中国野生毛葡萄VqTLP15基因的克隆与抗病性功能研究（英文）

发布时间：2021-07-09 13:09

　　该研究以抗病品种中国野生毛葡萄‘商-24’和感病品种欧洲葡萄‘红地球’为材料,利用RT-PCR方法克隆TLP15基因,分别命名为VqTLP15和VvTLP15（GSVIVT01018769001）,对其进行生物信息学分析、亚细胞定位、转化拟南芥,并接种不同病原菌观察分析转基因株系的抗性,采用qRT-PCR检测SA和JA/Eth信号途径以及调控气孔运动的相关基因表达。结果显示:（1）成功克隆获得VqTLP15基因的开放阅读框（ORF）;氨基酸序列比对显示,VqTLP15基因与葡萄基因组网站欧洲葡萄‘黑比诺’VvTLP15和‘红地球’克隆的VvTLP15基因的同源性分别为98.99%和99.66%。（2）亚细胞定位表明,VqTLP15定位于细胞质。（3）成功获得VqTLP15转基因拟南芥株系（L1、 L2、 L3）。（4）接种观察发现:白粉菌处理7 d后转基因株系对白粉菌的抗性较野生型（Col-0）提高,且其叶片的白粉菌孢子浓度显著低于Col-0;灰霉菌诱导的叶片坏死性损伤在转基因株系（L1、L2和L3病斑面积>40%的比例分别为71%、62%和67%）中显著大于Col-0（43%）... 

【文章来源】：西北植物学报. 2020,40(05)北大核心CSCD

【文章页数】：12 页

【文章目录】：
1 Materials and methods
    1.1 Plant materials
    1.2 Methods
        1.2.1 VqTLP15 sequence analysis
        1.2.2 Subcellular localization analysis of VqTLP15
        1.2.3 Generation of VqTLP15 over-expressing A. thaliana lines
        1.2.4 A. thaliana disease assays
        1.2.5 Histochemical staining
        1.2.6 Response of stomata to different treatments
        1.2.7 RNA isolation and quantitative RT-PCR
    1.3 Statistical analysis
2 Results
    2.1 VqTLP15 cloning and sequence analysis
    2.2 Subcellular localization of VqTLP15
    2.3 Response of VqTLP15 over-expressing A. thaliana lines to powdery mildew
    2.4 Response of VqTLP15 over-expressing A. thaliana lines to B. cinerea
    2.5 Response of VqTLP15 over-expressing A. thaliana lines to PstDC3000
    2.6 Stomatal closure immunity response
3 Discussion



本文编号：3273810