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高粱单宁测定方法研究

发布时间:2023-09-24 17:35
  高粱单宁结构比较复杂,定量分析相对困难。目前国际标准中高粱单宁的测定采用柠檬酸铁铵法,国内标准同样采用该方法,但该方法特异性较差,方法中的标准品为单宁酸(TA),其与高粱中的单宁在结构以及反应性质上都存在显著差异,作为标准品将造成不准确的定量。本课题首先对高粱单宁进行提取并采用葡聚糖凝胶LH-20(Sephadex LH-20)层析法进行了分离纯化,根据单宁聚合度的不同使用正相高压液相(NP-HPLC)二醇柱分离后对单宁的纯度进行计算,得到了纯度较高的单宁(ST)为后续探索分光光度法中定量高粱单宁的市售标准品TA,表儿茶素(EA)以及原花青素(PA)提供参考。接着对柠檬酸铁铵法和香草醛法定量单宁含量的实验步骤以及标准品进行了改进研究,然后探索了普鲁士蓝法,酸正丁醇法以及蛋白质沉淀法定量高粱单宁的实验步骤以及标准品,最后对五种分光光度法进行了优缺点的比较分析。本研究的实验目的是根据ISO 9648-1988“Sorghum-Determination of tannin content”国际标准草案的修订工作要求,选择特异性好,灵敏度高,简单快捷,可以普遍应用于国际各实验室间定量高粱中单...

【文章页数】:94 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
abstract
主要符号表
1 绪论
    1.1 课题研究的目的和意义
    1.2 国内外研究进展
        1.2.1 高粱单宁的结构
        1.2.2 高粱单宁的分布
        1.2.3 高粱单宁的提纯分离与结构鉴定
        1.2.4 高粱单宁的检测方法
        1.2.5 影响高粱单宁含量测定的因素
    1.3 课题研究前景
    1.4 课题研究目标
    1.5 课题研究内容
    1.6 研究思路框架图
2 高粱单宁的提取分离与纯度鉴定
    2.1 引言
    2.2 材料与设备
        2.2.1 实验材料
        2.2.2 实验试剂
        2.2.3 实验仪器与设备
    2.3 实验方法
        2.3.1 高粱单宁的提取分离
        2.3.2 高粱单宁的正相高压液相(NP-HPLC)分析
        2.3.3 高粱单宁纯度鉴定
        2.3.4 数据处理
    2.4 结果与讨论
        2.4.1 高粱单宁提取溶剂的确定
        2.4.2 高粱单宁的分离纯化分析
        2.4.3 分离纯化后组分的液相分析
        2.4.4 标准品原花青素的液相分析
    2.5 本章小结
3 柠檬酸铁铵法定量高粱单宁方法改进
    3.1 引言
    3.2 材料与设备
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 试剂
        3.2.3 实验仪器与设备
    3.3 实验方法
        3.3.1 标准曲线的绘制
        3.3.2 测定方法
        3.3.3 单宁含量计算公式
        3.3.4 回收率测定
        3.3.5 重复率测定
        3.3.6 数据处理
    3.4 结果与讨论
        3.4.1 标准品的改进
        3.4.2 提取溶剂的改进
        3.4.3 提取条件的优化
        3.4.4 反应条件的优化
        3.4.5 回归方程
        3.4.6 最低检出限
        3.4.7 回收率
        3.4.8 重复率
        3.4.9 改进前后方法对比
    3.5 本章小节
4 香草醛法定量高粱单宁方法改进
    4.1 引言
    4.2 材料与设备
        4.2.1 实验材料
        4.2.2 试剂
        4.2.3 实验仪器与设备
    4.3 实验方法
        4.3.1 标准曲线的绘制
        4.3.2 测定方法
        4.3.3 单宁含量计算公式
        4.3.4 回收率测定
        4.3.5 重复率测定
        4.3.6 数据处理
    4.4 结果与讨论
        4.4.1 标准品的改进
        4.4.2 提取条件的确定
        4.4.3 反应条件的确定
        4.4.4 回归方程
        4.4.5 最低检出限
        4.4.6 回收率
        4.4.7 重复率
        4.4.8 香草醛法应用
    4.5 本章小节
5 五种分光光度法定量高粱单宁测定方法比较分析
    5.1 引言
    5.2 普鲁士蓝法
        5.2.1 实验材料与试剂
        5.2.2 标准曲线的绘制
        5.2.3 测定方法
        5.2.4 单宁含量计算公式
        5.2.5 回收率测定
        5.2.6 重复率测定
        5.2.7 数据处理
        5.2.8 结果与讨论
            5.2.8.1 提取溶剂的确定
            5.2.8.2 标准品的选择
            5.2.8.3 回归方程
            5.2.8.4 最低检出限
            5.2.8.5 回收率
            5.2.8.6 重复率
    5.3 酸正丁醇法
        5.3.1 实验材料与试剂
        5.3.2 标准曲线的绘制
        5.3.3 测定方法
        5.3.4 单宁含量计算公式
        5.3.5 回收率测定
        5.3.6 重复率测定
        5.3.7 数据处理
        5.3.8 结果与讨论
            5.3.8.1 标准品的选择
            5.3.8.2 回归方程
            5.3.8.3 最低检出限
            5.3.8.4 回收率
            5.3.8.5 重复率
    5.4 蛋白质沉淀法
        5.4.1 实验材料与试剂
        5.4.2 标准曲线的绘制
        5.4.3 测定方法
        5.4.4 单宁含量计算公式
        5.4.5 回收率测定
        5.4.6 重复率测定
        5.4.7 数据处理
        5.4.8 结果与讨论
            5.4.8.1 标准曲线的绘制
            5.4.8.2 回归方程
            5.4.8.3 最低检出限
            5.4.8.4 回收率
            5.4.8.5 重复率
    5.5 五种方法比较分析
    5.6 本章小节
结论
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间发表的论文及科研成果



本文编号:3848458

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