６％和７５＿５３±０．４％。此夕卜，ＳＳＰＩ和各组分蛋白中水分、灰分??和粗脂肪含量如表２．１所示。上述数据表明，黄腊果籽中蛋白质含量高，经油脂??加工后，可以作为工业经济生产中植物蛋白的潜在来源进行开发。??２．４．２?ＳＤＳ－ＰＡＧＥ??通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ研宄ＳＳＰ１和各组分蛋白的分子量和亚基分布。如图２．２所??示，ＳＳＰ１?（条带丨）是一种包含７个不同亚基的复合蛋白质，主要亚基大小分别??约为?５０、４７、３１、２２、２０、１６?和?１２．５?ｋＤａ。在?３１?ｋＤａ?和?２０?ｋＤａ?处的片段分别??代表酸性亚基（Ａｃｉｄｉｃ?ｓｕｂｕｎｉｔ，ＡＳ）和碱性亚基（Ｂａｓｉｃ?ｓｕｂｕｎｉｔ，?ＢＳ）?清蛋白??（条带２）相比于ＳＳＰＩ缺少１６?ｋＤａ和１２．５?ｋＤａ处的亚基。球蛋白（条带３）含??有３个亚基片段，分别为５１、１４和ＩＩ?ｋＤａ，蛋白条带密度较低，可能是由于球??蛋白纯度较低（５５．６２士１．６％）。谷蛋白（条带５）显示出３个片段，分别在４９、??３０和１９?ｋＤａ，片段呈现一定的涂抹状，可能是由于谷蛋白在电泳上样缓冲液中??溶解性较差［５３］。此外，在条带４中没有发现蛋白片段，推测乙醇提取物中没有醇??溶蛋白成分。??Ｉ?〇〇?邏??７５??４Ｓ?卜一??Ｍａｒｋｅｒ?１?２?３?４?５??图２．２ＳＳＰＩ与组分蛋白ＳＤＳ－ＰＡＧＥ?（Ｍａｒｋｅｒ，预染色标准蛋白；条带１，分离蛋白；条带??２，清蛋白；条带３
?第２章黄腊果籽蛋白的提取和理化性质研究???ｖ（Ｏ－Ｈ）?＇?＇??Ａｍｉｄｅ?Ｉ，ＩＩ，ＩＩＩ??．?Ｉ?．?Ｉ?．?ｉ?．?Ｉ?■?ｉ?．?ｉ?．?ｉ??４０００?３５００?３０００?２５００?２０００?１５００?１０００?５００??Ｗａｖｅｎｕｍｂｅｒｓ?（ｃｍ￣＾）??图２．３?ＳＳＰ１与组分蛋白红外光谱图??Ｆｉｇｕｒｅ?２．３?ＦＴ－ＩＲ?ｓｐｅｃｔｒａ?ｏｆ?ＳＳＰ１?ａｎｄ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｆｒａｃｔｉｏｎｓ??为了更深入地了解ＳＳＰＩ和各组分蛋白中的二级结构特征，通过高斯定律对??酰胺Ｉ带进行了分析。通过曲线拟合计算得到的４种蛋白质二级结构（ａ－螺旋、??Ｐ－折叠、Ｐ－转角和无规则卷曲）的比例如表２．４的所示。??表２．４ＳＳＰＩ马组分蛋丨＇丨：级结构纟＿１１成??Ｔａｂｌｅ?２．４?Ｓｅｃｏｎｄａｒｙ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ?ｃｏｎｔｅｎｔ?ｏｆ?ＳＳＰＩ?ａｎｄ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｆｒａｃｔｉｏｎｓ??螺旋?ｐ－转角无规则卷??（〇／？）?Ｐ－折叠（％）??（％）曲⑷??＾＇ｌｉｎ?１６５７－１６６０?１６１７－１６１９?１６３０－１６３２?１６８４－１６８８?１６７１－１６７４?１６４３－１６４５??ｃｍ＇１?ｃｍ－１?ｃｍ＇１?ｃｍ＇１?ｃｍ＇１?ｃｍ＇１??ＳＳＰＩ?２２．３±０．２?８．５±〇．２?１９．８±０．２?１０．０±０．２ａ?３８．４±０．６?１６．５±０．５?２２．９±０．１??Ａｌｂｕｍｉｎ?２２．８±０．３?８．２±０．２?２０．０±０．４?１０．０±０．１ａ?３７．８±０．５?１６．３±０．５?２３．０±０．３??
【参考文献】：
期刊论文
[1]乳化剂稳定乳液的机理及应用研究进展[J]. 王君文,韩旭,李田甜,于国萍. 食品科学. 2020(21)
[2]共载多西他赛和维拉帕米脂质体逆转肿瘤耐药性的研究[J]. 叶玲,叶娟,鲁继光,杜琼,余波. 药学学报. 2020(05)
[3]高压微射流处理对大豆分离蛋白结构功能特性及其乳液性质的影响[J]. 朱明明,宁方建,温平威,熊华,赵强. 中国油脂. 2020(01)
[4]维生素E脂质体对小鼠皮肤光损伤的修复作用[J]. 李福民,刘媛,廖金凤,段西凌. 中国临床药理学杂志. 2019(05)
[5]基于氢键力学增强型维生素D3脂质体复合水凝胶的构建及骨修复研究[J]. 程若昱,崔文国. 高分子学报. 2018(10)
[6]黄腊果根的化学成分研究[J]. 张毅,张建华,吴佳,苏晶,孟大利. 华西药学杂志. 2016(05)
[7]黄腊果叶化学成分的分离与鉴定（Ⅱ）[J]. 黄媛,周邵伯,陆丁,孟大利. 沈阳药科大学学报. 2016(05)
[8]黄腊果藤茎化学成分的分离与鉴定（Ⅱ）[J]. 陈超,陆丁,孟大利. 沈阳药科大学学报. 2015(12)
[9]野木瓜属植物化学成分和药理活性的研究进展[J]. 卢旭然,王满元,龚慕辛,潘学强. 北京中医药. 2013(07)
[10]黄腊果叶中化学成分的分离与鉴定（Ⅰ）[J]. 张辘辘,朱巧,孟大利,李宁,李铣. 沈阳药科大学学报. 2012(05)
硕士论文
[1]基于大米蛋白酶解物构建的叶黄素纳米输送体系的制备及性质研究[D]. 马晓雨.南昌大学 2019
[2]牛血清白蛋白-葡聚糖-叶黄素纳米颗粒的稳定性及生物利用率[D]. 石振鹏.天津商业大学 2019
[3]β-胡萝卜素—薏苡仁油复合脂质体的制备及功能特性研究[D]. 郑景霞.南昌大学 2018
[4]米糠清蛋白—壳聚糖纳米自组装包载姜黄素纳米体系制备与评价[D]. 甘招娣.南昌大学 2017
[5]黄蜡果种子的解剖观察及贮藏物的组织化学分析[D]. 袁波.湖南农业大学 2013
[6]白木通籽蛋白的物化特性及酶法修饰研究[D]. 杜研学.南昌大学 2012
本文编号：3244509
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：85 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．〗黄腊果籽及蛋白照片??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１?Ａｐｐｅａｒａｎｃｅ?ｏｆ?ｂｒａｃｈｙａｎｔｈｅｒａ?ｓｅｅｄｓ?ａｎｄ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｆｒａｃｔｉｏｎｓ??
蛋白含量分别为１０．６４％和０．７２％，没有鉴定出醇溶蛋??白组分。ＳＳＰＩ、清蛋白、球蛋白和谷蛋白的蛋白质纯度分别为８９．９牡０．５％、??８４．４６±０．５％、５５．６２±１．６％和７５＿５３±０．４％。此夕卜，ＳＳＰＩ和各组分蛋白中水分、灰分??和粗脂肪含量如表２．１所示。上述数据表明，黄腊果籽中蛋白质含量高，经油脂??加工后，可以作为工业经济生产中植物蛋白的潜在来源进行开发。??２．４．２?ＳＤＳ－ＰＡＧＥ??通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ研宄ＳＳＰ１和各组分蛋白的分子量和亚基分布。如图２．２所??示，ＳＳＰ１?（条带丨）是一种包含７个不同亚基的复合蛋白质，主要亚基大小分别??约为?５０、４７、３１、２２、２０、１６?和?１２．５?ｋＤａ。在?３１?ｋＤａ?和?２０?ｋＤａ?处的片段分别??代表酸性亚基（Ａｃｉｄｉｃ?ｓｕｂｕｎｉｔ，ＡＳ）和碱性亚基（Ｂａｓｉｃ?ｓｕｂｕｎｉｔ，?ＢＳ）?清蛋白??（条带２）相比于ＳＳＰＩ缺少１６?ｋＤａ和１２．５?ｋＤａ处的亚基。球蛋白（条带３）含??有３个亚基片段，分别为５１、１４和ＩＩ?ｋＤａ，蛋白条带密度较低，可能是由于球??蛋白纯度较低（５５．６２士１．６％）。谷蛋白（条带５）显示出３个片段，分别在４９、??３０和１９?ｋＤａ，片段呈现一定的涂抹状，可能是由于谷蛋白在电泳上样缓冲液中??溶解性较差［５３］。此外，在条带４中没有发现蛋白片段，推测乙醇提取物中没有醇??溶蛋白成分。??Ｉ?〇〇?邏??７５??４Ｓ?卜一??Ｍａｒｋｅｒ?１?２?３?４?５??图２．２ＳＳＰＩ与组分蛋白ＳＤＳ－ＰＡＧＥ?（Ｍａｒｋｅｒ，预染色标准蛋白；条带１，分离蛋白；条带??２，清蛋白；条带３
?第２章黄腊果籽蛋白的提取和理化性质研究???ｖ（Ｏ－Ｈ）?＇?＇??Ａｍｉｄｅ?Ｉ，ＩＩ，ＩＩＩ??．?Ｉ?．?Ｉ?．?ｉ?．?Ｉ?■?ｉ?．?ｉ?．?ｉ??４０００?３５００?３０００?２５００?２０００?１５００?１０００?５００??Ｗａｖｅｎｕｍｂｅｒｓ?（ｃｍ￣＾）??图２．３?ＳＳＰ１与组分蛋白红外光谱图??Ｆｉｇｕｒｅ?２．３?ＦＴ－ＩＲ?ｓｐｅｃｔｒａ?ｏｆ?ＳＳＰ１?ａｎｄ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｆｒａｃｔｉｏｎｓ??为了更深入地了解ＳＳＰＩ和各组分蛋白中的二级结构特征，通过高斯定律对??酰胺Ｉ带进行了分析。通过曲线拟合计算得到的４种蛋白质二级结构（ａ－螺旋、??Ｐ－折叠、Ｐ－转角和无规则卷曲）的比例如表２．４的所示。??表２．４ＳＳＰＩ马组分蛋丨＇丨：级结构纟＿１１成??Ｔａｂｌｅ?２．４?Ｓｅｃｏｎｄａｒｙ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ?ｃｏｎｔｅｎｔ?ｏｆ?ＳＳＰＩ?ａｎｄ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｆｒａｃｔｉｏｎｓ??螺旋?ｐ－转角无规则卷??（〇／？）?Ｐ－折叠（％）??（％）曲⑷??＾＇ｌｉｎ?１６５７－１６６０?１６１７－１６１９?１６３０－１６３２?１６８４－１６８８?１６７１－１６７４?１６４３－１６４５??ｃｍ＇１?ｃｍ－１?ｃｍ＇１?ｃｍ＇１?ｃｍ＇１?ｃｍ＇１??ＳＳＰＩ?２２．３±０．２?８．５±〇．２?１９．８±０．２?１０．０±０．２ａ?３８．４±０．６?１６．５±０．５?２２．９±０．１??Ａｌｂｕｍｉｎ?２２．８±０．３?８．２±０．２?２０．０±０．４?１０．０±０．１ａ?３７．８±０．５?１６．３±０．５?２３．０±０．３??
【参考文献】：
期刊论文
[1]乳化剂稳定乳液的机理及应用研究进展[J]. 王君文,韩旭,李田甜,于国萍. 食品科学. 2020(21)
[2]共载多西他赛和维拉帕米脂质体逆转肿瘤耐药性的研究[J]. 叶玲,叶娟,鲁继光,杜琼,余波. 药学学报. 2020(05)
[3]高压微射流处理对大豆分离蛋白结构功能特性及其乳液性质的影响[J]. 朱明明,宁方建,温平威,熊华,赵强. 中国油脂. 2020(01)
[4]维生素E脂质体对小鼠皮肤光损伤的修复作用[J]. 李福民,刘媛,廖金凤,段西凌. 中国临床药理学杂志. 2019(05)
[5]基于氢键力学增强型维生素D3脂质体复合水凝胶的构建及骨修复研究[J]. 程若昱,崔文国. 高分子学报. 2018(10)
[6]黄腊果根的化学成分研究[J]. 张毅,张建华,吴佳,苏晶,孟大利. 华西药学杂志. 2016(05)
[7]黄腊果叶化学成分的分离与鉴定（Ⅱ）[J]. 黄媛,周邵伯,陆丁,孟大利. 沈阳药科大学学报. 2016(05)
[8]黄腊果藤茎化学成分的分离与鉴定（Ⅱ）[J]. 陈超,陆丁,孟大利. 沈阳药科大学学报. 2015(12)
[9]野木瓜属植物化学成分和药理活性的研究进展[J]. 卢旭然,王满元,龚慕辛,潘学强. 北京中医药. 2013(07)
[10]黄腊果叶中化学成分的分离与鉴定（Ⅰ）[J]. 张辘辘,朱巧,孟大利,李宁,李铣. 沈阳药科大学学报. 2012(05)
硕士论文
[1]基于大米蛋白酶解物构建的叶黄素纳米输送体系的制备及性质研究[D]. 马晓雨.南昌大学 2019
[2]牛血清白蛋白-葡聚糖-叶黄素纳米颗粒的稳定性及生物利用率[D]. 石振鹏.天津商业大学 2019
[3]β-胡萝卜素—薏苡仁油复合脂质体的制备及功能特性研究[D]. 郑景霞.南昌大学 2018
[4]米糠清蛋白—壳聚糖纳米自组装包载姜黄素纳米体系制备与评价[D]. 甘招娣.南昌大学 2017
[5]黄蜡果种子的解剖观察及贮藏物的组织化学分析[D]. 袁波.湖南农业大学 2013
[6]白木通籽蛋白的物化特性及酶法修饰研究[D]. 杜研学.南昌大学 2012
本文编号：3244509
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