基于脂质组学研究反式脂肪酸对人正常肝细胞脂质代谢的影响

发布时间：2023-03-24 23:03

　　流行病学和临床研究发现膳食中的反式脂肪酸(TFA)会提高血脂含量,促发动脉粥样硬化(AS),从而诱导心血管疾病(CVD)的产生,因此各国都出台了相应的政策限制工业加工食品中TFA的含量。但是TFA的来源有两种,一种是工业来源反式脂肪酸(I-TFA),另一种是反刍动物反式脂肪酸(R-TFA)。CVD是目前影响人类健康最重大的慢性疾病,CVD死亡率占所有慢性疾病死亡率的50%左右。已知I-TFA会增加心血管疾病的患病风险,而R-TFA对心血管健康的影响尚不明确。脂质组学技术是研究脂质代谢与CVD的重要方法。所以,在全球限制TFA的大环境下,基于脂质组学方法分析I-TFA和R-TFA对肝细胞脂质代谢的影响、特别是关于对心血管健康的影响是非常必要的,对阐明含TFA食品的安全性、指导合理膳食有着重要意义。因此,本课题以人正常肝细胞LO2细胞为实验对象,选择9t16:1和11t18:1代表R-TFA,9t18:1代表I-TFA,此外,依据健康人血液(HHB)、心血管疾病人血液(CHB)、牛奶(CM)以及氢化大豆油(HSO)中TFA的比例分别配置了 4种反式脂肪酸混合物(TFA-mixture),将...

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
缩略词符号注释
第1章 绪论
    1.1 引言
    1.2 概述
        1.2.1 反式脂肪酸
        1.2.2 反式脂肪酸与心血管疾病
        1.2.3 脂质组学
        1.2.4 磷脂酶A2与花生四烯酸代谢通路
    1.3 课题研究的价值、意义及主要内容
        1.3.1 课题来源
        1.3.2 研究价值和意义
        1.3.3 主要研究内容
        1.3.4 技术路线
第2章 反式脂肪酸对人正常肝细胞功能的影响
    2.1 引言
    2.2 实验材料与设备
        2.2.1 实验材料
        2.2.2 实验设备
    2.3 实验方法
        2.3.1 LO2细胞培养
        2.3.2 反式脂肪酸的配制
        2.3.3 CCK8测细胞活力
        2.3.4 脂肪酸分析
        2.3.5 细胞内ROS测定
        2.3.6 细胞膜完整性测定
        2.3.7 细胞内甘油三酯和总胆固醇测定
        2.3.8 统计学分析
    2.4 实验结果
        2.4.1 反式脂肪酸对人正常肝细胞活力的影响
        2.4.2 反式脂肪酸对人正常肝细胞脂肪酸组成的影响
        2.4.3 反式脂肪酸对人正常肝细胞内ROS相对含量的影响
        2.4.4 反式脂肪酸对人正常肝细胞膜完整性的影响
        2.4.5 反式脂肪酸对人正常肝细胞甘油三酯含量的影响
        2.4.6 反式脂肪酸对人正常肝细胞总胆固醇含量的影响
    2.5 讨论
    2.6 小结
第3章 反式脂肪酸对人正常肝细胞脂质轮廓的影响
    3.1 引言
    3.2 实验材料及设备
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 实验设备
    3.3 实验方法
        3.3.1 LO2细胞的培养
        3.3.2 细胞样本的处理与收集
        3.3.3 脂质的提取
        3.3.4 蛋白含量的测定
        3.3.5 全脂质测定方法
        3.3.6 氧化脂质测定方法
        3.3.7 统计学分析
    3.4 实验结果
        3.4.1 反式脂肪酸对LO2细胞脂质轮廓的影响
        3.4.2 反式脂肪酸对LO2细胞氧化脂质组成和含量的影响
        3.4.3 差异代谢物分析
        3.4.4 KEGG代谢通路分析
    3.5 讨论
    3.6 小结
第4章 反式脂肪酸对人正常肝细胞磷脂酶A2和花生四烯酸代谢通路的影响
    4.1 前言
    4.2 实验材料与设备
        4.2.1 实验材料
        4.2.2 实验设备
    4.3 实验方法
        4.3.1 LO2细胞的培养
        4.3.2 药物处理及分组
        4.3.3 蛋白提取与测定
        4.3.4 蛋白免疫印记(Western blot)检测蛋白表达
        4.3.5 数据分析
    4.4 实验结果
        4.4.1 反式脂肪酸对人正常肝细胞磷脂酶A2蛋白表达的影响
        4.4.2 磷脂酶A2参与反式脂肪酸诱导LO2细胞内花生四烯酸代谢通路
    4.5 讨论
    4.6 小结
第5章 结论与展望
    5.1 结论
        5.1.1 反式脂肪酸对人正常肝细胞功能的影响
        5.1.2 反式脂肪酸对人正常肝细胞脂质轮廓的影响
        5.1.3 反式脂肪酸对人正常肝细胞磷脂酶A2和花生四烯酸代谢通路的影响
    5.2 进一步工作方向
创新之处
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果



本文编号：3770025