信号分子AHLs印迹荧光探针构建及应用
发布时间：2021-11-12 07:34
群体感应信号分子是细菌生长过程中的代谢产物,环境中菌体浓度越大分泌的信号分子越多。当浓度达到阈值后,信号分子可调控细菌毒力、致腐性、生物被膜等基因的表达。因此,检测食品环境中信号分子的含量可评估食品的细菌污染情况,对保证食品安全、降低食源性疾病的发生具有重要意义。本论文采用溶胀法制备了Eu（DBM）3Phen掺杂的羧基化聚苯乙烯荧光纳米微球（FPM）,该微球平均直径约为136.8 nm。以FPM为核、Cbz-N酰基高丝氨酸内酯为模板分子、甲基丙烯酸为功能单体、乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂构建了信号分子AHLs的分子印迹荧光探针FPM@MIPs。吸附实验结果表明:FPM@MIPs探针对模板分子的最大吸附容量为50.1 mg/g,在浓度为浓度为20 mg/L时,8 min可达到吸附平衡;探针表面和内部均分布着吸附模板分子的结合位点,主要通过化学方式与模板分子结合。FPM@MIPs探针与目标物孵育7 min后荧光信号稳定,C4-HSL,C6-HSL和C8-HSL三种AHLs信号分子对探针的荧光猝灭效果好。...
【文章来源】：渤海大学辽宁省
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
细菌QS信号分子分子结构
渤海大学硕士学位论文5图1-2.试纸条生物传感器检测食品中3-oxo-C12-HSL信号分子结果[40]。Figure1-2.Arapidpaperbiosensor-basedtestforbacterialpathogensinfood.Deng等[37]应用转移特殊质粒的E.coli为指示菌，建立了3-oxo-C6-HSL检测方法，方法的检测方位为5×10-8mol/L-1×10-5mol/L。薄层色谱（Thin-layerchromatography，TLC）是一种基于分子极性的分离技术。将细胞生物传感器与薄层色谱相结合可提高二者的灵敏度。Charlesworth等[39]将E.coli传感器与TLC结合建立了9种AHLs的检测方法，方法的检出限为0.009ng-1710ng。试纸条生物传感器检测技术为现场快速检测提供了可能。Wynn等[40]E.coli作为探针构建试纸条生物传感器检测AI-2和AHLs信号分子检测方法，确定了牛奶和牛肉中信号分子与检测信号的相互关系，方法的检测限为1×10-7mol/L-1×10-9mol/L，相对标准偏差为1-16%。图1-2为试纸条生物传感器检测3-oxo-C12-HSL信号分子结果。1.2.2.3电化学传感器电化学传感技术（Electrochemicalsensingtechniques，ECST）具有响应速度快、携带便携、检测成本低等特点，已经引起广泛关注。在电化学传感器中，转换器将检测信号转换为可定量的电输出，分子识别元件结合和识别目标物[41]。大鼠嗜碱性白血病（RBL-2H3）肥大细胞系是一群免疫细胞，具有选择识别AHLs的应用潜力[42]。Jiang等[42]将RBL-2H3细胞固定于金电极表面构建了检测3-oxo-C12-HSL信号分子电化学传感器，检测结果显示该检测方法的最低检出限为0.034μmol/L，表明该方法可以评估食品中细菌致病性（图1-3基于EBL-2H3电化学传感器示意图）。Jiang等[27]将多壁碳纳米管与RBL-2H3修饰的碳电极结合提高丝网
信号分子AHLs印迹荧光探针构建及应用6印刷碳电极电信号的传输性能和检测方法的灵敏度，结果显示该方法对3-oxo-C12-HSL的最低检出限为0.094μmol/L，并应用于鱼汁样品中信号分子的检测。图1-3基于EBL-2H3电化学传感器及检测过程示意图[42]。Fig.1-3ProposedschemeforthepreparationofRBL-2H3mastcellsensorandprocessofAHLsdetection为克服细胞电化学传感器中分子识别元件对环境的敏感性，Piletska等[43]首先将分子印迹仿生抗体作为识别元件构建了AHLs信号分子电化学传感器检测方法；该方法以3-oxo-C12-AHL为模板分子，以亚甲基丁二酸为功能单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂，为分子印迹电化学传感器检测AHLs信号分子奠定了基矗Jiang等[44]以Fe3O4@SiO2为核、以2,5-二甲基-4-羟基-3（2H）-呋喃酮为模板分子、乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂制备磁性分子印迹，并以此聚合物为识别元件构建磁性碳电极，建立AHLs信号分子检测方法。该方法的最低检出限为8×10-10mol/L，线性范围为2.5×10-9mol/L-1.0×10-7mol/L，实际食品样品检测中表现良好。掺硼金刚石（Boron-dopeddiamond，BBD）薄膜电极具有高电流密度、背景值低、电化学稳定性好等特点，被广泛应用于分析方法的建立[45]。Zhu等[10]基于BBD电极建立了PQS信号分子检测方法，在电压为+0.768V和+1.182V之间，pH值为2时该
本文编号：3490455
【文章来源】：渤海大学辽宁省
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
细菌QS信号分子分子结构
渤海大学硕士学位论文5图1-2.试纸条生物传感器检测食品中3-oxo-C12-HSL信号分子结果[40]。Figure1-2.Arapidpaperbiosensor-basedtestforbacterialpathogensinfood.Deng等[37]应用转移特殊质粒的E.coli为指示菌，建立了3-oxo-C6-HSL检测方法，方法的检测方位为5×10-8mol/L-1×10-5mol/L。薄层色谱（Thin-layerchromatography，TLC）是一种基于分子极性的分离技术。将细胞生物传感器与薄层色谱相结合可提高二者的灵敏度。Charlesworth等[39]将E.coli传感器与TLC结合建立了9种AHLs的检测方法，方法的检出限为0.009ng-1710ng。试纸条生物传感器检测技术为现场快速检测提供了可能。Wynn等[40]E.coli作为探针构建试纸条生物传感器检测AI-2和AHLs信号分子检测方法，确定了牛奶和牛肉中信号分子与检测信号的相互关系，方法的检测限为1×10-7mol/L-1×10-9mol/L，相对标准偏差为1-16%。图1-2为试纸条生物传感器检测3-oxo-C12-HSL信号分子结果。1.2.2.3电化学传感器电化学传感技术（Electrochemicalsensingtechniques，ECST）具有响应速度快、携带便携、检测成本低等特点，已经引起广泛关注。在电化学传感器中，转换器将检测信号转换为可定量的电输出，分子识别元件结合和识别目标物[41]。大鼠嗜碱性白血病（RBL-2H3）肥大细胞系是一群免疫细胞，具有选择识别AHLs的应用潜力[42]。Jiang等[42]将RBL-2H3细胞固定于金电极表面构建了检测3-oxo-C12-HSL信号分子电化学传感器，检测结果显示该检测方法的最低检出限为0.034μmol/L，表明该方法可以评估食品中细菌致病性（图1-3基于EBL-2H3电化学传感器示意图）。Jiang等[27]将多壁碳纳米管与RBL-2H3修饰的碳电极结合提高丝网
信号分子AHLs印迹荧光探针构建及应用6印刷碳电极电信号的传输性能和检测方法的灵敏度，结果显示该方法对3-oxo-C12-HSL的最低检出限为0.094μmol/L，并应用于鱼汁样品中信号分子的检测。图1-3基于EBL-2H3电化学传感器及检测过程示意图[42]。Fig.1-3ProposedschemeforthepreparationofRBL-2H3mastcellsensorandprocessofAHLsdetection为克服细胞电化学传感器中分子识别元件对环境的敏感性，Piletska等[43]首先将分子印迹仿生抗体作为识别元件构建了AHLs信号分子电化学传感器检测方法；该方法以3-oxo-C12-AHL为模板分子，以亚甲基丁二酸为功能单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂，为分子印迹电化学传感器检测AHLs信号分子奠定了基矗Jiang等[44]以Fe3O4@SiO2为核、以2,5-二甲基-4-羟基-3（2H）-呋喃酮为模板分子、乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂制备磁性分子印迹，并以此聚合物为识别元件构建磁性碳电极，建立AHLs信号分子检测方法。该方法的最低检出限为8×10-10mol/L，线性范围为2.5×10-9mol/L-1.0×10-7mol/L，实际食品样品检测中表现良好。掺硼金刚石（Boron-dopeddiamond，BBD）薄膜电极具有高电流密度、背景值低、电化学稳定性好等特点，被广泛应用于分析方法的建立[45]。Zhu等[10]基于BBD电极建立了PQS信号分子检测方法，在电压为+0.768V和+1.182V之间，pH值为2时该
本文编号：3490455
本文链接：https://www.wllwen.com/projectlw/qgylw/3490455.html
