氨基甲酸乙酯抗体的制备与免疫分析方法研究

发布时间：2023-04-10 23:11

　　氨基甲酸乙酯(Ethyl carbamate,EC)在发酵食品生产和贮藏的全过程均可产生。2007年,世界卫生组织国际癌症研究机构(International Agency for Research on Cancer,IARC)将氨基甲酸乙酯列为2A类致癌物,因此对发酵制品生产和贮藏全程的氨基甲酸乙酯浓度进行实时监控和检测显得尤为重要。传统的仪器检测法不适宜大规模的在线检测,而运用免疫法则可以满足生产线现场实时检测。本论文成功制备了氨基甲酸乙酯半抗原、人工抗原和多克隆抗体,对多克隆抗体的效果进行了评价,并初步建立了氨基甲酸乙酯间接酶联免疫吸附(ELISA)检测方法。主要研究内容如下:(1)根据氨基甲酸乙酯的结构特点,按照半抗原的设计要求和原理,通过向氨基甲酸乙酯分子中引入苯环特异性结构和直链连接臂,设计并合成了三种氨基甲酸乙酯半抗原ECH1、ECH2和ECH3,并通过核磁共振氢谱(1H NMR)和核磁共振碳谱(13C NMR)结构表征。(2)根据半抗原的结构特征,选择碳二亚胺法将合成的三种氨基甲酸乙酯半抗原分别与大分子载体牛血清蛋白(BSA)进行偶联,制得人工抗原ECA1、ECA2和...

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 氨基甲酸乙酯的概述
        1.1.1 氨基甲酸乙酯的理化特性
        1.1.2 氨基甲酸乙酯的形成过程
        1.1.3 氨基甲酸乙酯的致癌机理
    1.2 国内外食品中氨基甲酸乙酯相关标准及残留水平
        1.2.1 食品中氨基甲酸乙酯的相关标准
        1.2.2 食品中氨基甲酸乙酯的残留水平
    1.3 食品中氨基甲酸乙酯检测方法的研究进展
        1.3.1 色谱法
        1.3.2 光谱法
        1.3.3 其它方法
    1.4 免疫分析法的理论基础
        1.4.1 人工抗原的制备与效果评价
        1.4.2 酶联免疫吸附(ELISA)实验
    1.5 本论文的主要内容及意义
        1.5.1 技术路线与主要内容
        1.5.2 目的及意义
第二章 氨基甲酸乙酯半抗原的合成与表征
    2.1 试验材料
        2.1.1 主要仪器
        2.1.2 主要试剂
    2.2 试验方法
        2.2.1 三种氨基甲酸乙酯半抗原的合成
        2.2.2 氨基甲酸乙酯半抗原的结构鉴定
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 三种半抗原的结构表征
        2.3.2 讨论
    2.4 小结
第三章 氨基甲酸乙酯人工抗原的制备与评价
    3.1 试验材料
        3.1.1 主要仪器
        3.1.2 主要试剂
        3.1.3 主要溶液
    3.2 试验方法
        3.2.1 氨基甲酸乙酯人工抗原的合成
        3.2.2 氨基甲酸乙酯人工抗原的鉴定与评价
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 氨基甲酸乙酯人工抗原的初步鉴定
        3.3.2 氨基甲酸乙酯人工抗原的偶联比及蛋白含量的计算
        3.3.3 讨论
    3.4 小结
第四章 氨基甲酸乙酯多克隆抗体的制备、评价与免疫分析方法的建立
    4.1 试验材料
        4.1.1 主要仪器
        4.1.2 主要试剂
        4.1.3 主要溶液
    4.2 试验方法
        4.2.1 多克隆抗体的制备
        4.2.2 间接ELISA法评价多克隆抗体免疫特性
        4.2.3 氨基甲酸乙酯ELISA检测法的初步建立
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 多克隆抗体免疫效果评价
        4.3.2 ELISA检测法的初步建立
        4.3.3 讨论
    4.4 小结
第五章 全文结论
    5.1 主要结论
    5.2 展望
参考文献
附录 A 国内外发酵食品中EC含量
附录 B 氨基甲酸乙酯包被原的制备
附录 C EC的4-(二苯基羟甲基)苯甲酸衍生物的制备与表征
致谢
作者简历



本文编号：3788900