日本黄姑鱼皮胶原蛋白理化特性及其胶原蛋白肽活性研究
发布时间：2023-10-21 10:50
近年来,随着海产品加工业的蓬勃发展,产生了大量的副产品,这些副产品要么被丢弃,要么仅仅用作动物饲料或肥料。因此,迫切需要利用这些副产品生产高附加值产品。海洋资源生物活性肽具有许多生理功能,包括抗氧化、抗肿瘤、抗菌、血管紧张素转换酶(ACE)抑制、护肝和促伤口愈合等活性。此外,加工废弃物中的鱼皮、鱼骨、鱼鳞等中含有丰富的胶原蛋白。因此,从海产品加工废弃物中提取胶原蛋白或生物活性肽可为其高值化利用提供新的途径,从而减少环境污染,并创造巨大的经济效益。本实验以日本黄姑鱼鱼皮为原料,提取胶原蛋白并测定其理化特性和功能特性,为其在化妆品添加剂或生物材料的应用中奠定基础。此外,利用日本黄姑鱼鱼皮制备胶原蛋白肽,测定其理化特性和功能特性,为其促伤口愈合奠定基础。本实验的主要研究结果如下:(1)利用单因素和响应面试验对日本黄姑鱼鱼皮酶溶性胶原蛋白(PSC)的酶解条件进行优化,经过回归拟合得到加酶量、料液比和酶解时间的二次多项回归方程为:提取率=83.73+3.53X1+1.47X2+1.78X3-0.11X1X
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
1.1 胶原蛋白的类型
1.2 胶原蛋白的结构特点
1.3 胶原蛋白的提取方法
1.4 胶原蛋白的理化性质
1.4.1 胶原蛋白的氨基酸组成
1.4.2 胶原蛋白的热稳定性
1.4.3 胶原蛋白其它理化性质
1.5 胶原蛋白的应用
1.5.1 胶原蛋白在食品中的应用
1.5.2 胶原蛋白在化妆品中的应用
1.5.3 胶原蛋白在医学中的应用
1.6 海洋胶原蛋白肽的制备方法
1.7 海洋胶原蛋白肽的生物活性
1.7.1 抗衰老性
1.7.2 抗氧化活性
1.7.3 抗菌活性
1.7.4 促伤口愈合性
1.8 本研究的目的和意义
第二章 日本黄姑鱼鱼皮酶溶性胶原蛋白提取工艺条件的优化
2.1 材料
2.1.1 实验材料
2.1.2 主要试剂
2.1.3 仪器与设备
2.2 方法
2.2.1 日本黄姑鱼鱼皮预处理
2.2.2 酶法提取日本黄姑鱼鱼皮胶原蛋白
2.2.3 单因素试验
2.2.4 响应面试验设计
2.2.5 胶原蛋白含量的测定
2.2.6 统计方法
2.3 实验结果
2.3.1 羟脯氨酸标准曲线的测定结果
2.3.2 日本黄姑鱼鱼皮中羟脯氨酸含量的测定结果
2.3.3 单因素实验结果
2.3.4 响应面对PSC提取条件的优化结果
2.4 结论
第三章 日本黄姑鱼鱼皮酸溶性胶原蛋白和酶溶性胶原蛋白的理化特性研究
3.1 材料
3.1.1 细胞与样品
3.1.2 药物与试剂
3.1.3 主要仪器
3.2 方法
3.2.1 细胞培养
3.2.2 酸法提取ASC
3.2.3 氨基酸分析
3.2.4 热变性温度的测定
3.2.5 SDS-PAGE分析
3.2.6 傅里叶红外光谱分析
3.2.7 电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析
3.2.8 水合性质测定
3.2.9 细胞毒性检测(MTT法)
3.2.10 细胞致敏性分析(乳酸脱氢酶(LDH)释放法)
3.2.11 倒置显微镜观察细胞形态
3.2.12 统计方法
3.3 结果
3.3.1 ASC和 PSC提取率结果
3.3.2 氨基酸组成结果
3.3.3 热变性温度测定结果
3.3.4 SDS-PAGE分析结果
3.3.5 红外光谱分析结果
3.3.6 电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析结果
3.3.7 PSC的吸湿保湿性质测定结果
3.3.8 PSC对小鼠成纤维细胞NIH-3T3 毒性分析结果
3.3.9 PSC对小鼠成纤维细胞NIH-3T3 过敏性分析结果
3.3.10 形态学分析结果
3.4 结论
第四章 胶原蛋白肽的制备及其功能活性评价
4.1 材料
4.1.1 实验材料
4.1.2 药物与试剂
4.1.3 主要仪器
4.2 方法
4.2.1 MCPs的制备
4.2.2 MCPs的分子量测定
4.2.3 MCPs的氨基酸组成测定
4.2.4 抗氧化活性评价
4.2.5 细胞增殖实验
4.2.6 细胞划痕实验
4.2.7 Western Blot检测蛋白表达情况
4.2.8 统计方法
4.3 结果
4.3.1 酶种筛选结果
4.3.2 单因素实验结果
4.3.3 MCPs的分子量分布测定结果
4.3.4 MCPs的氨基酸组成测定结果
4.3.5 MCPs的抗氧化活性测定
4.3.6 细胞增殖实验结果
4.3.7 细胞划痕实验结果
4.3.8 Western Blot检测蛋白表达结果
4.4 结论
第五章 结论与展望
5.1 结论
5.2 展望
参考文献
致谢
在读期间发表的学术论文及研究成果
本文编号：3855688
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
1.1 胶原蛋白的类型
1.2 胶原蛋白的结构特点
1.3 胶原蛋白的提取方法
1.4 胶原蛋白的理化性质
1.4.1 胶原蛋白的氨基酸组成
1.4.2 胶原蛋白的热稳定性
1.4.3 胶原蛋白其它理化性质
1.5 胶原蛋白的应用
1.5.1 胶原蛋白在食品中的应用
1.5.2 胶原蛋白在化妆品中的应用
1.5.3 胶原蛋白在医学中的应用
1.6 海洋胶原蛋白肽的制备方法
1.7 海洋胶原蛋白肽的生物活性
1.7.1 抗衰老性
1.7.2 抗氧化活性
1.7.3 抗菌活性
1.7.4 促伤口愈合性
1.8 本研究的目的和意义
第二章 日本黄姑鱼鱼皮酶溶性胶原蛋白提取工艺条件的优化
2.1 材料
2.1.1 实验材料
2.1.2 主要试剂
2.1.3 仪器与设备
2.2 方法
2.2.1 日本黄姑鱼鱼皮预处理
2.2.2 酶法提取日本黄姑鱼鱼皮胶原蛋白
2.2.3 单因素试验
2.2.4 响应面试验设计
2.2.5 胶原蛋白含量的测定
2.2.6 统计方法
2.3 实验结果
2.3.1 羟脯氨酸标准曲线的测定结果
2.3.2 日本黄姑鱼鱼皮中羟脯氨酸含量的测定结果
2.3.3 单因素实验结果
2.3.4 响应面对PSC提取条件的优化结果
2.4 结论
第三章 日本黄姑鱼鱼皮酸溶性胶原蛋白和酶溶性胶原蛋白的理化特性研究
3.1 材料
3.1.1 细胞与样品
3.1.2 药物与试剂
3.1.3 主要仪器
3.2 方法
3.2.1 细胞培养
3.2.2 酸法提取ASC
3.2.3 氨基酸分析
3.2.4 热变性温度的测定
3.2.5 SDS-PAGE分析
3.2.6 傅里叶红外光谱分析
3.2.7 电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析
3.2.8 水合性质测定
3.2.9 细胞毒性检测(MTT法)
3.2.10 细胞致敏性分析(乳酸脱氢酶(LDH)释放法)
3.2.11 倒置显微镜观察细胞形态
3.2.12 统计方法
3.3 结果
3.3.1 ASC和 PSC提取率结果
3.3.2 氨基酸组成结果
3.3.3 热变性温度测定结果
3.3.4 SDS-PAGE分析结果
3.3.5 红外光谱分析结果
3.3.6 电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析结果
3.3.7 PSC的吸湿保湿性质测定结果
3.3.8 PSC对小鼠成纤维细胞NIH-3T3 毒性分析结果
3.3.9 PSC对小鼠成纤维细胞NIH-3T3 过敏性分析结果
3.3.10 形态学分析结果
3.4 结论
第四章 胶原蛋白肽的制备及其功能活性评价
4.1 材料
4.1.1 实验材料
4.1.2 药物与试剂
4.1.3 主要仪器
4.2 方法
4.2.1 MCPs的制备
4.2.2 MCPs的分子量测定
4.2.3 MCPs的氨基酸组成测定
4.2.4 抗氧化活性评价
4.2.5 细胞增殖实验
4.2.6 细胞划痕实验
4.2.7 Western Blot检测蛋白表达情况
4.2.8 统计方法
4.3 结果
4.3.1 酶种筛选结果
4.3.2 单因素实验结果
4.3.3 MCPs的分子量分布测定结果
4.3.4 MCPs的氨基酸组成测定结果
4.3.5 MCPs的抗氧化活性测定
4.3.6 细胞增殖实验结果
4.3.7 细胞划痕实验结果
4.3.8 Western Blot检测蛋白表达结果
4.4 结论
第五章 结论与展望
5.1 结论
5.2 展望
参考文献
致谢
在读期间发表的学术论文及研究成果
本文编号：3855688
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