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姜黄素对猕猴桃灰霉病抑制作用机理研究

发布时间:2023-03-24 01:52
  姜黄素具有广谱的抗菌活性,灰霉病是猕猴桃采后最重要的真菌病害。本文中用姜黄素对灰霉菌和猕猴桃进行处理,研究了其对猕猴桃灰霉病的抑制作用。主要评价了不同浓度的姜黄素对猕猴桃灰霉病的抑制效果和对猕猴桃贮藏品质的影响,分析姜黄素对灰霉病的抑制作用机理。本研究得到以下结果:1、姜黄素处理后的猕猴桃发病率以及病斑的直径均显著减小,同时姜黄素处理后,猕猴桃表皮细胞中灰霉菌孢子的萌发以及菌丝的生长显著受到抑制。体外培养下姜黄素对病原菌孢子萌发、芽管伸长以及菌丝生长都具有显著抑制作用,并且在一定范围内,抑制效果随着姜黄素浓度的增加而愈加明显。2、姜黄素可诱导灰霉菌丝产生大量ROS,并引发细胞凋亡,使用ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸可部分改善姜黄素对菌丝的影响。NADPH氧化酶一个亚基基因NOXR的表达受到姜黄素的诱导,而NADPH氧化酶抑制剂二苯基碘鎓氯DPI消除了姜黄素诱导的ROS产生,表明姜黄素通过NADPH氧化酶依赖机制诱导灰霉病菌的氧化应激。3、姜黄素处理之后,可以下调促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中涉及营养生长,渗透压和致病性的三种基因Bmp1、Bmp3和Sak1。结果表明姜黄素可以...

【文章页数】:75 页

【学位级别】:硕士

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致谢
摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 猕猴桃
        1.1.1 猕猴桃简介
        1.1.2 猕猴桃的病害情况
    1.2 灰霉菌
        1.2.1 灰霉菌生物学特性及其研究进展
    1.3 水果的采后保鲜
        1.3.1 物理保鲜技术
        1.3.2 化学保鲜技术
        1.3.3 生物保鲜技术
    1.4 姜黄素及其抑菌机理的研究现状
        1.4.1 姜黄素简介
        1.4.2 姜黄素的抗氧化性
        1.4.3 姜黄素的抗菌活性
    1.5 ROS的检测机理
    1.6 课题研究的目的和意义
第二章 材料与设备
    2.1 实验材料
        2.1.1 猕猴桃
        2.1.2 灰霉菌
        2.1.3 姜黄素
    2.2 实验试剂和仪器
        2.2.1 生化试剂
        2.2.2 实验所需主要仪器设备
        2.2.3 实验所需试剂盒
    2.3 试验所需的试剂配置过程
第三章 实验方法
    3.1 姜黄素对灰霉病原菌生长情况的影响
        3.1.1 姜黄素溶液浓度的配置
        3.1.2 灰霉孢子液的配制
        3.1.3 姜黄素对灰霉病原菌孢子萌发以及芽管长度的影响
        3.1.4 姜黄素对灰霉病原菌菌落扩展的影响
    3.2 姜黄素对灰霉细胞活力的影响
    3.3 姜黄素对灰霉病原菌对渗透压敏感性的影响
    3.4 姜黄素对灰霉菌丝穿透力的影响
    3.5 灰霉菌丝RNA的提取和RT-PCR检测
        3.5.1 灰霉菌丝RNA的提取
        3.5.2 灰霉菌菌丝cDNA的反转
        3.5.3 RT-qPCR检测灰霉菌丝中相关基因的表达
    3.6 姜黄素对病原菌ROS累积水平的影响
    3.7 姜黄素对灰霉菌丝凋亡的影响
    3.8 姜黄素对灰霉菌细胞膜完整性的影响
    3.9 姜黄素对灰霉菌丝中抗氧化酶活性的影响
        3.9.1 姜黄素对病原菌菌丝中POD活性的影响
        3.9.2 姜黄素对灰霉菌丝中CAT活性的影响
        3.9.3 姜黄素对病原菌菌丝GSH-Px活性的影响
        3.9.4 姜黄素对灰霉菌丝SOD活性的影响
    3.10 二苯基碘鎓氯(DPI)和N-乙酰半胱氨酸(NAC)对姜黄素处理的菌丝体的影响
    3.11 姜黄素对灰霉菌丝几丁质的影响
    3.12 姜黄素对猕猴桃中丙二醛(MDA)和抗氧化酶活性的影响
    3.13 姜黄素对猕猴桃胼胝质的影响
    3.14 不同浓度的姜黄素对猕猴桃上灰霉菌生长的影响
        3.14.1 猕猴桃打孔接种灰霉病原菌
        3.14.2 猕猴桃表皮喷洒灰霉孢子液
    3.15 姜黄素对猕猴桃中灰霉病原菌孢子萌发以及芽管长度的影响
    3.16 姜黄素对猕猴桃硬度、SSC和 TA的影响
第四章 实验结果
    4.1 姜黄素处理对猕猴桃灰霉菌孢子萌发、芽管伸长以及菌丝生长的抑制
    4.2 姜黄素对灰霉菌丝细胞活力的影响
    4.3 姜黄素对灰霉菌对高渗透压的敏感性的影响
    4.4 姜黄素对灰霉菌丝穿透力的抑制
    4.5 姜黄素对BMP1、BMP3和SAK1 基因表达的影响
    4.6 姜黄素对灰霉菌活性氧ROS积累的影响
    4.7 姜黄素对灰霉菌丝细胞凋亡的影响
    4.8 姜黄素对灰霉菌丝细胞膜完整性的影响
    4.9 姜黄素对灰霉菌丝酶活的影响
    4.10 二苯基碘鎓氯(DPI)和N-乙酰半胱氨酸(NAC)对姜黄素处理的菌丝体的影响
    4.11 姜黄素对灰霉菌丝几丁质的影响
    4.12 姜黄素对猕猴桃中丙二醛(MDA)和抗氧化酶活性的影响
    4.13 姜黄素对猕猴桃胼胝质的影响
    4.14 姜黄素对猕猴桃打孔接种灰霉病原菌发病的影响
    4.15 姜黄素对猕猴桃表皮喷洒灰霉孢子悬浮液发病的影响
    4.16 姜黄素对猕猴桃中灰霉孢子萌发生长的抑制作用
    4.17 姜黄素对猕猴桃硬度、SSC和 TA的影响
第五章 讨论
参考文献
攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况



本文编号:3769201

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